| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 研究综述 | 第10-22页 |
| ·微生物分子生态学技术 | 第10-15页 |
| ·土壤微生物基因组DNA提取方法 | 第10-13页 |
| ·概述 | 第10页 |
| ·土壤DNA提取方法的比较 | 第10-11页 |
| ·UltraClean Soil DNA kit | 第11-12页 |
| ·Fast DNA spin sample kit | 第12-13页 |
| ·土壤微生物基因组DNA纯化方法 | 第13-15页 |
| ·概述 | 第13页 |
| ·氯化铯密度梯度超速离心 | 第13页 |
| ·凝胶色谱 | 第13-14页 |
| ·离子交换色谱 | 第14页 |
| ·羟磷灰石色谱 | 第14页 |
| ·电洗脱 | 第14-15页 |
| ·试剂盒 | 第15页 |
| ·氨氧化微生物研究现状 | 第15-17页 |
| ·氮循环基本过程 | 第15-16页 |
| ·氨氧化细菌和氨氧化古菌研究现状 | 第16-17页 |
| ·研究意义和目的 | 第17-19页 |
| ·建立适合于湿地土壤DNA高效提取新方法 | 第18页 |
| ·新方法在高原天然湿地土壤氨氧化微生物研究中的应用 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-30页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·试剂与仪器 | 第22-23页 |
| ·研究方法 | 第23-29页 |
| ·湿地土壤DNA提取方法建立 | 第23-26页 |
| ·腐殖酸去除试验 | 第23页 |
| ·氯化钙-SDS-酶法 | 第23-25页 |
| ·玻璃珠-氯化钙-SDS法 | 第25页 |
| ·16S rDNA PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·紫外线光谱法测定DNA产量和纯度 | 第26页 |
| ·基因组DNA和16S rDNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| ·新方法在氨氧化微生物研究中的应用 | 第26-29页 |
| ·土样采集与保藏 | 第26页 |
| ·土壤DNA提取 | 第26页 |
| ·氨氧化细菌amoA基因片段巢式PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·氨氧化古菌amoA基因片段PCR扩增 | 第27页 |
| ·PCR产物纯化 | 第27-28页 |
| ·PCR产物与pMD-19T载体连接 | 第28页 |
| ·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·转化子DNA提取 | 第28-29页 |
| ·重组克隆双酶切鉴定 | 第29页 |
| ·测序 | 第29页 |
| ·数据处理 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与分析 | 第30-45页 |
| ·湿地土壤DNA提取新方法 | 第30-38页 |
| ·氯化钙-SDS-酶法 | 第30-34页 |
| ·氯化钙-SDS-酶法建立依据 | 第30-31页 |
| ·DNA纯度测定 | 第31页 |
| ·PCR扩增评价 | 第31-34页 |
| ·玻璃珠-氯化钙-SDS法 | 第34-38页 |
| ·玻璃珠-氯化钙-SDS法建立依据 | 第34-35页 |
| ·PCR扩增评价 | 第35-38页 |
| ·湿地土壤氨氧化微生物系统发育树构建 | 第38-45页 |
| ·氨氧化细菌系统发育树构建 | 第38-40页 |
| ·氨氧化古菌系统发育树构建 | 第40-45页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第45-51页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·湿地土壤DNA提取新方法 | 第45-46页 |
| ·氨氧化微生物系统发育分析 | 第46-47页 |
| ·结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |