| 缩略语 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 前言——细菌S-层蛋白的研究进展与课题研究背景 | 第12-30页 |
| 1 细菌S-层蛋白的研究进展 | 第12-26页 |
| ·细菌S-层的结构组成、形态发生和功能 | 第12-17页 |
| ·S-层的结构组成 | 第12-16页 |
| ·S-层的形态发生和功能 | 第16-17页 |
| ·细菌表面S-层蛋白的结构组成、表达和功能 | 第17-21页 |
| ·S-层蛋白的化学组成 | 第17-18页 |
| ·S-层蛋白的编码基因及其转录、表达 | 第18-19页 |
| ·S-层蛋白的运输以及锚定过程 | 第19-20页 |
| ·S-层蛋白的功能 | 第20-21页 |
| ·细菌S-层蛋白的应用前景展望 | 第21-26页 |
| ·体外高效表达 | 第21-22页 |
| ·表面展示 | 第22页 |
| ·免疫学中的应用 | 第22-23页 |
| ·酶的固定 | 第23页 |
| ·亲和微粒的制作 | 第23-24页 |
| ·生物传感器中的应用 | 第24页 |
| ·纳米技术中的应用 | 第24-25页 |
| ·S-层支撑的脂膜结构 | 第25页 |
| ·应用于生物学检测与鉴定体系 | 第25-26页 |
| 2 课题研究背景 | 第26-30页 |
| ·苏云金芽胞杆菌CTC的S-层蛋白基因的克隆 | 第26-28页 |
| ·CTC菌株的鉴定 | 第26页 |
| ·晶体蛋白CTC可能是S-层蛋白 | 第26-28页 |
| ·利用S-层蛋白在苏云金芽胞杆菌中表面展示AHL内酯酶 | 第28-30页 |
| ·软腐病致病机制 | 第28页 |
| ·AHL内酯酶的发现 | 第28页 |
| ·AHL内酯酶基因的胞外表达 | 第28-30页 |
| 材料和方法 | 第30-39页 |
| 1 菌株和质粒 | 第30-31页 |
| 2 培养基和培养条件 | 第31-32页 |
| 3 芽胞杆菌CTC的S.层蛋白的检测 | 第32页 |
| 4 用Blast方法分析晶体蛋白CTC和CTC2 | 第32页 |
| 5 Western杂交及免疫荧光反应检测CTC蛋白 | 第32页 |
| 6 细胞免疫透射电镜方法 | 第32-33页 |
| 7 苏云金芽胞杆菌的转化 | 第33-34页 |
| 8 杂交分析 | 第34页 |
| 9 S-层蛋白的缺失 | 第34页 |
| 10 PCR | 第34-35页 |
| 11 生长曲线的测定 | 第35页 |
| 12 细胞形态的观察 | 第35-36页 |
| 13 耐碱能力的比较 | 第36页 |
| 14 上清液的处理 | 第36页 |
| 15 免疫荧光反应检测融合蛋白SLH-AiiA的表面展示 | 第36页 |
| 16 免疫印记反应检测融合蛋白SLH-AiiA | 第36页 |
| 17 AHL降解酶活性的检测分析 | 第36-37页 |
| 18 胞外酶的活性分析 | 第37页 |
| 19 毒力检测 | 第37页 |
| 20 液体培养下苏云金芽胞杆菌重组菌对欧文氏胡萝卜软腐菌生长的影响 | 第37页 |
| 21 接种土豆片以后苏云金芽胞杆菌重组菌对欧文氏胡萝卜软腐菌生长的影响 | 第37-38页 |
| 22 OD_(600nm)的测定 | 第38页 |
| 23 苏云金芽胞杆菌抑制由欧文氏胡萝卜软腐病菌引发的植物软腐病的能力 | 第38页 |
| 24 DNA抽提、Northern杂交等分子操作 | 第38-39页 |
| 结果与分析 | 第39-72页 |
| 1 苏云金芽胞杆菌CTC的S-层蛋白与晶体蛋白CTC是同种蛋白 | 第39-47页 |
| ·CTC菌株有S-层蛋白 | 第39-41页 |
| ·纯化的晶体蛋白质为100kDa | 第41-42页 |
| ·芽胞杆菌CTC菌株的晶状内含体蛋白与S-层蛋白为同种蛋白 | 第42-45页 |
| ·CTC蛋白可以分泌至胞外并在胞内大量累积 | 第45-47页 |
| 2 S-层蛋白基因ctc2的分离 | 第47-49页 |
| 3 S-层蛋白稳定性分析 | 第49页 |
| 4 CTC菌株S-层蛋白的功能初探 | 第49-59页 |
| ·CTC蛋白在其它细菌中的锚定与晶体形成情况 | 第49-51页 |
| ·CTC菌株的S-层蛋白的缺失对菌株生理的影响 | 第51-59页 |
| ·苏云金芽胞杆菌CTC的ctc和ctc2基因敲除 | 第51-55页 |
| ·S-层蛋白的缺失对CTC菌株生理的影响 | 第55-59页 |
| ·S-层蛋白缺失以后对CTC菌株正常生长的影响 | 第55-56页 |
| ·S-层蛋白缺失对CTC细胞及其菌落形态的影响 | 第56-57页 |
| ·CTC菌株与其S-层蛋白双缺失菌株的转化能力的比较 | 第57页 |
| ·碱性条件下CTC菌株与其S-层蛋白双缺失菌株Tr5的菌落生长情况 | 第57-59页 |
| 5 在苏云金芽胞杆菌中将丝氨酸乙酰内酯酶基因与S-层蛋白基因融合增强抗欧文氏胡萝卜软腐病的能力 | 第59-72页 |
| ·slh-aiiA_(4Q7)融合基因在苏云金芽胞杆菌BMBSaii-Tr5细胞外空间表达 | 第59-62页 |
| ·苏云金芽胞杆菌BMBSaii-Tr5具有较强的胞外AHL降解酶活性 | 第62-64页 |
| ·SLH-AiiA对蛋白酶和紫外线辐射的敏感性 | 第64-65页 |
| ·苏云金芽胞杆菌BMBSaii-Tr5能够有效地弱化欧文氏胡萝卜软腐菌的病原性 | 第65-69页 |
| ·重组菌和AiiA_(4Q7)蛋白对欧文氏胡萝卜软腐菌生长的影响 | 第69-70页 |
| ·外源基因的表达对重组菌生长的影响 | 第70-72页 |
| 讨论 | 第72-78页 |
| 总结与展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-89页 |
| 附录 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
