| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 文献综述 | 第12-21页 |
| 引言 | 第21-22页 |
| 主要技术路线 | 第22-23页 |
| 1 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·分子生物学试剂 | 第23页 |
| ·其他试剂及材料 | 第23-24页 |
| ·培养基的配置 | 第24页 |
| ·常用溶液配制 | 第24-26页 |
| ·玻璃器皿的准备 | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·禽致病性大肠杆菌强毒力岛 HPI 的敲除 | 第27-31页 |
| ·Red 同源重组中突变株引物的设计 | 第27页 |
| ·pKD3 质粒制备 | 第27页 |
| ·琼脂糖电泳与胶回收 | 第27-28页 |
| ·融合 PCR 产物的制备 | 第28页 |
| ·DpnⅠ酶的消化和 DNA 纯化回收 | 第28-29页 |
| ·质粒 pKD46 向大肠杆菌中的转化 | 第29-30页 |
| ·X0904EC02/ pKD46 电转化感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·同源重组片段的电转化 | 第30-31页 |
| ·突变菌株氯霉素抗性基因的消除 | 第31页 |
| ·HPI 的致病性研究 | 第31-35页 |
| ·LD50 的测定 | 第31-32页 |
| ·病理形态学观察 | 第32-34页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白电泳检测表达谱的变化 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-43页 |
| ·同源重组协助质粒 pKD46 的转化 | 第35页 |
| ·融合 PCR 产物的制备和纯化 | 第35-36页 |
| ·氯霉素抗性基因的消除 | 第36页 |
| ·测序结果 | 第36-37页 |
| ·APEC HPI 阳性株 LD50 的测定 | 第37-40页 |
| ·细菌培养与计数 | 第37-38页 |
| ·半数致死量(LD50 )计算 | 第38-40页 |
| ·人工攻毒 APEC 分离株雏鸡的病理形态学变化 | 第40-42页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白电泳检测 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-46页 |
| ·Red 同源重组基因敲除条件的优化 | 第43页 |
| ·测序比对结果 | 第43页 |
| ·毒力的测定（LD50） | 第43-44页 |
| ·H-E 切片染色镜检 | 第44-46页 |
| 4 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
| 附 作者在读期间发表的学术论文 | 第52页 |