| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-33页 |
| ·离子通道概述 | 第12-13页 |
| ·离子通道的分类 | 第13-14页 |
| ·非门控型离子通道 | 第13页 |
| ·电压门控型离子通道(voltage-gated ion channels) | 第13-14页 |
| ·化学门控型离子通道(chemically-gated ion channels) | 第14页 |
| ·机械门控型离子通道(mechanically-gated ion channels) | 第14页 |
| ·钾离子通道简介 | 第14-23页 |
| ·钾离子通道的结构特点 | 第15-19页 |
| ·淋巴细胞中的钾离子通道 | 第19-22页 |
| ·鱼类中钾离子通道的研究进展 | 第22-23页 |
| ·膜片钳技术(patch clamp technique)与离子通道的研究 | 第23-26页 |
| ·膜片钳技术及其工作原理 | 第23-24页 |
| ·膜片钳技术的常用记录模式 | 第24-25页 |
| ·膜片钳技术在生物学上的应用 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-33页 |
| 第二章 鲈鱼 spKv1.3 基因的克隆及序列分析 | 第33-53页 |
| ·材料与方法 | 第33-41页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第33-34页 |
| ·spKv1.3 基因 PCR 引物的设计 | 第34页 |
| ·提取鲈鱼血液总 RNA | 第34-35页 |
| ·逆转录合成第一条 cDNA 链 | 第35页 |
| ·PCR 扩增鲈鱼 spKv1.3 基因的 cDNA 核心序列 | 第35页 |
| ·回收 PCR 扩增片段 | 第35页 |
| ·回收片段与载体连接并转化感受态细胞 | 第35-36页 |
| ·重组子的鉴定 | 第36页 |
| ·测序结果验证 | 第36页 |
| ·鲈鱼 spKv1.3 基因的 5’RACE | 第36-37页 |
| ·鲈鱼 spKv1.3 基因的 3’RACE | 第37-38页 |
| ·鲈鱼 spKv1.3 基因的测序结果拼接 | 第38-39页 |
| ·鲈鱼 spKv1.3 基因序列的生物信息学分析 | 第39页 |
| ·鲈鱼 spKv1.3 基因在基因组中的组成分析 | 第39-41页 |
| ·实验结果 | 第41-48页 |
| ·设计特异性 PCR 引物 | 第41页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第41页 |
| ·扩增获取鲈鱼 spKv1.3 基因的核心序列 | 第41页 |
| ·5’RACE 扩增鲈鱼 spKv1.3 基因的 5’端 | 第41页 |
| ·3’RACE 扩增鲈鱼 spKv1.3 基因的 3’端 | 第41-42页 |
| ·拼接获取鲈鱼 spKv1.3 基因的全长序列 | 第42-43页 |
| ·鲈鱼 spKv1.3 基因序列的生物信息学分析 | 第43-47页 |
| ·鲈鱼 spKv1.3 基因在基因组中的组成分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 第三章 spKv1.3 基因及免疫细胞因子的表达调控分析 | 第53-70页 |
| ·材料与方法 | 第53-56页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第53-54页 |
| ·Real-Time PCR 引物的设计 | 第54页 |
| ·鲈鱼样本的处理及总 RNA 的提取 | 第54-55页 |
| ·PCR 反应预实验 | 第55页 |
| ·Real-time PCR 反应条件及反应体系的优化 | 第55页 |
| ·重复性和特异性实验 | 第55-56页 |
| ·扩增效率比对实验 | 第56页 |
| ·实验数据的输出与分析 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-63页 |
| ·Real-time PCR 引物设计结果 | 第56页 |
| ·PCR 反应预实验结果 | 第56页 |
| ·重复性和特异性实验 | 第56-58页 |
| ·扩增效率比对 | 第58-59页 |
| ·Real-time PCR 结果处理 | 第59-63页 |
| ·讨论 | 第63-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 第四章 spKv1.3 的电生理学特性 | 第70-88页 |
| ·材料与方法 | 第70-76页 |
| ·实验材料 | 第70页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第70-72页 |
| ·spKv1.3 全长的引物的设计 | 第72页 |
| ·提取鲈鱼血液总 RNA | 第72页 |
| ·逆转录合成第一条 cDNA 链 | 第72-73页 |
| ·PCR 扩增鲈鱼 spKv1.3 基因的全长序列 | 第73页 |
| ·回收 PCR 扩增片段 | 第73页 |
| ·回收的 PCR 片段进行加 A 反应 | 第73页 |
| ·回收片段与载体连接并转化感受态细胞 | 第73-74页 |
| ·重组子的鉴定 | 第74页 |
| ·构建重组表达载体 pcDNA3.1-spKv1.3 | 第74-75页 |
| ·重组表达载体 pcDNA3.1-spKv1.3 转染 CHO 细胞 | 第75页 |
| ·膜片钳实验 | 第75-76页 |
| ·数据采集和处理 | 第76页 |
| ·统计学分析 | 第76页 |
| ·实验结果 | 第76-81页 |
| ·spKv1.3 全长引物的设计结果 | 第76-77页 |
| ·spKv1.3 全长的获取结果 | 第77页 |
| ·spKv1.3 与 T-载体连接结果 | 第77-78页 |
| ·spKv1.3 与 pcDNA3.1 连接结果 | 第78页 |
| ·pcDNA3.1-spKv1.3 与 pEGFP-N2 共转染 CHO 结果 | 第78页 |
| ·膜片钳实验结果 | 第78-81页 |
| ·讨论 | 第81-85页 |
| 参考文献 | 第85-88页 |
| 第五章 实验总结与展望 | 第88-92页 |
| ·实验总结 | 第88-90页 |
| ·展望 | 第90-92页 |
| 硕士期间发表论文 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
