摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
縮略语表 | 第10-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-18页 |
·PRRSV | 第11-13页 |
·PRRSV理化特性 | 第11-12页 |
·PRRSV分子生物学 | 第12页 |
·PRRS的防治 | 第12-13页 |
·miRNA | 第13-18页 |
·miRNA的产生及作用方式 | 第13-15页 |
·miRNA参与多种生命过程 | 第15-16页 |
·miRNA表达的调控 | 第16页 |
·miRNA应用前景 | 第16-17页 |
·miRNA研究方法 | 第17-18页 |
第2章 目的与意义 | 第18-19页 |
第3章 材料与方法 | 第19-32页 |
·实验材料 | 第19-23页 |
·毒株与菌株 | 第19页 |
·细胞系以及转染相关材料 | 第19页 |
·载体及构建所用材料 | 第19-20页 |
·Western-blot试验所用材料 | 第20-21页 |
·培养基及其配制 | 第21页 |
·Western-blot相关试剂配制 | 第21-22页 |
·分子生物学分析软件 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-32页 |
·靶基因3'UTR报告质粒的构建 | 第23-28页 |
·靶点突变报告质粒的构建 | 第28页 |
·双荧光素酶报告系统 | 第28页 |
·Western Blot检测PRRSV蛋白水平变化 | 第28-29页 |
·VSV-GFP的增殖实验 | 第29页 |
·空斑试验检测PRRSV的增殖差异 | 第29页 |
·荧光定量qRT-PCR检测miRNA表达差异 | 第29-31页 |
·统计学方法 | 第31-32页 |
第4章 结果与分析 | 第32-45页 |
·miRNA的预测及报告质粒构建 | 第32-35页 |
·miRNA的在线预测 | 第32-33页 |
·PRRSV WUH3株报告质粒构建 | 第33-35页 |
·miRNA对PRRSV增殖的影响 | 第35-41页 |
·PRRSV WUH3株报告质粒本底表达水平检测 | 第35页 |
·miRNA对PRRSV WUH3株报告质粒作用的检测 | 第35-36页 |
·Western Blot检测miRNA对PRRSV蛋白表达的抑制 | 第36-38页 |
·剂量关系和时间点确定 | 第38-39页 |
·空斑实验检测miRNA对PRRSV的抑制作用 | 第39-41页 |
·miRNA对IFN-β的作用 | 第41-42页 |
·miRNA作用靶点验证 | 第42-44页 |
·PRRSV调控miRNA的表达 | 第44-45页 |
第5章 讨论与结论 | 第45-48页 |
·讨论 | 第45-47页 |
·结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
致谢 | 第52页 |