摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-41页 |
·再生过程形态学描述 | 第13-19页 |
·植物激素应答调控 | 第14-15页 |
·已分化器官脱分化的分子基础 | 第15-16页 |
·根器官建成的分子基础 | 第16-18页 |
·芽器官发生的分子基础 | 第18-19页 |
·体细胞胚胎发生的诱导因子 | 第19-28页 |
·植物激素对再生的调控作用 | 第20-21页 |
·胁迫诱导对再生的影响 | 第21-28页 |
·生化物质添加对植株再生的影响 | 第28页 |
·组织培养阶段提高植株再生的策略 | 第28-32页 |
·基因型筛选 | 第29页 |
·外植体选择 | 第29-30页 |
·培养基成分优化 | 第30-31页 |
·激素搭配 | 第31-32页 |
·生长素的作用机制及其对再生的影响 | 第32-33页 |
·再生性状细胞遗传学研究 | 第33-34页 |
·提高植株再生的分子手段 | 第34-39页 |
·再生基因分离方法 | 第34-35页 |
·再生基因克隆研究进展 | 第35-38页 |
·无选择标记载体系统 | 第38-39页 |
·本研究的目的和意义 | 第39-40页 |
·技术路线 | 第40-41页 |
第二章 小麦幼胚高效再生培养方法优化 | 第41-49页 |
·材料与方法 | 第41-43页 |
·试验材料 | 第41-42页 |
·试验方法 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-47页 |
·生长素中断不同时间对小麦幼胚再生效果的影响 | 第43-44页 |
·生长素中断处理前诱导培养不同时间对小麦幼胚再生效果的影响 | 第44页 |
·生长素中断处理培养方式对不同小麦基因型再生效果的影响 | 第44-46页 |
·不同温度预处理及水分胁迫对小麦幼胚再生效果的影响 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
第三章 小麦TaNiR 基因克隆及分子生物学特性分析 | 第49-73页 |
·材料与方法 | 第49-57页 |
·试验材料 | 第49-50页 |
·试验方法 | 第50-57页 |
·结果与分析 | 第57-69页 |
·小麦TaNiR 全长克隆及5′端调控序列克隆 | 第57-60页 |
·TaNiR 二级结构预测及高级结构同源建模 | 第60-61页 |
·小麦TaNiR 基因进化树构建 | 第61-62页 |
·小麦TaNiR 原核表达、半定量RT-PCR 分析及酶活性测定 | 第62-64页 |
·TaNiR 调控序列缺失功能分析 | 第64-65页 |
·TaNiR 与Ferredoxin 互作验证 | 第65-66页 |
·小麦TaNiR 基因染色体定位 | 第66-67页 |
·TaNiR qRT-PCR 分析 | 第67-68页 |
·小麦TaNiR 转基因植株检测和初步功能鉴定 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-73页 |
·NiR 启动子克隆 | 第69-70页 |
·NiR 分子特性研究 | 第70-72页 |
·NiR 生化及生理特性研究 | 第72-73页 |
第四章 小麦TaCATs 基因克隆及其分子生物学特性分析 | 第73-101页 |
·材料与方法 | 第74-80页 |
·试验材料及质粒载体 | 第74页 |
·试验方法 | 第74-80页 |
·结果与分析 | 第80-99页 |
·差异ESTs 或cDNA 半定量RT-PCR 分析 | 第80-81页 |
·小麦TaCATs 基因全长克隆及生物学特性分析 | 第81-93页 |
·小麦TaCATs 的qRT-PCR 分析和H_2O_2 含量测定 | 第93-96页 |
·AGP 及BR 及温度、水分胁迫处理小麦外植体对TaCATs 表达影响 | 第96-98页 |
·小麦TaCAT1 转基因研究 | 第98-99页 |
·讨论 | 第99-101页 |
第五章 小麦TaSERKs~N基因克隆及分子生物学特性分析 | 第101-116页 |
·试验材料及方法 | 第102-103页 |
·试验材料 | 第102页 |
·试验方法 | 第102-103页 |
·结果 | 第103-113页 |
·TaSERKs~N 序列分离 | 第103-104页 |
·TaSERKs~N 表达特性分析 | 第104-107页 |
·TaSERKs~N 理化特性及定位分析 | 第107-112页 |
·TaSERKs~N 进化树构建 | 第112-113页 |
·讨论 | 第113-116页 |
第六章 安全型转基因植物表达载体构建 | 第116-122页 |
·试验材料及方法 | 第116-118页 |
·质粒载体 | 第116页 |
·试验方法 | 第116-118页 |
·结果 | 第118-120页 |
·pWMB014 载体构建和转化验证 | 第118-119页 |
·pWMB022 载体构建和转化验证 | 第119-120页 |
·pWMB025 载体构建及转基因验证 | 第120页 |
·讨论 | 第120-122页 |
第七章 全文结论 | 第122-126页 |
·发现愈伤组织诱导阶段生长素中断处理显著提高小麦幼胚再生率 | 第122页 |
·成功分离了小麦亚硝酸还原酶NiR 基因并进行了分子鉴定 | 第122-123页 |
·成功分离到小麦第三类CAT 编码基因并对TaCATs 进行了分子鉴定 | 第123-124页 |
·成功分离2 个全长的小麦SERKs~N基因并进行了分子鉴定 | 第124页 |
·构建了4 个适合农杆菌及基因枪介导转化小麦的安全型载体 | 第124-126页 |
参考文献 | 第126-153页 |
附录 | 第153-160页 |
致谢 | 第160-161页 |
作者简历 | 第161-162页 |
攻读博士期间发表及待刊论文 | 第161-162页 |
攻读博士期间申请的专利 | 第162页 |