| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 猪流行性腹泻病毒(PEDV)基因组结构及其复制周期 | 第11-14页 |
| ·PEDV基因组结构 | 第12页 |
| ·PEDV蛋白功能 | 第12-14页 |
| ·PEDV复制周期 | 第14页 |
| 2 PEDV与细胞抗病毒天然免疫 | 第14-19页 |
| ·细胞抗病毒天然免疫及其信号通路调节 | 第15-17页 |
| ·PEDV与细胞抗病毒天然免疫 | 第17页 |
| ·PEDV PLP蛋白酶与宿主抗病毒天然免疫 | 第17-19页 |
| 3 展望 | 第19-21页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第21-31页 |
| 1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-31页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第31-53页 |
| 1 PEDv PLP表达载体及其蛋白酶催化活性位点突变体构建 | 第31-38页 |
| ·前言 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-38页 |
| ·PEDV PLP1和PLP2的表达载体构建 | 第31-36页 |
| ·PEDv PLP1和PLP2基因密码子优化 | 第31-34页 |
| ·pUC57-PEDV PLP1(N)和pUC57-PEDV PLP2(N)酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·pcDNA3.1-V5-PEDV PLP1(N)和PLP2(N)酶切鉴定 | 第35页 |
| ·PEDV PLP1(N))和PEDV PLP2(N)表达检测 | 第35-36页 |
| ·PEDV PLP2蛋白酶催化活性位点突变体构建 | 第36-38页 |
| ·PEDV PLP2蛋白酶催化活性位点突变体测序 | 第36-37页 |
| ·PEDV PLP2蛋白酶催化活性位点突变体表达检测 | 第37-38页 |
| 2 PEDV PLP的去泛素化酶(DUB)活性 | 第38-41页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·PEDV PLP细胞内DUB活性 | 第38-39页 |
| ·PEDV PLP2对不同连接形式泛素(Ub)的去泛素化活性 | 第39-40页 |
| ·PEDV感染细胞中的去泛素化活性 | 第40-41页 |
| 3 PEDV PLP对宿主干扰素抗病毒天然免疫的调节作用 | 第41-50页 |
| ·前言 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-50页 |
| ·PEDV负调节IFN-β表达信号通路 | 第42-43页 |
| ·PEDV不诱导IFN-β产生 | 第42页 |
| ·PEDV抑制dsRNA诱导的IFN-β产生 | 第42-43页 |
| ·PEDV抑制IRF3信号通路激活 | 第43页 |
| ·PEDV PLP2是PEDV编码的一种干扰素拮抗蛋白 | 第43-46页 |
| ·PEDV PLP2负调节仙台病毒(seV)激活的IFN-β表达通路 | 第43-44页 |
| ·PEDV PLP蛋白酶对IFN-β信号通路的抑制作用呈剂量效应关系 | 第44-46页 |
| ·PEDV PLP2抑制调节蛋白(RIG-I/STING)激活的IFN-β干扰素表达 | 第46-48页 |
| ·PEDV PLP2对IFN-β信号通路关键调节蛋白(RIG-I/STING)的去泛素化 | 第48-50页 |
| 4 结论与讨论 | 第50-53页 |
| ·PEDV PLP蛋白酶表达载体及其蛋白酶活性位点突变体构建 | 第50页 |
| ·PEDV对宿主细胞具有去泛素化作用,PLP2是PEDV编码的一种新型DUB | 第50-51页 |
| ·PEDV对IFN-β表达通路具有负调节作用,PLP2是PEDV编码的一种干扰素拮抗蛋白 | 第51页 |
| ·PEDV PLP2负调节宿主抗病毒天然免疫反应分子机制 | 第51-53页 |
| ·PLP2抑制调节蛋白(RIG-I/STING)激活的干扰素信号表达通路 | 第52页 |
| ·PLP2通过对RIG-I和STING的去泛素化负调节宿主抗病毒天然免疫反应 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-63页 |
| 附录 各类试剂的配制 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
