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稻瘟病菌Cdc42与Chm1关系初探

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-11页
第一部分 引言第11-21页
 1 稻瘟病与稻瘟病菌第11页
 2 稻瘟病菌侵染循环第11-12页
 3 稻瘟病菌致病过程相关的信号转导第12-14页
   ·cAMP信号途径第12页
   ·Ca~(2+)信号途径第12页
   ·MAPK信号途径第12-14页
 4 Cdc42的功能多样性第14-17页
 5 PAK激酶及其功能第17-19页
 6 稻瘟病菌中Cdc42与PAK激酶关系研究意义第19-21页
第二部分 实验第21-54页
 1 材料与方法第21-33页
   ·实验材料第21-22页
     ·供试菌株第21页
     ·培养基第21-22页
     ·生化试剂第22页
   ·实验方法第22-33页
     ·蛋白序列获得及分析第22-23页
       ·蛋白序列获得第22页
       ·蛋白结构域的分析第22-23页
     ·稻瘟病菌菌丝体total RNA的提取及检测第23页
     ·反转录第23-24页
     ·稻瘟病菌基因组DNA的提取及提取质量的检测第24-25页
     ·重叠延伸PCR第25-26页
       ·引物设计第25-26页
       ·扩增步骤第26页
     ·蛋白互作分析第26-29页
       ·转化载体的构建第26-27页
         ·bait载体的构建第26-27页
         ·prey载体的构建第27页
       ·酵母转化第27-28页
       ·转化子验证第28-29页
         ·平板培养基验证第28页
         ·酵母质粒PCR验证第28-29页
     ·Chm1 PBD domain敲除突变体载体的构建第29-30页
     ·稻瘟病菌原生质体的制备和转化第30页
     ·孢子活化及扩大培养第30页
     ·稻瘟病菌菌落生长速度测定第30-31页
     ·产孢量统计及细胞形态观察第31页
     ·孢子萌发及附着胞形成实验第31页
     ·洋葱表皮内侵染结构的观察第31-32页
     ·大麦接种实验第32页
     ·水稻致病性鉴定第32页
     ·叶片组织造伤接种实验第32页
     ·水稻根部接种实验第32-33页
 2 结果与分析第33-49页
   ·Chm1及Mst20编码蛋白分析第33-34页
   ·MgCdc42与Chm1及Mst20的表达分析第34-35页
     ·MgCdc42与Chm1的表达关系第34-35页
     ·MgCdc42与Mst20的表达关系第35页
   ·酵母双杂交分析MgCdc42与Chm1及Mst20之间的互作第35-36页
   ·Chm1之PBD结构域缺失载体的构建第36-37页
   ·突变体的筛选第37-38页
   ·突变体的表型分析第38-49页
     ·PCG-33表型分析第38-43页
       ·生长速度分析第38-39页
       ·菌丝形态分析第39页
       ·孢子形态及数量分析第39-40页
       ·孢子萌发及附着胞形态分析第40-41页
       ·洋葱表皮侵染及水稻致病性分析第41-43页
     ·PCC-24表型分析第43-47页
       ·生长速度分析第43页
       ·菌丝形态分析第43-44页
       ·孢子形态及数量分析第44页
       ·孢子萌发及附着胞形态分析第44-45页
       ·洋葱表皮侵染分析第45-46页
       ·致病性分析第46-47页
     ·CPDC-12表型分析第47-49页
       ·生长速度分析第47页
       ·菌丝形态分析第47-48页
       ·孢子形态及数量分析第48页
       ·孢子萌发及附着胞形态分析第48页
       ·洋葱表皮侵染及水稻致病性分析第48-49页
 3 小结与讨论第49-54页
参考文献第54-61页
附录 本研究中所采用的引物序列及其用途第61-62页
致谢第62页

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