| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-22页 |
| 1 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)概述 | 第10-12页 |
| 2 PRRSV的生物学特性 | 第12-13页 |
| 3 PRRSV的基因遗传变异性 | 第13页 |
| 4 PRRS的流行特点 | 第13-14页 |
| 5 PRRS的症状及病变 | 第14-15页 |
| 6 PRRSV免疫学特征 | 第15-17页 |
| 7 PRRS的临床诊断学研究 | 第17-18页 |
| 8 PRRS疫苗的研究进展 | 第18-21页 |
| 9 本课题的研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 试验研究 | 第22-54页 |
| 材料 | 第22-25页 |
| 1 菌株、质粒、细胞和病毒 | 第22页 |
| 2 酶与试剂 | 第22页 |
| 3 主要仪器 | 第22-23页 |
| 4 各种溶液及培养基 | 第23-25页 |
| 方法 | 第25-37页 |
| 1. PRRSV ORF6、ORFS基因的克隆与序歹l}分析 | 第25-29页 |
| ·PRRSV ORF6、ORF5基因的克隆 | 第25-29页 |
| ·序列测定与分析 | 第29页 |
| 2. PRRSV DNA重组体的构建 | 第29-34页 |
| ·DNA重组体pVAX1-ORF6构建 | 第29-32页 |
| ·DNA重组体pVAX1-SEA-ORF6的构建 | 第32-33页 |
| ·DNA重组体pVAX-1-SEA-ORF6-ORF5构建 | 第33-34页 |
| 3. PRRSV DNA重组体的鉴定 | 第34-37页 |
| ·PRRSV DNA重组体的酶切鉴定 | 第34-35页 |
| ·PRRSV DNA重组体转染细胞 | 第35页 |
| ·PRRSV DNA重组体间接免疫荧光法(IFA)检测 | 第35-36页 |
| ·PRRSV DNA重组体RT-PCR鉴定 | 第36-37页 |
| 结果 | 第37-51页 |
| 1 PRRSV ORF6、ORF5基因的克隆 | 第37-44页 |
| ·引物设计结果 | 第37页 |
| ·RT-PCR | 第37-39页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第39-41页 |
| ·核苷酸、氨基酸序列测定及其分析比较 | 第41-44页 |
| 2 PRRSV DNA重组体的酶切鉴定 | 第44-48页 |
| ·DNA重组体pVAX1-ORF6的鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·DNA重组体pVAX1-SEA-ORF6的酶切鉴定结果 | 第45-47页 |
| ·DNA重组体pVAX1-SEA-ORF6-ORF5的酶切鉴定结果 | 第47-48页 |
| 3 PRRSV DNA重组体的IFA检测结果 | 第48-49页 |
| 4 PRRSV DNA重组体的RT-PCR鉴定结果 | 第49-51页 |
| 讨论 | 第51-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
