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小麦组织培养再生相关基因克隆及分子特性分析

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-41页
   ·再生过程形态学描述第13-19页
     ·植物激素应答调控第14-15页
     ·已分化器官脱分化的分子基础第15-16页
     ·根器官建成的分子基础第16-18页
     ·芽器官发生的分子基础第18-19页
   ·体细胞胚胎发生的诱导因子第19-28页
     ·植物激素对再生的调控作用第20-21页
     ·胁迫诱导对再生的影响第21-28页
     ·生化物质添加对植株再生的影响第28页
   ·组织培养阶段提高植株再生的策略第28-32页
     ·基因型筛选第29页
     ·外植体选择第29-30页
     ·培养基成分优化第30-31页
     ·激素搭配第31-32页
   ·生长素的作用机制及其对再生的影响第32-33页
   ·再生性状细胞遗传学研究第33-34页
   ·提高植株再生的分子手段第34-39页
     ·再生基因分离方法第34-35页
     ·再生基因克隆研究进展第35-38页
     ·无选择标记载体系统第38-39页
   ·本研究的目的和意义第39-40页
   ·技术路线第40-41页
第二章 小麦幼胚高效再生培养方法优化第41-49页
   ·材料与方法第41-43页
     ·试验材料第41-42页
     ·试验方法第42-43页
   ·结果与分析第43-47页
     ·生长素中断不同时间对小麦幼胚再生效果的影响第43-44页
     ·生长素中断处理前诱导培养不同时间对小麦幼胚再生效果的影响第44页
     ·生长素中断处理培养方式对不同小麦基因型再生效果的影响第44-46页
     ·不同温度预处理及水分胁迫对小麦幼胚再生效果的影响第46-47页
   ·讨论第47-49页
第三章 小麦TaNiR 基因克隆及分子生物学特性分析第49-73页
   ·材料与方法第49-57页
     ·试验材料第49-50页
     ·试验方法第50-57页
   ·结果与分析第57-69页
     ·小麦TaNiR 全长克隆及5′端调控序列克隆第57-60页
     ·TaNiR 二级结构预测及高级结构同源建模第60-61页
     ·小麦TaNiR 基因进化树构建第61-62页
     ·小麦TaNiR 原核表达、半定量RT-PCR 分析及酶活性测定第62-64页
     ·TaNiR 调控序列缺失功能分析第64-65页
     ·TaNiR 与Ferredoxin 互作验证第65-66页
     ·小麦TaNiR 基因染色体定位第66-67页
     ·TaNiR qRT-PCR 分析第67-68页
     ·小麦TaNiR 转基因植株检测和初步功能鉴定第68-69页
   ·讨论第69-73页
     ·NiR 启动子克隆第69-70页
     ·NiR 分子特性研究第70-72页
     ·NiR 生化及生理特性研究第72-73页
第四章 小麦TaCATs 基因克隆及其分子生物学特性分析第73-101页
   ·材料与方法第74-80页
     ·试验材料及质粒载体第74页
     ·试验方法第74-80页
   ·结果与分析第80-99页
     ·差异ESTs 或cDNA 半定量RT-PCR 分析第80-81页
     ·小麦TaCATs 基因全长克隆及生物学特性分析第81-93页
     ·小麦TaCATs 的qRT-PCR 分析和H_2O_2 含量测定第93-96页
     ·AGP 及BR 及温度、水分胁迫处理小麦外植体对TaCATs 表达影响第96-98页
     ·小麦TaCAT1 转基因研究第98-99页
   ·讨论第99-101页
第五章 小麦TaSERKs~N基因克隆及分子生物学特性分析第101-116页
   ·试验材料及方法第102-103页
     ·试验材料第102页
     ·试验方法第102-103页
   ·结果第103-113页
     ·TaSERKs~N 序列分离第103-104页
     ·TaSERKs~N 表达特性分析第104-107页
     ·TaSERKs~N 理化特性及定位分析第107-112页
     ·TaSERKs~N 进化树构建第112-113页
   ·讨论第113-116页
第六章 安全型转基因植物表达载体构建第116-122页
   ·试验材料及方法第116-118页
     ·质粒载体第116页
     ·试验方法第116-118页
   ·结果第118-120页
     ·pWMB014 载体构建和转化验证第118-119页
     ·pWMB022 载体构建和转化验证第119-120页
     ·pWMB025 载体构建及转基因验证第120页
   ·讨论第120-122页
第七章 全文结论第122-126页
   ·发现愈伤组织诱导阶段生长素中断处理显著提高小麦幼胚再生率第122页
   ·成功分离了小麦亚硝酸还原酶NiR 基因并进行了分子鉴定第122-123页
   ·成功分离到小麦第三类CAT 编码基因并对TaCATs 进行了分子鉴定第123-124页
   ·成功分离2 个全长的小麦SERKs~N基因并进行了分子鉴定第124页
   ·构建了4 个适合农杆菌及基因枪介导转化小麦的安全型载体第124-126页
参考文献第126-153页
附录第153-160页
致谢第160-161页
作者简历第161-162页
 攻读博士期间发表及待刊论文第161-162页
 攻读博士期间申请的专利第162页

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