中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
1 文献综述 | 第9-22页 |
1.1 转基因作物发展概况 | 第9-13页 |
1.1.1 转基因作物研究现状 | 第9页 |
1.1.2 转基因作物效益 | 第9-10页 |
1.1.3 转基因作物安全性问题 | 第10-12页 |
1.1.3.1 转基因作物环境安全性问题 | 第10-11页 |
1.1.3.2 转基因作物食品安全性问题 | 第11-12页 |
1.1.4 国内外对转基因作物所持态度 | 第12-13页 |
1.2 抗草甘膦转基因作物研究 | 第13-17页 |
1.2.1 草甘膦作用机理 | 第14页 |
1.2.2 获得抗草甘膦作物的途径 | 第14-17页 |
1.2.2.1 草甘膦对EPSPS的变异酶不敏感 | 第14-15页 |
1.2.2.2 作物产生过量EPSPS合酶,以抵消草甘膦的作用 | 第15-16页 |
1.2.2.3 草甘膦被微生物快速代谢为对作物无毒产物 | 第16页 |
1.2.2.4 CP4—EPSPS的催化活性不受草甘膦影响 | 第16-17页 |
1.3 转基因作物检测研究 | 第17-20页 |
1.3.1 酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测 | 第17-18页 |
1.3.2 基因芯片(DNA chip)检测 | 第18页 |
1.3.3 聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)检测 | 第18-20页 |
1.3.3.1 定性PCR检测 | 第18-19页 |
1.3.3.2 定量PCR检测 | 第19-20页 |
1.3.4 各种检测方法的比较 | 第20页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-28页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-28页 |
2.2.1 引物的设计与合成 | 第22页 |
2.2.2 总DNA提取 | 第22-25页 |
2.2.2.1 大豆种子、豆粕DNA提取 | 第22-24页 |
2.2.2.2 大豆叶片DNA提取 | 第24-25页 |
2.2.3 PCR扩增 | 第25页 |
2.2.4 Southern杂交 | 第25-27页 |
2.2.4.1 探针制备 | 第25-26页 |
2.2.4.2 预电泳 | 第26页 |
2.2.4.3 Southern吸印 | 第26页 |
2.2.4.4 Southern杂交 | 第26-27页 |
2.2.5 最低检测限分析 | 第27页 |
2.2.6 抗草甘膦转基因大豆分子检测与表型鉴定比较 | 第27-28页 |
3 结果分析 | 第28-51页 |
3.1 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立与应用 | 第28-33页 |
3.1.1 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立 | 第28-31页 |
3.1.2 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的应用 | 第31-33页 |
3.2 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的优化及应用 | 第33-38页 |
3.2.1 PCR检测方法的优化 | 第33-36页 |
3.2.2 优化PCR检测方法的应用 | 第36-38页 |
3.3 PCR检测方法最低检测限分析 | 第38-43页 |
3.3.1 DNA稀释法分析转基因最低检测限 | 第38-40页 |
3.3.2 重量稀释法分析转基因最低检测限 | 第40-43页 |
3.4 抗草甘膦转基因大豆的分子检测与表型鉴定的比较 | 第43-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
4.1 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立 | 第51页 |
4.2 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的优化 | 第51-52页 |
4.3 GMO最低检测限分析 | 第52页 |
4.4 抗草甘膦转基因大豆分子检测与表型鉴定比较 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
6 参考文献 | 第55-64页 |
7 致谢 | 第64页 |