| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-18页 |
| ·ABA及其信号传导途径 | 第10-14页 |
| ·接收ABA信号——ABA受体 | 第11-12页 |
| ·捕获信号——ABA受体结合ABA后与PP2Cs相互作用 | 第12-13页 |
| ·处理信号——SnRK2的调节作用 | 第13-14页 |
| ·响应信号——ABA依赖的基因表达 | 第14页 |
| ·ABⅠ5家族及保守区Ⅱ | 第14-15页 |
| ·转录激活域(TADs)研究进展 | 第15-18页 |
| ·转录激活域 | 第15页 |
| ·转录激活域与通用转录因子 | 第15-16页 |
| ·转录激活域分类 | 第16-18页 |
| 第2章 材料 | 第18-23页 |
| ·菌种、质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第18-21页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·酵母质粒转化试剂 | 第18-19页 |
| ·酵母单杂交试剂 | 第19页 |
| ·其他试剂配制 | 第19-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-23页 |
| 第3章 实验方案 | 第23-37页 |
| ·CRⅡ突变策略 | 第23-25页 |
| ·AtDPBF4的转录激活域验证 | 第23页 |
| ·CRⅡ一级和二级结构分析 | 第23页 |
| ·CⅡ定向突变 | 第23-25页 |
| ·突变片段引物设计 | 第25-31页 |
| ·PCR方法选择 | 第25页 |
| ·突变体两端序列选择 | 第25-26页 |
| ·突变体片段引物序列 | 第26-27页 |
| ·各突变体片段PCR合成 | 第27-28页 |
| ·PCR产物纯化 | 第28-29页 |
| ·pGBKT7质粒制备 | 第29页 |
| ·纯化后的突变片段、pGBKT7质粒双酶切 | 第29-30页 |
| ·凝胶回收 | 第30-31页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第31-33页 |
| ·筛选方法 | 第31-32页 |
| ·菌落PCR中菌体制备 | 第32页 |
| ·PCR方法筛选阳性 | 第32页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第32-33页 |
| ·酵母单杂交 | 第33-37页 |
| ·Y187感受态细胞制备 | 第33-34页 |
| ·阳性重组质粒转化酵母菌Y187 | 第34页 |
| ·转化子鉴定 | 第34-35页 |
| ·酵母单杂交 | 第35-37页 |
| 第4章 实验结果与分析 | 第37-46页 |
| ·软件预测 | 第37-38页 |
| ·DNAman预测结果 | 第37页 |
| ·PHD软件预测二级机构 | 第37-38页 |
| ·9aa TAD对AtDPBF4蛋白质序列的分析 | 第38页 |
| ·针对CRⅡ螺旋破坏预测结果 | 第38页 |
| ·突变体构建 | 第38-40页 |
| ·酵母单杂交质粒转化结果验证 | 第40页 |
| ·酵母单杂交 | 第40-46页 |
| ·Y187感受态细胞转化效率 | 第40-41页 |
| ·重组质粒浓度 | 第41页 |
| ·未获得单杂交实验数据的重组质粒 | 第41-42页 |
| ·酵母单杂交 | 第42-46页 |
| 第5章 讨论 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录A 重组质粒测序结果 | 第55-63页 |
| 附录B ABI5家族序列比对 | 第63-65页 |