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抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立与应用

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
1 文献综述第9-22页
 1.1 转基因作物发展概况第9-13页
  1.1.1 转基因作物研究现状第9页
  1.1.2 转基因作物效益第9-10页
  1.1.3 转基因作物安全性问题第10-12页
   1.1.3.1 转基因作物环境安全性问题第10-11页
   1.1.3.2 转基因作物食品安全性问题第11-12页
  1.1.4 国内外对转基因作物所持态度第12-13页
 1.2 抗草甘膦转基因作物研究第13-17页
  1.2.1 草甘膦作用机理第14页
  1.2.2 获得抗草甘膦作物的途径第14-17页
   1.2.2.1 草甘膦对EPSPS的变异酶不敏感第14-15页
   1.2.2.2 作物产生过量EPSPS合酶,以抵消草甘膦的作用第15-16页
   1.2.2.3 草甘膦被微生物快速代谢为对作物无毒产物第16页
   1.2.2.4 CP4—EPSPS的催化活性不受草甘膦影响第16-17页
 1.3 转基因作物检测研究第17-20页
  1.3.1 酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测第17-18页
  1.3.2 基因芯片(DNA chip)检测第18页
  1.3.3 聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)检测第18-20页
   1.3.3.1 定性PCR检测第18-19页
   1.3.3.2 定量PCR检测第19-20页
  1.3.4 各种检测方法的比较第20页
 1.4 本研究的目的与意义第20-22页
2 材料与方法第22-28页
 2.1 材料第22页
 2.2 方法第22-28页
  2.2.1 引物的设计与合成第22页
  2.2.2 总DNA提取第22-25页
   2.2.2.1 大豆种子、豆粕DNA提取第22-24页
   2.2.2.2 大豆叶片DNA提取第24-25页
  2.2.3 PCR扩增第25页
  2.2.4 Southern杂交第25-27页
   2.2.4.1 探针制备第25-26页
   2.2.4.2 预电泳第26页
   2.2.4.3 Southern吸印第26页
   2.2.4.4 Southern杂交第26-27页
  2.2.5 最低检测限分析第27页
  2.2.6 抗草甘膦转基因大豆分子检测与表型鉴定比较第27-28页
3 结果分析第28-51页
 3.1 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立与应用第28-33页
  3.1.1 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立第28-31页
  3.1.2 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的应用第31-33页
 3.2 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的优化及应用第33-38页
  3.2.1 PCR检测方法的优化第33-36页
  3.2.2 优化PCR检测方法的应用第36-38页
 3.3 PCR检测方法最低检测限分析第38-43页
  3.3.1 DNA稀释法分析转基因最低检测限第38-40页
  3.3.2 重量稀释法分析转基因最低检测限第40-43页
 3.4 抗草甘膦转基因大豆的分子检测与表型鉴定的比较第43-51页
4 讨论第51-54页
 4.1 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的建立第51页
 4.2 抗草甘膦转基因大豆PCR检测方法的优化第51-52页
 4.3 GMO最低检测限分析第52页
 4.4 抗草甘膦转基因大豆分子检测与表型鉴定比较第52-54页
5 结论第54-55页
6 参考文献第55-64页
7 致谢第64页

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