中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-23页 |
·农杆菌及农杆菌介导的转基因技术 | 第8-9页 |
·农杆菌介导的遗传转化的过程 | 第9-15页 |
·T-DNA的产生 | 第10-11页 |
·T-复合物的形成 | 第11-12页 |
·四型分泌系统的组成及功能 | 第12-13页 |
·T-复合物与T4SS的识别 | 第13-14页 |
·T-DNA与宿主DNA的整合机制 | 第14-15页 |
·与T-DNA转运有关的重要蛋白 | 第15-18页 |
·VirD2与VirE2蛋白的功能 | 第15-16页 |
·VirA-VirG双组分信号转导系统 | 第16-18页 |
·与vir基因诱导有关的几个因子 | 第18-20页 |
·酚类化合物对vir基因表达的影响 | 第18-19页 |
·pH对vir基因诱导表达的影响 | 第19页 |
·温度对vir基因诱导表达的影响 | 第19-20页 |
·VBP蛋白的结构特征及功能 | 第20-21页 |
·该研究的目的及意义 | 第21-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-35页 |
·材料 | 第23-25页 |
·菌株、质粒、引物和培养基 | 第23页 |
·工具酶和试剂盒 | 第23-25页 |
·DNA的制备、扩增、纯化以及细菌转化的相关方法 | 第25-29页 |
·表达VBP1蛋白质粒的构建 | 第27页 |
·琼脂糖凝胶电泳和DNA纯化 | 第27-28页 |
·质粒DNA的制备 | 第28页 |
·DNA的酶切和酶连 | 第28-29页 |
·细菌细胞的转化 | 第29页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第29-32页 |
·大肠杆菌中VBP蛋白的表达 | 第32页 |
·农杆菌的诱导培养 | 第32-33页 |
·抗体的制备 | 第33页 |
·抗体专一性验证方法Western blot | 第33-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-49页 |
·VBP蛋白的表达 | 第35-38页 |
·构建表达VBP1蛋白的质粒 | 第35-36页 |
·目的基因与质粒的酶切、连接及转化 | 第36-37页 |
·大肠杆菌中VBP蛋白的表达 | 第37页 |
·多肽抗原的确定与抗体专一性的鉴定 | 第37-38页 |
·不同pH、温度、AS浓度对农杆菌vbp基因表达的影响 | 第38-49页 |
·C58中VBP蛋白的表达情况 | 第39-41页 |
·pH对农杆菌C58中vbp基因表达的影响 | 第39-40页 |
·温度对农杆菌C58中vbp基因表达的影响 | 第40页 |
·AS浓度对农杆菌C58中vbp基因表达的影响 | 第40-41页 |
·GMI9017中VBP蛋白的表达情况 | 第41-44页 |
·pH对农杆菌GMI9017中vbp基因表达的影响 | 第42-43页 |
·温度对农杆菌GMI9017中vbp基因表达的影响 | 第43页 |
·AS浓度对农杆菌GMI9017中vbp基因表达的影响 | 第43-44页 |
·GMI9017ΔVBP2中VBP3蛋白的表达情况 | 第44-45页 |
·GMI9017ΔVBP2 VBP3中VBP3蛋白的表达情况 | 第45-47页 |
·验证VBP2蛋白表达的条件 | 第47-49页 |
第四章 讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
研究生期间参与发表的论文 | 第59-60页 |