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莳萝子挥发油抗真菌活性及其作用机制研究

中文摘要第1-14页
Abstract第14-19页
1. 前言第19-44页
   ·临床真菌感染流行病学第19-24页
     ·念珠菌病第19-21页
     ·皮肤癣菌病第21-24页
   ·抗真菌药物及其作用机制第24-27页
     ·抗真菌药物第24-26页
     ·抗真菌药物的作用机制第26-27页
   ·真菌耐药机制及其克服耐药的策略第27-31页
     ·真菌耐药机制第27-30页
     ·克服真菌耐药的策略第30-31页
   ·挥发油抗菌活性第31-35页
     ·抗菌植物挥发油第31-32页
     ·植物挥发油的化学成分第32页
     ·挥发油抗菌成分研究第32-35页
   ·莳萝及莳萝子研究概况第35-42页
     ·植物形态第35页
     ·本草考证及其功效第35-36页
     ·化学成分研究第36-37页
     ·营养成分研究第37-38页
     ·降血脂活性研究第38-39页
     ·抗氧化活性研究第39页
     ·抗菌活性研究第39-42页
     ·其他生物活性第42页
   ·本文研究目的意义第42-43页
   ·本文主要研究内容第43-44页
2 莳萝子存储时间对挥发油得率和抗菌活性的影响第44-57页
   ·实验材料第44-45页
     ·供试材料第44页
     ·供试菌种第44-45页
     ·主要设备和仪器第45页
   ·实验方法第45-48页
     ·莳萝子挥发油的提取第45页
     ·莳萝子挥发油密度的测定第45-46页
     ·莳萝子挥发油的化学成分第46页
     ·莳萝子存储时间对挥发油得率的影响第46页
     ·香芹酮标准曲线的制备第46-47页
     ·柠檬烯标准曲线的制备第47页
     ·莳萝子存储时间对香芹酮和柠檬烯含量的影响第47页
     ·莳萝子存储时间对挥发油抗菌活性的影响第47-48页
     ·莳萝子挥发油、香芹酮和柠檬烯的抗真菌活性研究第48页
     ·统计学分析第48页
   ·实验结果第48-55页
     ·莳萝子挥发油化学成分测定结果第48-49页
     ·莳萝子存储时间对挥发油得率影响的试验结果第49-50页
     ·香芹酮标准曲线的试验结果第50-51页
     ·柠檬烯标准曲线的试验结果第51页
     ·莳萝子存储时间对挥发油中香芹酮含量影响的试验结果第51-52页
     ·莳萝子存储时间对挥发油主要成分柠檬烯含量影响的试验结果第52-53页
     ·莳萝子存储时间对挥发油抗菌活性影响的试验结果第53-55页
     ·莳萝子挥发油、香芹酮和柠檬烯抗菌活性的试验结果第55页
   ·讨论第55-57页
3 莳萝子挥发油体外抗皮肤癣菌(DERMATOPHYTES)活性及其机制的研究第57-80页
   ·实验材料第57-59页
     ·供试材料第57页
     ·供试菌种第57-58页
     ·主要设备第58页
     ·主要试剂第58-59页
   ·实验方法第59-67页
     ·试剂和培养基配制第59-60页
     ·Dermatophytes菌种的活化第60页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes MIC和MFC的测定第60页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes菌丝的抑制作用第60-61页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes孢子萌发的影响第61页
     ·莳萝子挥发油对T.rubrum ATCC40051孢子萌发动力学的影响第61-62页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes生物量的影响第62页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes细胞膜中甾醇含量的影响第62-63页
     ·T.rubrum ATCC40051线粒体的提取第63页
     ·考马斯亮兰标准曲线制备及蛋白质含量的测定第63-64页
     ·莳萝子挥发油对T.rubrum ATCC40051线粒体中琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶活性的影响第64-66页
     ·莳萝子挥发油对T.rubrum ATCC40051线粒体中ATPase活性的影响第66-67页
     ·统计学分析第67页
   ·实验结果第67-77页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes的MIC和MFC值第67-68页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes菌丝抑制作用的试验结果第68-69页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes孢子萌发影响的试验结果第69-70页
     ·莳萝子挥发油对T.rubrum ATCC40051孢子萌发动力学影响的试验结果第70-71页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes生物量影响的试验结果第71-72页
     ·莳萝子挥发油对Dermatophytes细胞膜中甾醇含量影响的试验结果第72-75页
     ·莳萝子挥发油对T.rubrum ATCC40051线粒体中苹果酸脱氢酶活性影响的试验结果第75页
     ·莳萝子挥发油对T.rubrum ATCC40051线粒体中琥珀酸脱氢酶活性影响的试验结果第75-76页
     ·商萝子挥发油对r. rubrum ATCC40051线粒体中T-ATPase活性影响的试验结果第76-77页
   ·讨论第77-80页
4 莳萝子挥发油体外抗念珠菌(CANDIDA SPP.)活性的研究第80-95页
   ·实验材料第80-82页
     ·供试材料第80页
       ·供试菌种第80-81页
     ·主要设备第81-82页
     ·主要试剂第82页
   ·实验方法第82-86页
     ·主要试剂和培养基配制第82-83页
     ·Candida spp.菌悬液的制备第83页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.MIC和MFC的测定第83-84页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.生长曲线影响的试验第84页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.芽管萌发影响的试验第84页
     ·莳萝子挥发油抑制Candida spp.生物膜形成的试验第84-85页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.成熟生物膜影响的试验第85页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.悬浮细胞和成熟生物膜抑制作用的测试第85-86页
     ·统计学分析第86页
