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HIV-1逆转录酶抑制剂筛选方法的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-12页
第一章 文献综述第12-39页
   ·引言第12页
   ·HIV 与抗艾滋病药物研究现状第12-20页
     ·HIV 结构特征第12-14页
     ·HIV 感染和复制机制第14-17页
       ·感染第15-16页
       ·逆转录第16页
       ·整合第16页
       ·转录第16-17页
       ·包装第17页
     ·抗HIV 药物的靶位设计第17-18页
       ·阻止病毒进入宿主细胞第17页
       ·抑制HIV 的酶类第17页
       ·抑制HIV 的基因表达第17-18页
     ·抗艾滋病药物研究现状第18-20页
       ·核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)第18-19页
       ·核苷酸类逆转录酶抑制剂(NtRTIs)第19页
       ·非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTIs)第19页
       ·蛋白酶抑制剂(PIs)第19-20页
       ·侵入抑制剂(EIs)第20页
     ·研究抗艾滋病药物的方法第20页
   ·HIV 逆转录酶活性及抑制活性测定方法研究现状第20-26页
     ·HIV 逆转录酶(RT)的结构和功能第21页
     ·HIV 逆转录酶活性及抑制活性测定方法研究进展第21-26页
       ·Roche 试剂盒方法第24-25页
       ·均相时间分辨荧光方法第25-26页
   ·本论文涉及的一些研究技术第26-30页
     ·免疫分析第26-28页
       ·免疫分析的类型第27页
         ·竞争型第27页
         ·夹心型第27页
       ·免疫分析的方法第27-28页
         ·异相免疫分析第27-28页
         ·均相免疫分析第28页
     ·时间分辨荧光技术第28-30页
       ·时间分辨荧光测定原理第28-29页
       ·稀土荧光标记物的研究进展第29-30页
   ·本课题研究目的及论文工作设想第30-32页
 参考文献第32-39页
第二章 HIV-1 逆转录酶活性测定方法的建立与初步考察第39-64页
   ·引言第39页
   ·方法的建立第39-41页
   ·实验部分第41-46页
     ·实验材料与仪器第41-43页
       ·实验材料第41-42页
       ·实验仪器第42-43页
     ·实验方法第43-46页
       ·实验用缓冲液第43-44页
       ·操作步骤第44-45页
       ·方法可行性研究第45页
       ·包被的考察第45-46页
       ·封闭的考察第46页
       ·逆转录反应的考察第46页
       ·逆转录反应后混合物特异性键合的考察第46页
       ·荧光标记物特异性键合的考察第46页
   ·结果与讨论第46-62页
     ·方法可行性研究第46-48页
     ·包被的考察第48-52页
     ·封闭的考察第52-56页
     ·逆转录反应的考察第56-58页
     ·逆转录反应后混合物特异性键合的考察第58-60页
     ·荧光标记物特异性键合的考察第60-62页
   ·小结第62-63页
 参考文献第63-64页
第三章 HIV-1 逆转录酶活性测定方法的条件优化第64-79页
   ·引言第64页
   ·实验部分第64-66页
     ·实验材料与仪器第64页
       ·实验材料第64页
       ·实验仪器第64页
     ·实验方法第64-66页
       ·实验用缓冲液第64-65页
       ·操作步骤第65页
       ·biotin-dUTP 浓度的优化第65页
       ·digoxigenin-dUTP 浓度的优化第65页
       ·用于包被的抗digoxigenin 抗体稀释液的选择第65页
       ·包被方式的选择第65-66页
       ·抗digoxigenin 抗体包被浓度的优化第66页
       ·BSA 封闭浓度的优化第66页
       ·SA(BSA)0.9(BHHCT-Eu3+)46 稀释倍数的优化第66页
   ·结果与讨论第66-78页
     ·biotin-dUTP 浓度的优化第66-67页
     ·digoxigenin-dUTP 浓度的优化第67-69页
     ·用于包被的抗digoxigenin 抗体稀释液的选择第69-71页
     ·包被方式的选择第71-72页
     ·抗digoxigenin 抗体包被浓度的优化第72-74页
     ·BSA 封闭浓度的优化第74-76页
     ·SA(BSA)0.9(BHHCT-Eu3+)46 稀释倍数的优化第76-78页
   ·小结第78页
 参考文献第78-79页
第四章 HIV-1 逆转录酶活性及其抑制活性测定方法的评价第79-92页
   ·引言第79页
   ·实验部分第79-81页
     ·实验材料与仪器第79-80页
       ·实验材料第79页
       ·实验仪器第79-80页
     ·实验方法第80-81页
       ·实验用缓冲液第80页
       ·操作步骤第80页
       ·线性及检测限的考察第80页
       ·批间重复性的考察第80-81页
       ·对已知抑制剂的HIV-1 逆转录酶抑制活性的考察第81页
       ·对生物素干扰的考察第81页
       ·对应用在天然产物粗提物的考察第81页
   ·结果与讨论第81-90页
     ·线性及检测限的考察第81-83页
     ·批间重复性的考察第83-85页
     ·抑制剂的抑制率计算第85页
     ·半数抑制浓度IC_(50) 的计算第85-86页
     ·对已知抑制剂的HIV-1 逆转录酶抑制活性的考察第86-87页
     ·对生物素干扰的考察第87-88页
     ·对应用在天然产物粗提物的考察第88-89页
     ·其它方面第89-90页
   ·小结第90-91页
 参考文献第91-92页
第五章 HIV-1 逆转录酶抑制活性测定方法的应用第92-101页
   ·引言第92页
   ·实验部分第92-96页
     ·实验材料与仪器第92页
       ·实验材料第92页
       ·实验仪器第92页
     ·实验方法第92-96页
       ·实验用缓冲液第92页
       ·HIV-1 逆转录酶抑制活性检测操作步骤第92-93页
       ·海绵粗提物的制备第93-94页
       ·繁茂膜海绵粗提物的萃取分离第94-96页
       ·两种纯物质的抑制活性检测第96页
   ·结果与讨论第96-100页
     ·不同海绵的 HIV-1 逆转录酶抑制剂潜在研究价值的评估第96-97页
     ·繁茂膜海绵粗提物萃取前后的活性跟踪第97-98页
     ·对纯化合物的 HIV-1 逆转录酶抑制活性的测定第98-100页
   ·小结第100-101页
第六章 结论第101-104页
作者简介及发表文章第104-105页
致谢第105页

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