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呼吸道合胞病毒G蛋白亚单位粘膜疫苗的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 呼吸道合胞病毒研究进展第8-17页
   ·呼吸道合胞病毒简介第8页
   ·RSV的病毒学特性第8页
   ·G蛋白第8-10页
     ·G蛋白的结构第8-9页
     ·G蛋白上的表位第9-10页
     ·CX3C模序第10页
   ·呼吸道合胞病毒的流行病学第10-11页
   ·呼吸道合胞病毒的相关疾病第11-12页
   ·呼吸道合胞病毒疫苗的研究进展第12-17页
     ·福尔马林减毒RSV疫苗第12-13页
     ·减毒活疫苗第13-15页
     ·DNA疫苗第15-16页
     ·载体递药系统第16页
     ·结束语第16-17页
第二章 研究的目的及意义第17-19页
第三章 表达载体G/pET22b和G(CTL)/pET22b的构建第19-39页
   ·材料和方法第19-29页
     ·材料第19-22页
     ·方法第22-29页
   ·结果第29-35页
     ·G/pET22b和G(CTL)/pET22b表达载体构建路线第29-30页
     ·PCR扩增G蛋白基因片段第30页
     ·利用PCR技术对G蛋白进行改造第30页
     ·菌落PCR鉴定第30-31页
     ·重组质粒的酶切鉴定第31-32页
     ·G蛋白基因序列的测序确认第32-33页
     ·菌落PCR鉴定G/pET22b/DH5α和G(CTL)/pET22b/DH5α第33页
     ·重组质粒G/pET22b和G(CTL)/pET22b的酶切鉴定第33-35页
   ·讨论第35-38页
     ·RSV G蛋白第35页
     ·CTL表位的设计第35-36页
     ·通过重组PCR定点突变法对G蛋白基因进行改造第36页
     ·Th1和Th2型反应与RSV的病理学机制第36-38页
   ·小结第38-39页
第四章 目的蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化第39-51页
   ·材料和方法第39-45页
     ·材料第39-42页
     ·方法第42-45页
   ·结果第45-48页
     ·重组G蛋白和G(CTL)的表达第45-46页
     ·G蛋白的免疫学活性检测第46页
     ·金属离子对His-tag标签蛋白亲和纯化效果的比较及目的蛋白纯化第46-48页
   ·讨论第48-50页
     ·表达载体的选取第48页
     ·重组质粒G/pET22b和G(CTL)/pET22b的构建第48页
     ·重组融合蛋白G在大肠杆菌中的高效表达第48页
     ·Western blotting检测结果第48-49页
     ·纯化标签的使用第49页
     ·金属离子的选取第49-50页
   ·小结第50-51页
第五章 疫苗样品免疫原性的测定第51-64页
   ·材料和方法第51-56页
     ·材料第51-52页
     ·方法第52-56页
   ·结果第56-60页
     ·考马斯亮蓝标准曲线及抗原定量第56页
     ·小鼠免疫及免疫后小鼠的行为观察第56页
     ·免疫后不同时间的小鼠血清中G蛋白特异性IgG的含量第56-57页
     ·免疫后不同时间的小鼠血清中的G蛋白特异性IgA水平第57-58页
     ·免疫后不同时间的小鼠呼吸道中G蛋白特异性IgA的含量第58-59页
     ·小鼠血液中和呼吸道灌洗液中嗜酸性粒细胞的数量第59-60页
   ·讨论第60-63页
     ·佐剂的选取第60页
     ·趋化因子CX3C对嗜酸性粒细胞的影响第60-61页
     ·几何平均滴度第61-62页
     ·疫苗的免疫原性第62-63页
   ·小结第63-64页
第六章 全文总结第64-65页
第七章 展望第65-66页
致谢第66-67页
参考文献第67-77页
作者简介第77页

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