| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-20页 |
| ·猪传染性萎缩性鼻炎及其病原学特征 | 第12-14页 |
| ·猪产毒素多杀性巴氏杆菌毒素的特性 | 第14-16页 |
| ·猪产毒素多杀性巴氏杆菌毒素的研究进展 | 第16-17页 |
| ·猪产毒素多杀性巴氏杆菌的检测方法 | 第17-18页 |
| ·猪传染性萎缩性鼻炎疫苗研究 | 第18-20页 |
| 2 研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·材料 | 第22-25页 |
| ·本试验所用培养基、抗生素 | 第22页 |
| ·菌株、质粒、载体及细胞 | 第22-23页 |
| ·各种酶、试剂盒及常用试剂 | 第23页 |
| ·本试验用的PCR引物 | 第23-24页 |
| ·质粒DNA提取液、SDS-PAGE、Westen-Blot、包涵体提取的相关溶液 | 第24-25页 |
| ·试验动物 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-33页 |
| ·T~+Pm基因组的提取 | 第25-26页 |
| ·toxA全基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·toxA全基因与截短片断的表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·诱导与表达 | 第29页 |
| ·SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western-blot检测 | 第29-30页 |
| ·包涵体的提取 | 第30页 |
| ·蛋白质浓度的测定(BCA分析) | 第30-31页 |
| ·重组蛋白的动物试验 | 第31-32页 |
| ·巴氏杆菌活菌计数及半数致死量的测定 | 第31页 |
| ·重组蛋白的免疫原性试验 | 第31-32页 |
| ·小鼠病理切片的制作 | 第32页 |
| ·重组蛋白的细胞毒力试验 | 第32-33页 |
| 4.结果与分析 | 第33-43页 |
| ·toxA基因的克隆、序列分析及表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·toxA基因的克隆与序列分析 | 第33-34页 |
| ·toxA基因及其截短片段的表达载体的构建 | 第34-36页 |
| ·重组蛋白的提取结果 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白浓度测定结果 | 第37页 |
| ·重组蛋白动物试验结果 | 第37-42页 |
| ·巴氏杆菌活菌计数及半数致死量测定结果 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白的免疫保护力试验结果 | 第39-40页 |
| ·PMT-ELISA方法建立及免疫小鼠抗体水平检测 | 第40页 |
| ·ELISA条件的确定 | 第40页 |
| ·两次免疫后抗体水平变化 | 第40页 |
| ·小鼠病理切片的观察 | 第40-42页 |
| ·重组蛋白的细胞毒力试验结果 | 第42-43页 |
| 5 讨论 | 第43-46页 |
| ·toxA全基因克隆 | 第43页 |
| ·toxA基因截短片段的构建 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白动物试验结果 | 第44-45页 |
| ·toxA基因截短片段的反应原性检测 | 第44页 |
| ·巴氏杆菌活菌计数及半数致死量测定 | 第44页 |
| ·截短片段免疫保护力试验结果 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白细胞毒力试验结果 | 第45-46页 |
| 6.小结 | 第46-48页 |
| ·本研究获得的主要成果 | 第46页 |
| ·本研究的创新点与特色 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录1 | 第56-57页 |
| 附录2 | 第57-58页 |
