三因子无饲养层条件下小鼠诱导多潜能干细胞系的建立
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语的中英文对照 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-28页 |
| 第一章 诱导多能性干细胞(iPS细胞)研究进展 | 第14-28页 |
| 1. 体细胞重编程 | 第14-16页 |
| ·多能性干细胞 | 第14页 |
| ·体细胞重编程的研究 | 第14-16页 |
| 2. iPS细胞 | 第16-25页 |
| ·诱导生成iPS细胞的相关因子 | 第16-17页 |
| ·iPS细胞的研究历程 | 第17-19页 |
| ·iPS细胞的制备 | 第19-22页 |
| ·iPS细胞的应用价值 | 第22-25页 |
| 3. 饲养层 | 第25-28页 |
| ·饲养层的作用 | 第25-26页 |
| ·iPS细胞诱导过程中饲养层的不利影响 | 第26-28页 |
| 第二部分 实验研究 | 第28-60页 |
| 第二章 病毒包装生产及检测 | 第28-34页 |
| 1. 材料与仪器 | 第28-29页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·溶液试剂的配制 | 第29页 |
| 2. 实验方法 | 第29-31页 |
| ·质粒的转化 | 第29页 |
| ·质粒的快速鉴定 | 第29-30页 |
| ·质粒小量制备提取(试剂盒抽提法) | 第30页 |
| ·Plat-E细胞的培养 | 第30页 |
| ·病毒的包装生产 | 第30-31页 |
| ·病毒收集及检测 | 第31页 |
| 3. 实验结果 | 第31-34页 |
| ·病毒生产包装 | 第31-32页 |
| ·病毒原液的检测 | 第32-34页 |
| 第三章 iPS细胞的诱导 | 第34-44页 |
| 1. 材料与仪器 | 第34-35页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第34页 |
| ·主要实验仪器 | 第34页 |
| ·溶液试剂配制 | 第34-35页 |
| 2. 实验方法 | 第35-39页 |
| ·MEF细胞制备和培养 | 第35-37页 |
| ·饲养层制备 | 第37页 |
| ·小鼠ES细胞的培养 | 第37-38页 |
| ·病毒感染及细胞克隆的挑取 | 第38-39页 |
| ·iPS诱导效率的计算 | 第39页 |
| 3. 实验结果 | 第39-44页 |
| ·MEF细胞形态 | 第39-40页 |
| ·iPS细胞诱导过程中细胞形态的变化 | 第40-41页 |
| ·iPS细胞的诱导效率 | 第41-44页 |
| 第四章 iPS细胞的鉴定 | 第44-60页 |
| 1. 材料与仪器 | 第44-45页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第44页 |
| ·主要实验仪器 | 第44-45页 |
| ·溶液试剂的配制 | 第45页 |
| 2. 实验方法 | 第45-53页 |
| ·iPS细胞外观形态、生长状态的检测 | 第45页 |
| ·多能基因表达的检测 | 第45-49页 |
| ·ES细胞特异性分子标记检测 | 第49-51页 |
| ·畸胎瘤检测 | 第51-52页 |
| ·核型分析 | 第52-53页 |
| 3. 实验结果 | 第53-57页 |
| ·外观形态 | 第53页 |
| ·多能基因的表达 | 第53-54页 |
| ·ES细胞特异性分子标记检测 | 第54-56页 |
| ·畸胎瘤检测 | 第56-57页 |
| ·核型分析 | 第57-60页 |
| 讨论 | 第60-62页 |
| 全文结论 | 第62-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
