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表面展示外源蛋白的毕赤酵母细胞壁蛋白抽提及分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 绪论第13-29页
   ·酵母表面展示体系研究进展第13-22页
     ·酵母表面展示技术的背景知识第14-15页
     ·常见的酵母表面展示体系第15-18页
     ·酵母表面展示体系的应用第18-20页
     ·毕赤酵母表面展示体系介绍第20-22页
   ·酵母细胞壁蛋白的研究进展第22-27页
     ·酵母细胞壁蛋白及其抽提的研究与应用第22-24页
     ·酵母共价结合细胞壁蛋白的特征和功能第24-27页
   ·本课题的意义与内容第27-29页
第二章 重组毕赤酵母细胞壁蛋白的抽提和分析第29-49页
   ·引言第29-30页
   ·实验材料与设备第30-34页
     ·菌株第30页
     ·主要试剂第30-31页
     ·培养基与溶液第31-33页
     ·主要仪器和设备第33-34页
   ·实验方法第34-36页
     ·重组毕赤酵母的培养第34页
     ·脂肪酶酶活力分析第34页
     ·毕赤酵母表面展示脂肪酶的荧光分析第34-35页
     ·毕赤酵母融合壁蛋白的分离第35页
     ·毕赤酵母融合壁蛋白的抽提第35页
     ·毕赤酵母融合壁蛋白的去糖基化分析第35-36页
     ·融合壁蛋白 SDS-PAGE 和 Western Blot 分析第36页
     ·菌落计数法测定酵母破碎率第36页
   ·结果与讨论第36-47页
     ·融合壁蛋白在毕赤酵母细胞表面的展示第36-37页
     ·重组毕赤酵母生长与融合蛋白的表达第37-39页
     ·毕赤酵母细胞破碎条件优化第39-41页
     ·毕赤酵母融合壁蛋白的抽提第41-44页
     ·毕赤酵母细胞壁蛋白糖基化第44-47页
   ·本章小结第47-49页
第三章 毕赤酵母潜在 GPI 型壁蛋白的鉴定与分析第49-71页
   ·引言第49-50页
   ·实验材料与设备第50-52页
     ·菌株第50-51页
     ·主要试剂第51页
     ·培养基与溶液第51页
     ·主要仪器和设备第51-52页
   ·实验方法第52-54页
     ·重组毕赤酵母的培养第52页
     ·脂肪酶酶活力分析第52页
     ·毕赤酵母表面展示脂肪酶的流式细胞术分析第52-53页
     ·毕赤酵母融合壁蛋白的分离和抽提第53页
     ·融合壁蛋白 SDS-PAGE 和 Western Blot 分析第53-54页
   ·结果与讨论第54-69页
     ·潜在 GPI 结合型壁蛋白在毕赤酵母细胞表面的展示第54-60页
     ·毕赤酵母潜在 GPI 结合型壁蛋白的抽提第60-67页
     ·毕赤酵母潜在 GPI 结合型壁蛋白展示效率第67-68页
     ·毕赤酵母潜在 GPI 结合型壁蛋白的分析第68-69页
   ·本章小结第69-71页
总结与展望第71-73页
参考文献第73-80页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第80-82页
致谢第82-83页
附件第83页

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