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抑制PRRSV增殖的miRNA的筛选

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
縮略语表第10-11页
第1章 文献综述第11-18页
   ·PRRSV第11-13页
     ·PRRSV理化特性第11-12页
     ·PRRSV分子生物学第12页
     ·PRRS的防治第12-13页
   ·miRNA第13-18页
     ·miRNA的产生及作用方式第13-15页
     ·miRNA参与多种生命过程第15-16页
     ·miRNA表达的调控第16页
     ·miRNA应用前景第16-17页
     ·miRNA研究方法第17-18页
第2章 目的与意义第18-19页
第3章 材料与方法第19-32页
   ·实验材料第19-23页
     ·毒株与菌株第19页
     ·细胞系以及转染相关材料第19页
     ·载体及构建所用材料第19-20页
     ·Western-blot试验所用材料第20-21页
     ·培养基及其配制第21页
     ·Western-blot相关试剂配制第21-22页
     ·分子生物学分析软件第22-23页
   ·实验方法第23-32页
     ·靶基因3'UTR报告质粒的构建第23-28页
     ·靶点突变报告质粒的构建第28页
     ·双荧光素酶报告系统第28页
     ·Western Blot检测PRRSV蛋白水平变化第28-29页
     ·VSV-GFP的增殖实验第29页
     ·空斑试验检测PRRSV的增殖差异第29页
     ·荧光定量qRT-PCR检测miRNA表达差异第29-31页
     ·统计学方法第31-32页
第4章 结果与分析第32-45页
   ·miRNA的预测及报告质粒构建第32-35页
     ·miRNA的在线预测第32-33页
     ·PRRSV WUH3株报告质粒构建第33-35页
   ·miRNA对PRRSV增殖的影响第35-41页
     ·PRRSV WUH3株报告质粒本底表达水平检测第35页
     ·miRNA对PRRSV WUH3株报告质粒作用的检测第35-36页
     ·Western Blot检测miRNA对PRRSV蛋白表达的抑制第36-38页
     ·剂量关系和时间点确定第38-39页
     ·空斑实验检测miRNA对PRRSV的抑制作用第39-41页
   ·miRNA对IFN-β的作用第41-42页
   ·miRNA作用靶点验证第42-44页
   ·PRRSV调控miRNA的表达第44-45页
第5章 讨论与结论第45-48页
   ·讨论第45-47页
   ·结论第47-48页
参考文献第48-52页
致谢第52页

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