| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-25页 |
| ·防御素分子家族的研究简况 | 第9页 |
| ·Α-防御素概况 | 第9-11页 |
| ·Α-防御素的基因结构及表达调节 | 第9-10页 |
| ·Α-防御素的细胞来源和组织分布 | 第10-11页 |
| ·Α-防御素的生物学活性 | 第11页 |
| ·Β-防御素 | 第11-16页 |
| ·Β-防御素的基因结构及表达调节 | 第11-13页 |
| ·Β-防御素的细胞来源和组织分布 | 第13-14页 |
| ·Β-防御素的生物学活性 | 第14-15页 |
| ·Β-防御素的生物合成 | 第15-16页 |
| ·Θ-防御素 | 第16-17页 |
| ·昆虫防御素 | 第17页 |
| ·植物防御素 | 第17-18页 |
| ·防御素的生物功能 | 第18-21页 |
| ·防御素的抗菌作用及影响因素 | 第18-19页 |
| ·防御素的细胞毒作用及影响因素 | 第19-20页 |
| ·防御素的其他生物学功能 | 第20-21页 |
| ·防御素的抗菌机制 | 第21-22页 |
| ·防御素的应用前景及研究方向 | 第22-25页 |
| ·替代抗生素解决细菌耐药性问题 | 第22-23页 |
| ·结合转基因技术赋予细胞自身抗感染能力 | 第23页 |
| ·其他方面的应用 | 第23-24页 |
| ·今后防御素的研究方向 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的及创新点 | 第25页 |
| 2 试验一 5 月龄绵羊胎儿十二指肠Β-防御素CDNA 的克隆与序列分析 | 第25-32页 |
| ·实验材料与试剂 | 第25页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·仪器和试剂 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-28页 |
| ·Β-防御素 CDNA PCR 引物的设计 | 第25-26页 |
| ·5 月龄绵羊胎儿十二指肠组织总RNA 的提取与检测 | 第26页 |
| ·RT-PCR | 第26-28页 |
| ·Β-防御素CDNA 序列比对分析 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-31页 |
| ·5 月龄绵羊十二指肠组织总RNA 的检测结果 | 第28页 |
| ·5 月龄绵羊胎儿十二指肠组织RT-PCR 扩增结果 | 第28-29页 |
| ·5 月龄绵羊胎儿十二指肠组织Β-防御素CDNA 测序结果 | 第29页 |
| ·5 月龄绵羊胎儿十二指肠组织Β-防御素CDNA 与相关生物Β-防御素CDNA的比对分析 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 3 实验二 原位杂交技术检测绵羊胎儿Β-防御素(SBD-2)的表达 | 第32-43页 |
| ·材料及仪器 | 第33-34页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第33页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·实验所需试剂的配制 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-38页 |
| ·5 月龄绵羊十二指肠SBD-2 PCR 产物的合成、回收及核酸探针的标记 | 第34-37页 |
| ·原位杂交 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·5 月龄绵羊胎儿十二指肠SBD-2 RT-PCR 产物回收电泳图 | 第38页 |
| ·5 月龄绵羊十二指肠SBD-2 RT-PCR 产物的地高辛标记效率检测 | 第38-39页 |
| ·5 月龄绵羊肺，十二指肠，子宫组织原位杂交检测结果 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·Β-防御素的原位杂交定位 | 第41页 |
| ·原位杂交实验中最常遇到的问题 | 第41-42页 |
| ·原位杂交实验中应注意的问题 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43页 |
| 4 实验三 不同组织中SBD-2 表达的实时荧光定量分析 | 第43-56页 |
| ·材料和仪器 | 第44页 |
| ·仪器和试剂 | 第44页 |
| ·实验动物 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术原理及计算方法 | 第44-45页 |
| ·不同月龄绵羊肺、肠、生殖道组织总RNA 的提取与检测 | 第45页 |
| ·Β-ACTIN CDNA PCR 引物设计 | 第45-46页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR | 第46-47页 |
| ·PCR 产物电泳检测及基因测序 | 第47页 |
| ·荧光实时定量PCR 扩增效率以及扩增曲线和熔解曲线绘制 | 第47-48页 |
| ·结果 | 第48-55页 |
| ·4 月龄绵羊胎儿肺、肠、生殖道总RNA 的电泳检测 | 第48页 |
| ·实时荧光定量PCR 产物电泳检测结果 | 第48-49页 |
| ·SBD-2 和Β-ACTIN CDNA 实时荧光定量PCR 扩增曲线与扩增效率曲线 | 第49-50页 |
| ·SBD-2 和Β-ACTIN 实时荧光定量PCR 扩增曲线和熔解曲线分析 | 第50-51页 |
| ·绵羊胎儿不同发育时期的肺、肠、生殖道中SBD-2 MRNA 的相对表达量 | 第51-55页 |
| ·讨论 | 第55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
