| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1 苏云金杆菌的生物学特性 | 第12-13页 |
| 2 杀虫晶体蛋白(Insecticidal Crystal Proteins,ICPs)的研究 | 第13-14页 |
| ·cry基因的分类与鉴定 | 第13页 |
| ·ICPs类型与作用机制 | 第13-14页 |
| 3 营养期杀虫蛋白(Vegetative Insecticidal Proteins,VIPs) | 第14-24页 |
| ·营养期杀虫蛋白的分类 | 第14-17页 |
| ·Vip1A和Vip2A蛋白的研究 | 第17-18页 |
| ·Vip3A蛋白的生物学特性 | 第18-24页 |
| ·Vip3A基因的发现及其杀虫活性 | 第18-19页 |
| ·Vip3A基因的鉴定及其定位 | 第19-21页 |
| ·Vip3A蛋白的结构与功能 | 第21-22页 |
| ·Vip3A的作用机理 | 第22-24页 |
| 4 Vip3的应用前景 | 第24-26页 |
| ·vip3基因重组 | 第24-25页 |
| ·转vip3A基因植物 | 第25页 |
| ·新的杀虫活性物质的筛选 | 第25-26页 |
| ·构建融合蛋白 | 第26页 |
| ·vip3A基因重组微生物 | 第26页 |
| 5 本研究的立题目的与意义 | 第26-28页 |
| 第二章 苏云金杆菌的分离及vip3基因的鉴定 | 第28-40页 |
| 1 材料与方法 | 第28-35页 |
| ·材料与仪器 | 第28-30页 |
| ·土壤样品 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·仪器设备 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·土样采集方法 | 第30页 |
| ·醋酸钠-抗生素筛选法分离土壤中的Bt菌株 | 第30-31页 |
| ·光学显微镜观察伴孢晶体 | 第31页 |
| ·菌种的保存 | 第31页 |
| ·Bt质粒及染色体DNA提取 | 第31页 |
| ·Bt质粒DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·vip3A基因PCR-RFLP鉴定引物 | 第32-33页 |
| ·聚合酶链式反应/PCR | 第33页 |
| ·酶切分析 | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及DNA回收 | 第34页 |
| ·SDS-PAGE分析苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-38页 |
| ·菌株的分离 | 第35页 |
| ·伴孢晶体的形态观察与SDS-PAGE检测 | 第35-37页 |
| ·Bt菌株vip3基因的PGR-RFLP鉴定 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 ZG151-20菌株中vip3A基因的克隆及表达研究 | 第40-53页 |
| 1 材料和方法 | 第40-45页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·菌株和质粒 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·供试昆虫 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·仪器设备 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-45页 |
| ·生物与分子生物学操作 | 第41页 |
| ·ZG151-20菌中vip3A基因的部分片段克隆 | 第41-42页 |
| ·热击转化 | 第42页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第42页 |
| ·E.coli质粒DNA提取 | 第42-43页 |
| ·序列分析 | 第43页 |
| ·基因原核表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·Vip3Aa48蛋白的原核表达及SDS-PAGE检测 | 第44页 |
| ·原核表达蛋白的生物活性测定 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-51页 |
| ·Bt菌ZG151-20中vip3A基因片段的鉴定 | 第45页 |
| ·vip3Aa48基因的PCR扩增及序列分析 | 第45-49页 |
| ·重组质粒pET-Aa48蛋白的原核表达 | 第49-51页 |
| ·生物测定 | 第51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 发表的学术论文情况 | 第60页 |
