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牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎玻璃化冷冻保存方法及冷冻损伤机理研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1 文献综述第11-21页
   ·低温冷冻保存的原理及其在动物种质资源保存方面的意义第11-12页
   ·生物材料超低温冷冻保存的基本方法第12-13页
     ·程序化冷冻保存方法第12页
     ·玻璃化冷冻保存方法第12-13页
   ·鱼类配子及胚胎超低温冷冻保存研究的意义第13页
   ·鱼类胚胎超低温冷冻保存研究进展第13-17页
     ·鱼类胚胎冷冻保存基础液的筛选第14页
     ·玻璃化冷冻保存中抗冻剂及玻璃化液的选择第14-15页
     ·适宜冷冻的鱼类胚胎时期的选择第15-16页
     ·鱼类卵膜对抗冻剂通透性研究第16页
     ·解冻方法的研究第16-17页
   ·鱼类胚胎超低温冷冻保存中新技术手段的应用第17-19页
     ·新型抗冻剂的利用第17页
     ·卵膜去除及卵黄吸取技术第17-18页
     ·通过保存鱼类囊胚细胞和胚胎干细胞来保存鱼类种质资源第18页
     ·显微注射技术第18-19页
     ·核磁共振显微术的应用第19页
   ·冷冻损伤机理的研究第19-21页
     ·冰晶损伤第19页
     ·溶液渗透损伤第19页
     ·过冷休克第19-20页
     ·电解质失衡第20页
     ·结构水破坏第20-21页
2 抗冻剂对牙鲆胚胎毒性研究及玻璃化液的筛选第21-30页
   ·引言第21页
   ·材料和方法第21-23页
     ·胚胎来源第21-22页
     ·抗冻剂及所需其他化学试剂第22页
     ·单一渗透性抗冻剂对牙鲆胚胎的毒性实验第22页
     ·非渗透性抗冻剂对牙鲆胚胎的毒性实验第22页
     ·三种渗透性抗冻剂混合比例对牙鲆胚胎的影响第22-23页
     ·玻璃化液对不同时期牙鲆胚胎的影响第23页
     ·数据统计第23页
   ·实验结果第23-28页
     ·单一渗透性抗冻剂对牙鲆胚胎的毒性实验第23-25页
     ·非渗透性抗冻剂对牙鲆胚胎的毒性实验第25-26页
     ·三种渗透性抗冻剂混合比例对牙鲆胚胎的影响第26-27页
     ·玻璃化液对不同时期牙鲆胚胎的影响第27-28页
   ·讨论第28-30页
3 渗透性抗冻剂渗透时间、冰点及玻璃化最低浓度的研究第30-35页
   ·引言第30页
   ·材料和方法第30-31页
     ·胚胎来源第30页
     ·抗冻剂与所需其他化学试剂第30页
     ·不同抗冻剂对牙鲆胚胎渗透时间的研究第30-31页
     ·不同渗透性抗冻剂冰点的测定第31页
     ·不同抗冻剂玻璃化最低浓度的测定第31页
     ·数据统计第31页
   ·实验结果第31-33页
     ·不同抗冻剂对牙鲆胚胎渗透时间的研究第31页
     ·不同渗透性抗冻剂冰点的测定第31-32页
     ·不同抗冻剂玻璃化最低浓度的测定第32-33页
   ·讨论第33-35页
4 不同时期牙鲆胚胎对冷冻敏感性的研究第35-45页
   ·引言第35-36页
   ·材料和方法第36-37页
     ·胚胎来源第36页
     ·-20℃冷冻对不同时期牙鲆胚胎的影响第36页
     ·-1℃冷冻对不同时期牙鲆胚胎的影响第36页
     ·程序降温仪中不同冷冻温度对牙鲆胚胎的影响第36页
     ·数据统计第36-37页
   ·实验结果第37-43页
     ·-20℃冷冻对不同时期牙鲆胚胎的影响第37-38页
     ·-1℃冷冻对不同时期牙鲆胚胎的影响第38-39页
     ·程序降温仪中不同冷冻温度对牙鲆胚胎的影响第39-43页
   ·讨论第43-45页
5 牙鲆胚胎不同玻璃化冷冻方法的对比第45-52页
   ·引言第45页
   ·材料和方法第45-46页
     ·胚胎来源第45页
     ·抗冻剂及所需其他化学试剂第45页
     ·颗粒冷冻法降温解冻时间的测定第45-46页
     ·颗粒冷冻法及麦管冷冻法玻璃化率的测定第46页
     ·颗粒冷冻法及麦管冷冻法解冻胚胎完整率的比较第46页
     ·颗粒冷冻法及麦管冷冻法解冻后胚胎形态比较第46页
     ·数据统计第46页
   ·实验结果第46-49页
     ·颗粒冷冻法降温解冻时间的测定第46-47页
     ·颗粒冷冻法及麦管冷冻法玻璃化率的测定第47-48页
     ·颗粒冷冻法及麦管冷冻法解冻胚胎完整率的比较第48-49页
     ·颗粒冷冻法及麦管冷冻法解冻后胚胎形态比较第49页
   ·讨论第49-52页
6 牙鲆胚胎玻璃化颗粒冷冻保存及损伤机理研究第52-62页
   ·引言第52-53页
   ·材料和方法第53-54页
     ·胚胎来源第53页
     ·抗冻剂及所需其他化学试剂第53页
     ·五步法平衡各步对牙鲆胚胎的影响第53页
     ·蒸汽解冻及水浴解冻时麦管玻璃化率的测定第53页
     ·牙鲆胚胎冷冻过程中损伤机理分析第53-54页
     ·牙鲆胚胎超低温冷冻保存第54页
     ·数据统计第54页
   ·实验结果第54-61页
     ·五步法平衡各步对牙鲆胚胎的影响第54-55页
     ·蒸汽解冻及水浴解冻时麦管玻璃化率的测定第55-57页
     ·牙鲆胚胎冷冻过程中损伤机理分析第57页
     ·牙鲆胚胎超低温冷冻保存第57-61页
   ·讨论第61-62页
参考文献第62-68页
附录第68-70页
 1. 论文发表情况第68-69页
 2. 主要缩写符号说明第69-70页
致谢第70页

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