| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-22页 |
| ·SELEX技术 | 第10-13页 |
| ·SELEX技术的起源 | 第10页 |
| ·SELEX技术的原理 | 第10-12页 |
| ·SELEX筛选技术的发展 | 第12-13页 |
| ·核酸适配体 | 第13-15页 |
| ·核酸适配体的作用原理及其特点 | 第14-15页 |
| ·寡核苷酸次级文库的制备方法 | 第15-18页 |
| ·不对称PCR的方法 | 第15-16页 |
| ·生物素链亲和素的方法 | 第16-17页 |
| ·使用λ核酸外切酶消化的方法 | 第17页 |
| ·变性PAGE胶分离的方法 | 第17-18页 |
| ·核酸适配体的应用 | 第18-20页 |
| ·分子成像 | 第18页 |
| ·核开关 | 第18-19页 |
| ·生物传感器 | 第19页 |
| ·临床治疗的药物 | 第19-20页 |
| ·问题与展望 | 第20-21页 |
| ·课题研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 靶标消减SELEX技术筛选HIV-P24蛋白核酸适配体 | 第22-36页 |
| ·材料与仪器 | 第22-25页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要溶剂的配制 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·封闭条件的优化 | 第25-26页 |
| ·筛选HIV-P24蛋白的核酸适配体 | 第26-29页 |
| ·结果 | 第29-34页 |
| ·封闭条件的优化 | 第29-32页 |
| ·HIV-P24核酸适配体的富集结果 | 第32-33页 |
| ·寡核苷酸ssDNA制备情况 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·封闭条件的优化 | 第34页 |
| ·电泳检测富集结果 | 第34-35页 |
| ·不对称PCR条件的优化 | 第35页 |
| ·筛选结果 | 第35-36页 |
| 第3章 HIV-P24蛋白核酸适配体的转化、鉴定与测序 | 第36-52页 |
| ·材料与仪器 | 第36-38页 |
| ·主要试剂 | 第36-37页 |
| ·主要溶剂的配制 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-44页 |
| ·寡核苷酸转化大肠杆菌感受态细胞 | 第38-41页 |
| ·HIV-P24蛋白特异核酸适配体的鉴定 | 第41-44页 |
| ·结果 | 第44-50页 |
| ·转化实验 | 第44-46页 |
| ·特异核酸适配体鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·蛋白梯度-核酸斑点杂交的鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·实时荧光定量PCR的鉴定结果 | 第48页 |
| ·测序结果及二级结构预测 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·感受态细胞的使用 | 第50页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第50页 |
| ·特异性鉴定实验 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录A 英文缩略词 | 第60-61页 |
| 附录B pMD(?)18-T Vector结构及位点说明 | 第61-62页 |
| 附录C 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第62页 |
