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马铃薯多酚类化合物对结肠癌和肝癌细胞增殖的影响及花色苷生物合成关键酶基因的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词表第13-14页
引言第14-16页
第一章 文献综述第16-48页
   ·植物多酚概述第16-26页
     ·植物多酚类化合物的分布第16-17页
     ·植物多酚类化合物的化学结构及分类第17-19页
     ·植物多酚类化合物的提取方法第19-21页
     ·植物多酚类化合物的测定方法第21-22页
     ·植物多酚类化合物的生理功能第22-24页
     ·植物多酚类化合物的应用现状第24-26页
   ·植物多酚的药理作用第26-34页
     ·抗氧化作用第26-30页
     ·预防心脑血管疾病作用第30-31页
     ·抗突变和抗肿瘤、防癌作用第31-32页
     ·抑菌消炎和抗病毒第32-33页
     ·调节机体免疫功能作用第33页
     ·抗辐射作用第33页
     ·其它药理作用第33-34页
   ·植物多酚在医药中的应用第34-36页
     ·天然抗氧化剂第34页
     ·治疗心脑血管病药物第34页
     ·解毒护肝药物第34-35页
     ·抑菌消炎、抗病毒药物第35页
     ·保健品类第35-36页
   ·植物花色苷基因工程研究进展第36-48页
     ·花色苷的生物合成第37-42页
     ·影响花色苷合成与积累的主要因素第42-44页
     ·花色苷基因工程改良的基本策略第44-45页
     ·植物基因工程改良的安全性第45-48页
第二章 马铃薯块茎中总酚的含量和抗氧化活性分析第48-58页
   ·材料与方法第48-52页
     ·植物材料第48-49页
     ·主要试剂和溶液的配制第49页
     ·马铃薯总酚的提取第49-50页
     ·DPPH法测定马铃薯提取物的抗氧化活性第50页
     ·Folin-Ciocalteu比色法测定马铃薯提取物的总酚含量第50-51页
     ·钼酸钠比色法测定马铃薯提取物的绿原酸含量第51页
     ·马铃薯提取物花色素含量的测定第51页
     ·统计分析第51-52页
   ·实验结果第52-55页
     ·标准曲线的绘制第52-53页
     ·不同品种马铃薯提取物的抗氧化活性及其成分测定分析第53-54页
     ·马铃薯提取物的抗氧化活性、总酚含量、绿原酸含量和花色素含量的相关性分析第54-55页
   ·讨论第55-58页
     ·马铃薯提取物的抗氧化活性和成分测定第55-56页
     ·马铃薯提取物抗氧化活性与总酚、绿原酸、花色素含量的相关性分析第56页
     ·马铃薯多酚类化合物不同提取方法的比较第56-58页
第三章 马铃薯多酚提取物对人体结肠癌和肝癌细胞增殖的影响第58-74页
   ·材料与方法第59-62页
     ·植物材料第59页
     ·主要仪器第59页
     ·主要试剂和溶液的配制第59-60页
     ·癌细胞培养第60页
     ·XTT比色法检测马铃薯多酚提取物和酚类标准物对癌细胞的毒性第60-61页
     ·统计分析第61-62页
   ·实验结果第62-71页
     ·癌细胞生长的形态学观察第62-63页
     ·马铃薯多酚提取物对癌细胞增殖的影响第63-67页
     ·马铃薯提取物抑制癌细胞增殖的半数效量与多酚含量和抗氧化活性的相关性分析第67-68页
     ·天然多酚类标准物对癌细胞增殖的影响第68-71页
   ·讨论第71-74页
     ·马铃薯多酚提取物对癌细胞增殖的影响第71-72页
     ·天然多酚类标准物对癌细胞增殖的影响第72-74页
第四章 马铃薯CHI基因的克隆与表达分析第74-86页
   ·材料与方法第74-78页
     ·植物材料第74-75页
     ·主要试剂和溶液的配制第75页
     ·总RNA的提取与cDNA第一链的合成第75页
     ·基因组DNA的提取第75-76页
     ·马铃薯野生种CHI cDNA和gDNA的扩增与组织表达分析第76-77页
     ·马铃薯野生种CHI基因的组织表达半定量RT-PCR分析第77页
     ·生物信息学分析第77-78页
   ·实验结果第78-83页
     ·CHI基因的克隆与序列分析第78-83页
     ·利用半定量RT-PCR方法分析CHI基因的组织表达特性第83页
   ·讨论第83-86页
     ·马铃薯CHI基因的克隆与生物信息学分析第83-84页
     ·马铃薯CHI基因的空间表达模式第84-86页
第五章 马铃薯栽培种中花色苷生物合成关键酶基因的结构和表达分析第86-94页
   ·材料与方法第86-88页
     ·植物材料第86页
     ·主要试剂和溶液的配制第86-87页
     ·总RNA的提取与cDNA第一链的合成第87页
     ·基因组DNA的提取第87页
     ·马铃薯栽培种花色苷合成关键酶基因gDNA全长的扩增第87-88页
     ·红色和白色马铃薯栽培种的花色苷合成关键酶基因的表达分析第88页
   ·分析结果第88-92页
     ·马铃薯栽培种花色苷合成关键酶基因的结构分析第88-91页
     ·白色和红色马铃薯品种中花色苷合成关键酶基因的表达差异分析第91-92页
   ·讨论第92-94页
     ·马铃薯栽培种花色苷合成关键酶基因的结构分析第92页
     ·马铃薯栽培种中花色苷合成关键酶基因的表达差异分析第92-94页
第六章 马铃薯3GT基因的遗传转化第94-102页
   ·实验材料第94-95页
     ·供试材料第94-95页
     ·菌株与质粒第95页
     ·主要培养基的配制第95页
   ·实验方法第95-97页
     ·pBin19/G-3GT的农杆菌转化第95-96页
     ·菌液制备第96页
     ·遗传转化第96页
     ·Kan选择压的筛选第96页
     ·再生植株的抗性筛选第96-97页
     ·转基因马铃薯的PCR检测第97页
   ·实验结果第97-99页
     ·农杆菌转化及质粒检测第97-98页
     ·Kan选择压的确定第98页
     ·转基因马铃薯植株再生第98-99页
     ·转基因植株的PCR检测第99页
   ·讨论第99-102页
全文结论第102-104页
本研究的创新点第104-106页
参考文献第106-124页
附录第124-130页
攻读博士学位期间发表的研究论文第130-132页
致谢第132页

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