| 中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-22页 |
| ·犬瘟热概述 | 第13页 |
| ·CDV病原学特征 | 第13-14页 |
| ·CDV的理化特性 | 第14页 |
| ·CDV的分子生物学特征及功能 | 第14-16页 |
| ·核衣壳蛋白 | 第14-15页 |
| ·磷蛋白 | 第15页 |
| ·基质蛋白 | 第15页 |
| ·融合蛋白 | 第15-16页 |
| ·血凝蛋白 | 第16页 |
| ·大分子蛋白 | 第16页 |
| ·CDV复制繁殖过程 | 第16-17页 |
| ·CDV临床症状和病理变化 | 第17-18页 |
| ·犬瘟热病毒的流行病学 | 第18页 |
| ·CDV的诊断 | 第18-20页 |
| ·抗体的检测 | 第18页 |
| ·抗原检测 | 第18-20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 犬瘟热病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及序列分析 | 第22-38页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·毒株、细胞和病料 | 第22页 |
| ·常用试剂和载体 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·犬瘟热病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第23-26页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第23页 |
| ·提取病毒RNA及cDNA的合成 | 第23页 |
| ·标准品重组质粒的制备 | 第23-25页 |
| ·反应体系的优化 | 第25-26页 |
| ·特异性试验 | 第26页 |
| ·敏感性试验 | 第26页 |
| ·稳定性试验 | 第26页 |
| ·临床样品检测 | 第26页 |
| ·CDV-H基因序列分析 | 第26-28页 |
| ·CDV-H核苷酸序列分析 | 第26-28页 |
| ·CDV-H蛋白的氨基酸分析 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-37页 |
| ·标准品的准备 | 第28-29页 |
| ·TaqMan荧光定量RT-PCR标准曲线的建立 | 第29-32页 |
| ·临床样品的检测 | 第32页 |
| ·CDV-H基因分析 | 第32-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 CDV-H蛋白的真核表达及单克隆抗体的制备 | 第38-54页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·病毒、细胞和实验动物 | 第38页 |
| ·常用试剂 | 第38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38页 |
| ·主要溶液和培养基的配制 | 第38-39页 |
| ·CDV-H蛋白的真核表达 | 第39-44页 |
| ·引物设计 | 第39-40页 |
| ·提取病毒RNA及cDNA的合成 | 第40页 |
| ·CDV-H基因的扩增、鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pFastBac~(TM)HTA-CDV-rH的构建 | 第41-42页 |
| ·重组穿梭质粒的构建及鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组杆状病毒BACV-rH在Sf9细胞中的表达与分析 | 第43页 |
| ·Western blot融合蛋白鉴定 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体制备过程 | 第44-47页 |
| ·动物免疫 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第44-46页 |
| ·小鼠腹水的制备 | 第46页 |
| ·McAb的鉴定 | 第46-47页 |
| ·结果 | 第47-52页 |
| ·CDV-H基因的PCR扩增 | 第47页 |
| ·pFast~(TM)BacHTA-rH重组供体质粒的鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组杆粒reBACmid-H的鉴定 | 第48页 |
| ·重组杆状病毒的获得 | 第48-49页 |
| ·真核表达CDV-H蛋白的SDS-PAGE电泳分析 | 第49页 |
| ·重组蛋白的Western blot分析 | 第49-50页 |
| ·McAb的生物特性鉴定 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简历 | 第65页 |
