| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 文献综述 | 第12-23页 |
| 1 启动子概述 | 第12页 |
| 2 植物启动子的研究进展 | 第12-20页 |
| ·高等植物启动子的结构 | 第13-14页 |
| ·转录起始位点 | 第13页 |
| ·TATA-box | 第13页 |
| ·一般上游启动子元件 | 第13-14页 |
| ·CAAT-box | 第13-14页 |
| ·GC-box | 第14页 |
| ·抑制子和增强子 | 第14页 |
| ·高等植物启动子的分类 | 第14-20页 |
| ·组成型启动子 | 第15-16页 |
| ·CaMV 35S启动子 | 第15页 |
| ·泛素Ubiquitin启动子 | 第15-16页 |
| ·NOS、OCS启动子 | 第16页 |
| ·组织或器官特异性启动子 | 第16-19页 |
| ·营养器官特异性启动子 | 第16-18页 |
| ·生殖器官特异性表达启动子 | 第18-19页 |
| ·诱导型启动子 | 第19-20页 |
| ·光诱导型启动子 | 第19页 |
| ·伤诱导型启动子 | 第19页 |
| ·植物激素诱导型启动子 | 第19-20页 |
| ·温度诱导型启动子 | 第20页 |
| 3 植物病毒启动子研究概况 | 第20-23页 |
| ·双生病毒启动子 | 第20-21页 |
| ·矮缩病毒启动子 | 第21-22页 |
| ·杆状DNA病毒属启动子 | 第22页 |
| ·蔷薇科植物病毒启动子 | 第22-23页 |
| 引言 | 第23-24页 |
| 材料与方法 | 第24-36页 |
| 1 供试材料 | 第24页 |
| ·病样来源 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌种和载体 | 第24页 |
| ·酶和化学试剂 | 第24页 |
| ·常用缓冲溶液和培养基 | 第24页 |
| ·抗生素 | 第24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-36页 |
| ·叶片总DNA的提取 | 第24-25页 |
| ·PCR技术 | 第25页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第25-27页 |
| ·PCR产物回收和纯化 | 第25-26页 |
| ·PCR产物的连接 | 第26页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·连接产物的转化 | 第27页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第27页 |
| ·质粒提取 | 第27页 |
| ·克隆基因的测序和分析 | 第27-28页 |
| ·SVBV启动子的克隆 | 第28页 |
| ·启动子的引物设计 | 第28页 |
| ·启动子的PCR扩增 | 第28页 |
| ·启动子的序列分析 | 第28页 |
| ·启动子序列相似性分析 | 第28页 |
| ·启动子的缺失构建 | 第28-29页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·植物表达载体的构建策略 | 第29-30页 |
| ·植物表达载体的构建过程 | 第30-31页 |
| ·电击转化农杆菌 | 第31-32页 |
| ·电击转化感受态细胞制备 | 第31页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第31-32页 |
| ·瞬间表达 | 第32页 |
| ·gus活性分析 | 第32-33页 |
| ·gus活性的组织化学分析 | 第32页 |
| ·蛋白活性的荧光光度测定 | 第32-33页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第33页 |
| ·gus荧光活性分析 | 第33页 |
| ·gfp绿色荧光检测 | 第33页 |
| ·转基因烟草的半定量RT-PCR检测 | 第33-35页 |
| ·叶片总RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第34页 |
| ·半定量RT-PCR反应 | 第34-35页 |
| ·转基因烟草植株的gus组织化学染色 | 第35页 |
| ·转基因烟草植株的gus荧光活性分析 | 第35-36页 |
| 结果与分析 | 第36-46页 |
| 1 SVBV启动子的克隆 | 第36-37页 |
| ·全长启动子的克隆 | 第36页 |
| ·核心区启动子的克隆 | 第36页 |
| ·缺失上游区启动子的克隆 | 第36-37页 |
| 2 植物表达载体的构建 | 第37-40页 |
| ·SVBV启动子驱动gus基因表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·SVBV启动子驱动gfp基因表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3 瞬间表达的组织化学检测 | 第40-41页 |
| ·瞬间表达中gus的组织化学染色 | 第40页 |
| ·瞬间表达中gfp活性的检测 | 第40-41页 |
| 4 瞬间表达中gus荧光活性分析 | 第41-42页 |
| 5 转基因烟草的gus组织化学染色 | 第42页 |
| 6 转基因烟草的gus荧光活性分析及半定量RT-PCR检测 | 第42-46页 |
| ·转基因烟草的gus荧光活性分析 | 第42-44页 |
| ·转基因烟草中gus的半定量PCR检测 | 第44-46页 |
| 讨论 | 第46-48页 |
| 1 瞬间表达中SVBV启动子的活性分析 | 第46页 |
| 2 转基因烟草的启动子活性分析 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录A：常用缓冲液及培养基配方法 | 第54-59页 |
| 附录B：常用的抗生素和激素及使用浓度 | 第59-60页 |
| 附录C：常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第60-62页 |
| 附录D：本文所用的重要缩写词及中文对照 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |