| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| ·microRNA简介 | 第12-14页 |
| ·microRNA的发现 | 第12页 |
| ·microRNA的生成路径 | 第12-13页 |
| ·miRNAs的生物学特性及功能 | 第13-14页 |
| ·骨骼肌的生长发育 | 第14-16页 |
| ·脊椎动物肌生成的遗传学 | 第14-15页 |
| ·肌生成分子调控 | 第15页 |
| ·肌生成通路的影响 | 第15-16页 |
| ·miRNA-1和miRNA-206与肌肉的生长发育 | 第16-17页 |
| ·猪中miRNAs的研究进展 | 第17页 |
| ·microRNA靶标基因的预测和鉴定 | 第17-18页 |
| ·SFRP1和SFRP2基因的研究进展 | 第18-19页 |
| ·研究问题的目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·试验材料 | 第21-24页 |
| ·试验动物 | 第21页 |
| ·试验细胞 | 第21页 |
| ·试验中所用的载体及菌株 | 第21页 |
| ·试验中的主要试剂盒 | 第21-22页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第22页 |
| ·试剂及配制 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·生物学数据库及分析软件 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-31页 |
| ·靶标预测 | 第24页 |
| ·猪SFRP1的序列拼接 | 第24页 |
| ·SFRP1和SFRP2基因片段的获得 | 第24-25页 |
| ·PCR扩增产物的胶回收、pMD18-T载体连接、阳性克隆鉴定和测序 | 第25-26页 |
| ·载体构建 | 第26-27页 |
| ·细胞培养 | 第27页 |
| ·细胞转染 | 第27-28页 |
| ·萤光素酶活性检测 | 第28页 |
| ·RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·反转录 | 第29-30页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第30页 |
| ·细胞蛋白的提取及Western blot | 第30页 |
| ·数据处理 | 第30-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-54页 |
| ·靶标基因的预测 | 第31页 |
| ·靶标基因的生物信息学分析 | 第31-35页 |
| ·靶标基因的GO(Gene onlotogy)本体论分析 | 第31-35页 |
| ·靶标基因的通路分析 | 第35页 |
| ·SFRP1和SFRP2靶标基因的确定及生物信息学分析 | 第35-39页 |
| ·载体构建及双萤光素酶活性的检测 | 第39-43页 |
| ·SFRP1 mRNA序列的获得 | 第39页 |
| ·载体构建 | 第39-41页 |
| ·细胞转染 | 第41页 |
| ·双萤光素酶活性检测 | 第41-43页 |
| ·SFRP1在RNA水平和蛋白水平的检测 | 第43-45页 |
| ·RNA水平的检测 | 第43-44页 |
| ·过表达SFRP1基因的蛋白检测 | 第44-45页 |
| ·SFRP1和SFRP2的时空表达及其与miRNA-1,miRNA-206的相关分析 | 第45-51页 |
| ·RNA的质量检测 | 第45页 |
| ·SFRP1和SFRP2基因在通城成年母猪各组织中的表达 | 第45-46页 |
| ·SFRP1和SFRP2基因在通城猪背肌中的时间表达谱(共27个时间点) | 第46-47页 |
| ·SFRP1和SFRP2基因在长白猪背肌中的时间表达谱(共23个时间点) | 第47-48页 |
| ·SFRP1,SFRP2与miRNA-1,miRNA-206的表达相关 | 第48-49页 |
| ·SFRP1和SFRP2基因在通城猪和长白猪背肌发育中的表达差异 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| ·靶标基因的预测与筛选 | 第51页 |
| ·关于靶标基因的鉴定 | 第51-52页 |
| ·SFRPl与miRNA-1,miRNA-206结合位点的确定 | 第52页 |
| ·关于SFRP1和SFRP2靶标基因的研究 | 第52-54页 |
| 第四章 结论 | 第54-55页 |
| ·主要研究结果 | 第54页 |
| ·创新点 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
