| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一部分 文献综述与实验设计 | 第13-31页 |
| 第一章 锌指蛋白研究进展 | 第14-26页 |
| 1 前言 | 第14-15页 |
| 2 锌指蛋白的发现与命名 | 第15-16页 |
| 2．1 锌指蛋白的发现 | 第15-16页 |
| 2．2 锌指蛋白的命名 | 第16页 |
| 3 锌指蛋白的分类 | 第16-20页 |
| 4 锌指蛋白的分子生物学特征 | 第20-24页 |
| 4．1 识别DNA | 第20-22页 |
| 4．2 识别RNA | 第22-23页 |
| 4．3 与DNA：RNA杂交双链的作用 | 第23页 |
| 4．4 锌指之间的相互作用 | 第23-24页 |
| 5 锌指蛋白的生物学功能 | 第24-26页 |
| 5．1 调控与骨代谢相关基因的锌指转录因子 | 第24页 |
| 5．2 调控其他基因转录的锌指蛋白 | 第24-25页 |
| 5．3 锌指蛋白在基因治疗方面的应用 | 第25-26页 |
| 第二章 转录相关锌带蛋白基因ZNRD1 | 第26-29页 |
| 1 锌带结构基序在转录中起决定性作用 | 第26-27页 |
| 2 转录相关蛋白锌带基因ZNRD1 | 第27-28页 |
| 3 研究展望 | 第28-29页 |
| 第三章 实验设计方案 | 第29-31页 |
| 1 试验目的和意义 | 第29页 |
| 2 研究内容 | 第29-30页 |
| 3 实验流程图 | 第30-31页 |
| 第二部分 研究论文 | 第31-83页 |
| 第一章 全长基因cDNA的获得与序列分析 | 第32-43页 |
| 1 材料与试剂 | 第32-33页 |
| 1．1 材料 | 第32页 |
| 1．2 生物信息学工具 | 第32-33页 |
| 1．3 试剂 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-36页 |
| 2．1 基因序列的电子克隆与生物信息学分析 | 第33页 |
| 2．2 总RNA的提取与cDNA的合成 | 第33-34页 |
| 2．3 RT-PCR获得全长cDNA | 第34-36页 |
| 3 结果 | 第36-40页 |
| 3．1 家蚕蛹总RNA琼脂糖电泳检测 | 第36页 |
| 3．2 RT-PCR扩增全长基因片段 | 第36-37页 |
| 3．3 全长cDNA的生物信息学分析 | 第37-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 第二章 家蚕BmZNRD1基因的克隆 | 第43-51页 |
| 1．试剂与材料 | 第43-45页 |
| 1．1 材料 | 第43页 |
| 1．2 试剂的配制 | 第43-45页 |
| 2．方法 | 第45-49页 |
| 3．重组质粒的鉴定与测序结果 | 第49-50页 |
| 3．1 重组质粒pGEM-T-easy-BmZNRD1的PCR扩增和双酶切鉴定 | 第49-50页 |
| 3．2 序列测定 | 第50页 |
| 4．小结 | 第50-51页 |
| 第三章 重组表达质粒的构建及在大肠杆菌中诱导表达 | 第51-61页 |
| 1．材料与试剂 | 第51-52页 |
| 1．1 材料 | 第51页 |
| 1．2 试剂 | 第51页 |
| 1．3 试剂配制 | 第51-52页 |
| 2．方法 | 第52-56页 |
| 3．结果 | 第56-60页 |
| 3．1 重组表达质粒的构建策略 | 第56-58页 |
| 3．2 重组表达质粒的鉴定结果 | 第58页 |
| 3．3 BL21-pGFX-4T-1-BmZNRD1不同时间的诱导表达 | 第58-59页 |
| 3．4 BL21-pGEX-4T-1-BmZNRD1表达形式的确定 | 第59-60页 |
| 4．讨论 | 第60-61页 |
| 第四章 重组蛋白的纯化 | 第61-68页 |
| 1．试剂和材料 | 第61-63页 |
| 1．1 材料 | 第61页 |
| 1．2 试剂配制 | 第61-63页 |
| 2．方法 | 第63-64页 |
| 2．1 包涵体的溶解与复性 | 第63-64页 |
| 2．2 GST亲和柱层析 | 第64页 |
| 2．3 Bradford检测方法 | 第64页 |
| 3．表达产物的纯化结果 | 第64-65页 |
| 4．讨论 | 第65-68页 |
| 第五章 多克隆抗体制备及效价测定 | 第68-77页 |
| 1．试剂与材料 | 第68-70页 |
| 2．方法 | 第70-73页 |
| 2．1 抗体制备 | 第70-71页 |
| 2．2 抗体的效价测定(ELISA) | 第71-72页 |
| 2．3 融合蛋白的Western blotting鉴定 | 第72-73页 |
| 3．结果 | 第73-75页 |
| 3．1 抗体制备与纯化 | 第73-74页 |
| 3．2 抗体的效价测定 | 第74-75页 |
| 3．3 Western blotting检测 | 第75页 |
| 4．讨论 | 第75-77页 |
| 第六章 蚕蛹中锌带蛋白的鉴定 | 第77-83页 |
| 1 试剂与材料 | 第77页 |
| 2 方法 | 第77-78页 |
| 2．1 蚕蛹蛋白提取 | 第77页 |
| 2．2 ELISA检测 | 第77页 |
| 2．3 蚕蛹中锌带蛋白的获得 | 第77-78页 |
| 2．4 Western-blotting检测 | 第78页 |
| 3 结果 | 第78-81页 |
| 3．1 ELISA半定量法测蚕蛹中锌带蛋白的含量 | 第78-81页 |
| 3．2 Western-blotting分析结果 | 第81页 |
| 4 讨论 | 第81-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-91页 |
| 在学期间发表的论文 | 第91页 |
