| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| ·人体天然免疫 | 第11-12页 |
| ·一型干扰索的调控通路 | 第12-14页 |
| ·c-di-GMP的相关研究 | 第14-17页 |
| ·STING蛋白的发现与研究概况 | 第17-19页 |
| ·STING接受c-di-gmp信号的发现 | 第19-20页 |
| ·课题研究内容,目的及意义 | 第20-23页 |
| 第二章 实验步骤 | 第23-39页 |
| ·菌株、载体和基因 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-26页 |
| ·基因克隆 | 第26-28页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第26-27页 |
| ·DNA片段双酶切 | 第27页 |
| ·重组质粒构建 | 第27页 |
| ·重组质粒转化表达菌株BL21 | 第27-28页 |
| ·菌落PCR和蛋白表达test筛选阳性克隆子 | 第28页 |
| ·蛋白质的提取与纯化 | 第28-37页 |
| ·蛋白质在IL大瓶中的诱导表达 | 第28-29页 |
| ·蛋白质的提取与纯化 | 第29-30页 |
| ·Se-MET蛋白质衍生物的制备 | 第30页 |
| ·晶体的普筛与优化 | 第30-32页 |
| ·衍射数据的收集与处理 | 第32-35页 |
| ·晶体结构的解析 | 第35-37页 |
| ·Quickchange定点突变 | 第37-39页 |
| 第三章 实验结果 | 第39-59页 |
| ·STING蛋白的序列分析 | 第39-41页 |
| ·STING蛋白不同片段的表达纯化检测 | 第41-42页 |
| ·人源和鼠源不同STING可溶性片段的高纯度纯化 | 第42-46页 |
| ·hSTING~(CTD)-His蛋白的纯化 | 第42-44页 |
| ·mSTING~(CTD)-His蛋白的纯化 | 第44-46页 |
| ·Apo-STING~(CTD)及硒代衍生物的晶体普筛 | 第46页 |
| ·Apo-hSTING~(CTD)的晶体优化 | 第46-55页 |
| ·Apo-hSTING~(CTD)在WizardⅢH5条件下的优化 | 第47-48页 |
| ·Apo-hSTING~(CTD)在WizardⅢF5条件下的优化 | 第48-50页 |
| ·hSTING~(CTD)的truncation蛋白的纯化和晶体的生长 | 第50-54页 |
| ·晶体的后处理过程 | 第54-55页 |
| ·Se-Met hSTING~(CTD)蛋白质衍生物的大量制备及晶体的生长 | 第55-57页 |
| ·hSTING~(CTD)与c-di-GMP复合物的晶体生长与优化 | 第57-59页 |
| 第四章 STING'td及其与c-di-GMP复合物晶体数据的处理 | 第59-61页 |
| ·数据处理与结构的解析 | 第59-61页 |
| 第五章 apo-hSTING~(CTD)的结构与功能研究 | 第61-73页 |
| ·apo-hSTING~(CTD)的蛋白质结构 | 第61-62页 |
| ·Apo-hSTING~(CTD)在溶液中以二聚体形式存在 | 第62-63页 |
| ·hSTING~(CTD)与c-di-GMP相互作用关键氨基酸的定点突变 | 第63-66页 |
| ·突变体蛋白的提收纯化 | 第66-69页 |
| ·等温滴定量热法(ITC)验证突变体与c-di-GMP的相互作用 | 第69-73页 |
| 第六章 总结讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 附件 | 第82页 |
