| 前言 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-35页 |
| 1.稻瘟病研究 | 第12-29页 |
| ·稻瘟病概况 | 第12页 |
| ·稻瘟病菌病害循环 | 第12-13页 |
| ·稻瘟病菌从田间到实验室的变异 | 第13页 |
| ·稻瘟病菌的叶围侵染过程 | 第13-15页 |
| ·孢子萌发 | 第13-14页 |
| ·附着胞的形成和发育 | 第14页 |
| ·侵入栓的形成和侵入 | 第14页 |
| ·侵染菌丝的发展 | 第14-15页 |
| ·再侵染过程 | 第15页 |
| ·稻瘟病菌的根系统侵染过程 | 第15-16页 |
| ·稻瘟病菌的叶围侵染过程相关基因 | 第16-24页 |
| ·分生孢子的产生 | 第16-17页 |
| ·附着胞发育 | 第17-23页 |
| ·侵入后菌丝的分化扩展 | 第23-24页 |
| ·已发现的稻瘟病菌致病相关胞内信号传导途径 | 第24-29页 |
| ·cAMP途径 | 第24-25页 |
| ·G蛋白途径 | 第25-26页 |
| ·MAP kinase途径 | 第26-29页 |
| ·Ca~(2+)离子途径 | 第29页 |
| 2.细胞自噬 | 第29-35页 |
| ·细胞自噬现象 | 第29-30页 |
| ·细胞自噬的类型 | 第30-31页 |
| ·细胞巨自噬的过程 | 第31页 |
| ·细胞巨自噬涉及的重要基因 | 第31-35页 |
| ·自噬的诱导 | 第31-32页 |
| ·底物选择及包装 | 第32页 |
| ·自噬体的形成 | 第32-33页 |
| ·自噬蛋白的复位 | 第33-34页 |
| ·自噬体的运输、融合 | 第34页 |
| ·自噬体的裂解 | 第34-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-47页 |
| 1.试验菌株 | 第35页 |
| ·大肠杆菌 | 第35页 |
| ·稻瘟病菌 | 第35页 |
| 2.PCR | 第35-36页 |
| ·常规PCR | 第35页 |
| ·细菌菌落PCR | 第35-36页 |
| ·PCR反应条件 | 第36页 |
| 3.质粒及小片段DNA操作 | 第36-38页 |
| ·小量质粒提取 | 第36-37页 |
| ·中量质粒DNA的提取 | 第37页 |
| ·酶切 | 第37页 |
| ·酶切片段的去磷酸化(CIAP) | 第37页 |
| ·DNA片段的凝胶回收 | 第37-38页 |
| ·连接反应 | 第38页 |
| 4.遗传转化 | 第38-40页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞制备及细菌转化 | 第38-39页 |
| ·稻瘟病菌原生质体制备与转化 | 第39-40页 |
| 5.基因组DNA操作 | 第40-43页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| ·菌丝培养 | 第40页 |
| ·基因组DNA的提取(CTAB法) | 第40-41页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA Southern杂交(DIG) | 第41-43页 |
| ·DIG-DNA标记 | 第41页 |
| ·基因组DNA的消化、电泳及变性 | 第41页 |
| ·DNA转膜 | 第41-42页 |
| ·Southern杂交过程 | 第42-43页 |
| ·免疫显色 | 第43页 |
| 6.RNA及cDNA操作 | 第43-44页 |
| 7.稻瘟病菌生物学及侵染过程病理学观察 | 第44-47页 |
| ·菌株的保存 | 第44页 |
| ·菌株的培养 | 第44页 |
| ·菌落生长速度以及产孢量 | 第44页 |
| ·稻瘟病菌产孢培养、孢子收集和附着胞诱导培养 | 第44-45页 |
| ·附着胞塌陷实验 | 第45页 |
| ·有性杂交实验 | 第45页 |
| ·大麦离体接种 | 第45页 |
| ·水稻苗喷雾接种 | 第45-46页 |
| ·稻瘟菌菌侵染过程的组织病理学观察 | 第46页 |
| ·细胞自噬现象的显微镜观察 | 第46-47页 |
| 第三章 稻瘟病菌自噬基因MgATG9的功能研究 | 第47-67页 |
| 1.MgATG9基因的分离和克隆 | 第47-51页 |
| 2.MgATG9蛋白的结构预测 | 第51页 |
| 3.MgATG9基因敲除载体的构建 | 第51-52页 |
| 4.MgATG9基因缺失突变体的获得 | 第52-54页 |
| 5.MgATG9基因互补载体构建 | 第54-55页 |
| 6.突变体⊿mgatg9表型分析 | 第55-66页 |
| ·细胞自噬过程中断 | 第55-57页 |
| ·菌落形态 | 第57页 |
| ·气生菌丝产孢量大幅下降 | 第57-58页 |
| ·有性生殖能力明显减弱 | 第58页 |
| ·孢子发育受到影响 | 第58-59页 |
| ·附着胞膨压显著下降 | 第59-60页 |
| ·突变体⊿mgatg9致病性丧失 | 第60-64页 |
| ·离体大麦叶片接种 | 第60-61页 |
| ·离体伤口大麦叶片接种 | 第61-62页 |
| ·水稻喷雾接种及病斑分级 | 第62-64页 |
| ·侵染的组织病理学观察 | 第64-66页 |
| 7.小结 | 第66-67页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第67-72页 |
| 1.MgATG9基因为稻瘟病菌发生细胞白噬所必需 | 第68页 |
| 2.对MgATG9基因的研究给细胞自噬保守性添加新的证据 | 第68-69页 |
| 3.气生菌丝与细胞自噬 | 第69-70页 |
| 4.附着胞膨压与细胞自噬 | 第70页 |
| 5.分生孢子体死亡与细胞自噬 | 第70页 |
| 6.今后的工作 | 第70-72页 |
| 附录A 相关试剂 | 第72-73页 |
| 附录B 及培养基配方与培养条 | 第73-75页 |
| LB | 第73页 |
| CM(用于稻瘟病菌菌株培养) | 第73-74页 |
| OCM(用于稻瘟病菌原生质体转化) | 第74页 |
| OMA(用于稻瘟病菌有性杂交) | 第74页 |
| 水琼脂(用于稻瘟病菌菌株的单孢分离) | 第74-75页 |
| 附录C 引物信息 | 第75页 |
| 附录D 附着胞塌陷的标准示意图 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-81页 |