摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
·植物芪合成酶基因简介 | 第13-14页 |
·植物抗病相关基因 | 第13页 |
·植物芪合成酶 | 第13-14页 |
·植物芪类化合物 | 第14-18页 |
·天然芪类化合物 | 第14-15页 |
·白黎芦醇的理化性质 | 第15页 |
·白黎芦醇的生物活性 | 第15页 |
·白黎芦醇体外生物合成的研究进展 | 第15-18页 |
·白黎芦醇的检测技术 | 第18页 |
·植物功能基因的体外表达 | 第18-23页 |
·植物功能基因在酵母中的表达 | 第18-20页 |
·大肠杆菌表达系统 | 第20-23页 |
·重组菌生长繁殖的影响因素 | 第23页 |
·重组菌质粒稳定性问题 | 第23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-36页 |
·材料 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第25页 |
·实验中用到的引物及序列 | 第25-26页 |
·载体质粒和菌株 | 第26页 |
·酶及生化试剂 | 第26页 |
·方法 | 第26-36页 |
·目的基因的克隆 | 第26-28页 |
·目的基因表达载体的构建 | 第28-30页 |
·目的基因的诱导表达及其表达分析 | 第30-33页 |
·白藜芦醇的体外生物合成体系的优化 | 第33-35页 |
·复合生物合成体系重组质粒稳定性检测 | 第35-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-66页 |
·中国野生华东葡萄白河-35-1 抗白粉病芪合成酶基因的克隆 | 第36-42页 |
·葡萄芪合成酶基因的克隆 | 第36-40页 |
·酵母分泌序列 DNA 片段的克隆 | 第40-41页 |
·反-香豆酸-CoA 连接酶基因的克隆 | 第41-42页 |
·目的基因酵母表达载体的构建 | 第42-46页 |
·酿酒酵母菌生长曲线的绘制 | 第42页 |
·酵母表达菌 pYES6/CT-VpSTS 的构建 | 第42-43页 |
·葡萄芪合成酶基因酵母 pYES2-STS 表达菌的构建 | 第43-46页 |
·葡萄芪合成酶基因原核表达载体 pET32a 的构建 | 第46-48页 |
·葡萄 STS 基因的体外诱导表达及其表达分析 | 第48-62页 |
·pYES6/CT-VpSTS 酵母表达菌的诱导处理及其表达分析 | 第48-55页 |
·pYES2-STS 重组酵母的诱导处理及其表达分析 | 第55-59页 |
·葡萄芪合成酶基因和植物香豆酸-CoA 连接酶基因在大肠杆菌中的诱导表 达及其检测 | 第59-62页 |
·白藜芦醇的体外生物合成及其 HPLC 检测 | 第62-66页 |
·大肠杆菌中白藜芦醇的复合生物合成及 HPLC 检测 | 第62-63页 |
·酵母 Res 的体外生物合成及其 HPLC 检测 | 第63-64页 |
·体外复合酶促合成的 Res 合成及其 HPLC 检测 | 第64-66页 |
第四章 讨论 | 第66-69页 |
·芪合成酶基因及其体外表达分析 | 第66页 |
·不同葡萄品种芪合成酶基因的体外功能分析 | 第66-67页 |
·葡萄芪合成酶基因体外表达活性的验证体系 | 第67-69页 |
第五章 结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-75页 |
附录 | 第75-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
作者简介 | 第78页 |