   ·实验结果第86-92页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.的MIC和MFC值第86-87页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.生长曲线影响的试验结果第87-88页
     ·莳萝子挥发油影响Candida spp.芽管萌发的试验结果第88-89页
     ·莳萝子挥发油抑制Candida spp.生物膜形成的试验结果第89-90页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.成熟生物膜抑制作用的试验结果第90-91页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.悬浮细胞和成熟生物膜抑制作用的试验结果第91-92页
   ·讨论第92-95页
5 莳萝子挥发油对阴道念珠菌病防治作用第95-107页
   ·实验材料第95-96页
     ·供试材料第95页
     ·供试菌种第95-96页
     ·供试动物第96页
     ·主要试剂和设备第96页
     ·实验方法第96-99页
     ·主要试剂和培养基配制第96-97页
     ·C. albicans 09-1555菌悬液的制备第97页
     ·C. albicans 09-1555阴道炎动物模型的构建第97页
     ·C. albicans 09-1555阴道炎小鼠模型的鉴定第97页
     ·莳萝子挥发油对阴道念珠菌病的预防作用第97-98页
     ·莳萝子挥发油对阴道念珠菌病的治疗作用第98-99页
     ·统计学分析第99页
     ·实验结果第99-106页
     ·莳萝子挥发油对阴道念珠菌病预防作用的试验结果第99-103页
     ·莳萝子挥发油对阴道念珠菌病治疗作用的试验结果第103-106页
     ·讨论第106-107页
6 莳萝子挥发油对念珠菌(CANDIDA SPP.)抗菌机制的研究第107-133页
   ·实验材料第108-109页
     ·供试材料第108页
     ·供试菌种第108页
     ·主要设备第108页
     ·主要试剂第108-109页
     ·实验方法第109-116页
     ·主要试剂和培养基配制第109-111页
     ·Candida spp.菌种的活化第111页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.细胞膜麦角固醇合成的影响第111页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550细胞膜渗透性的影响第111-112页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550细胞通透性的影响第112页
     ·Calbicans ATCC64550线粒体的提取第112-113页
     ·考马斯亮蓝标准曲线的制备及蛋白质含量的测定第113页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550线粒体中脱氢酶活性的影响第113-114页
     ·莳萝子挥发油对C. albicans ATCC64550线粒体中T-ATPase活性的影响第114页
     ·葡萄糖诱导的细胞外液酸化实验第114页
     ·莳萝子挥发油对C. albicans ATCC64550线粒体膜电位的影响第114-115页
     ·莳萝子挥发油对C. albicans ATCC64550线粒体中ROS累积的影响第115页
     ·在抗氧化剂半胱氨酸存在条件下,莳萝子挥发油对C. albicansATCC64550体内ROS累积的影响第115-116页
     ·在抗氧化剂半胱氨酸存在条件下,莳萝子挥发油对C. albicansATCC64550的抑制作用第116页
     ·统计学分析第116页
     ·实验结果第116-130页
     ·莳萝子挥发油对Candida spp.细胞膜麦角固醇合成影响的试验结果第116-117页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550细胞膜渗透性影响的试验结果第117-118页
     ·莳萝子挥发油对C. albicans ATCC64550细胞通透性影响的试验结果第118-119页
     ·葡萄糖诱导的细胞外液酸化的试验结果第119-120页
     ·莳萝子挥发油对C. albicans ATCC64550线粒体中脱氢酶活性影响的试验结果第120-123页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550线粒体中T-ATPase活性影响的试验结果第123-124页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550线粒体膜电位影响的试验结果第124-127页
     ·莳萝子挥发油对C. albicans ATCC64550线粒体中ROS累积影响的试验结果第127-128页
     ·在抗氧化剂半胱氨酸存在条件下,莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550体内ROS累积影响的试验结果第128-129页
     ·在抗氧化剂半胱氨酸存在条件下,莳萝子挥发油对Calbicans ATCC64550抑制作用的试验结果第129-130页
   ·讨论第130-133页
7 莳萝子挥发油通过METACASPASE诱导真菌凋亡第133-148页
   ·实验材料第134-135页
     ·供试材料第134页
     ·供试菌种第134页
     ·主要仪器设备和试剂第134-135页
   ·实验方法第135-138页
     ·C. albicans ATCC64550电镜样品的制备第135页
     ·DAPI染色第135-136页
     ·Annexin V染色第136页
     ·Caspase活性的检测第136-137页
     ·Cyt C的释放第137页
     ·统计学分析第137-138页
   ·实验结果第138-145页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550超微结构影响的试验结果第138-139页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550细胞核形态影响的试验结果第139-141页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻影响的试验结果第141-143页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550细胞Metacaspase酶活性影响的试验结果第143-145页
     ·莳萝子挥发油对C.albicans ATCC64550菌细胞色素C释放影响的试验结果第145页
   ·讨论第145-148页
8 总结与展望第148-150页
   ·本论文主要研究结果第148-149页
   ·本论文创新点第149页
   ·展望第149-150页
参考文献第150-162页
攻读博士学位期间发表的论文和申报的专利第162-164页
致谢第164页

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