摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 呼吸道合胞病毒研究进展 | 第8-17页 |
·呼吸道合胞病毒简介 | 第8页 |
·RSV的病毒学特性 | 第8页 |
·G蛋白 | 第8-10页 |
·G蛋白的结构 | 第8-9页 |
·G蛋白上的表位 | 第9-10页 |
·CX3C模序 | 第10页 |
·呼吸道合胞病毒的流行病学 | 第10-11页 |
·呼吸道合胞病毒的相关疾病 | 第11-12页 |
·呼吸道合胞病毒疫苗的研究进展 | 第12-17页 |
·福尔马林减毒RSV疫苗 | 第12-13页 |
·减毒活疫苗 | 第13-15页 |
·DNA疫苗 | 第15-16页 |
·载体递药系统 | 第16页 |
·结束语 | 第16-17页 |
第二章 研究的目的及意义 | 第17-19页 |
第三章 表达载体G/pET22b和G(CTL)/pET22b的构建 | 第19-39页 |
·材料和方法 | 第19-29页 |
·材料 | 第19-22页 |
·方法 | 第22-29页 |
·结果 | 第29-35页 |
·G/pET22b和G(CTL)/pET22b表达载体构建路线 | 第29-30页 |
·PCR扩增G蛋白基因片段 | 第30页 |
·利用PCR技术对G蛋白进行改造 | 第30页 |
·菌落PCR鉴定 | 第30-31页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第31-32页 |
·G蛋白基因序列的测序确认 | 第32-33页 |
·菌落PCR鉴定G/pET22b/DH5α和G(CTL)/pET22b/DH5α | 第33页 |
·重组质粒G/pET22b和G(CTL)/pET22b的酶切鉴定 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-38页 |
·RSV G蛋白 | 第35页 |
·CTL表位的设计 | 第35-36页 |
·通过重组PCR定点突变法对G蛋白基因进行改造 | 第36页 |
·Th1和Th2型反应与RSV的病理学机制 | 第36-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第四章 目的蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第39-51页 |
·材料和方法 | 第39-45页 |
·材料 | 第39-42页 |
·方法 | 第42-45页 |
·结果 | 第45-48页 |
·重组G蛋白和G(CTL)的表达 | 第45-46页 |
·G蛋白的免疫学活性检测 | 第46页 |
·金属离子对His-tag标签蛋白亲和纯化效果的比较及目的蛋白纯化 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
·表达载体的选取 | 第48页 |
·重组质粒G/pET22b和G(CTL)/pET22b的构建 | 第48页 |
·重组融合蛋白G在大肠杆菌中的高效表达 | 第48页 |
·Western blotting检测结果 | 第48-49页 |
·纯化标签的使用 | 第49页 |
·金属离子的选取 | 第49-50页 |
·小结 | 第50-51页 |
第五章 疫苗样品免疫原性的测定 | 第51-64页 |
·材料和方法 | 第51-56页 |
·材料 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-56页 |
·结果 | 第56-60页 |
·考马斯亮蓝标准曲线及抗原定量 | 第56页 |
·小鼠免疫及免疫后小鼠的行为观察 | 第56页 |
·免疫后不同时间的小鼠血清中G蛋白特异性IgG的含量 | 第56-57页 |
·免疫后不同时间的小鼠血清中的G蛋白特异性IgA水平 | 第57-58页 |
·免疫后不同时间的小鼠呼吸道中G蛋白特异性IgA的含量 | 第58-59页 |
·小鼠血液中和呼吸道灌洗液中嗜酸性粒细胞的数量 | 第59-60页 |
·讨论 | 第60-63页 |
·佐剂的选取 | 第60页 |
·趋化因子CX3C对嗜酸性粒细胞的影响 | 第60-61页 |
·几何平均滴度 | 第61-62页 |
·疫苗的免疫原性 | 第62-63页 |
·小结 | 第63-64页 |
第六章 全文总结 | 第64-65页 |
第七章 展望 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
作者简介 | 第77页 |