| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-27页 |
| ·十六元大环内酯类抗生素介绍 | 第13-23页 |
| ·改善抗生素组分的生物学方法 | 第23-25页 |
| ·本论文立题方向 | 第25-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-36页 |
| ·材料部分 | 第27-31页 |
| ·菌种 | 第27页 |
| ·载体 | 第27页 |
| ·特殊试剂与酶 | 第27页 |
| ·特殊仪器 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28-30页 |
| ·缓冲液 | 第30页 |
| ·生物信息学分析工具 | 第30-31页 |
| ·方法部分 | 第31-36页 |
| ·E.coli质粒DNA小量提取 | 第31页 |
| ·E.coli质粒DNA大量提取 | 第31页 |
| ·限制酶切反应 | 第31页 |
| ·DNA电泳及片段回收 | 第31页 |
| ·DNA连接反应 | 第31页 |
| ·E.coli感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA转化E.coli感受态细胞 | 第32页 |
| ·E.coli转化子的快速鉴定 | 第32页 |
| ·链霉菌原生质体的制备、再生及DNA转化原生质体 | 第32-33页 |
| ·链霉菌总DNA提取方法 | 第33页 |
| ·少量快速提取链霉菌总DNA | 第33页 |
| ·常规PCR反应 | 第33-34页 |
| ·SON-PCR反应 | 第34页 |
| ·发酵液处理及抗生素组分分析 | 第34-35页 |
| ·高效液相色谱分析 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-55页 |
| ·螺旋霉素3-O-酰基转移酶基因部分序列的克隆 | 第36-38页 |
| ·采用单寡核苷酸巢式PCR(SON-PCR)方法克隆酰基转移酶基因两翼序列 | 第38-43页 |
| ·螺旋霉素sspA的完全删除 | 第43-46页 |
| ·sspA基因缺失重组载体的构建 | 第43-44页 |
| ·sspA基因缺失变株的筛选与鉴定 | 第44-46页 |
| ·mdmB基因的替换 | 第46-50页 |
| ·含有mdmB基因的重组载体的构建 | 第47页 |
| ·mdmB基因替换变株的筛选与鉴定 | 第47-50页 |
| ·主要产生异戊酰螺旋霉素Ⅰ的产生菌的获得 | 第50-55页 |
| ·载体的构建 | 第50-51页 |
| ·sspA基因阅读框内失活变株的筛选与鉴定 | 第51-55页 |
| 第四章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60-67页 |