独创性声明 | 第1页 |
关于学位论文使用授权的说明 | 第2-3页 |
中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-7页 |
引言 | 第7-9页 |
文献综述 | 第9-25页 |
1 鸡传染性法氏囊病的研究概况 | 第9-22页 |
·临床病理学 | 第10-11页 |
·病原学 | 第11-16页 |
·免疫学 | 第16-17页 |
·主要结构功能蛋白生物学特性 | 第17-19页 |
·鸡传染性法氏囊病的预防与控制 | 第19-22页 |
2 单克隆抗体技术 | 第22-25页 |
·单克隆抗体的研究进展 | 第22-23页 |
·单克隆抗体技术在IBDV上的应用 | 第23-25页 |
研究报告 | 第25-60页 |
研究报告(一):抗鸡传染性法氏囊VP2单克隆抗体的制备及抗原表位初步分析 | 第25-49页 |
第一节 材料与方法 | 第25-37页 |
·试验材料(具体见参考附录) | 第25页 |
·种毒与抗原 | 第25页 |
·动物与细胞系 | 第25页 |
·主要试剂及仪器 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-37页 |
·免疫原的制备及纯化 | 第25-26页 |
·动物免疫 | 第26页 |
·间接ELISA检测方法的建立 | 第26-27页 |
·血清效价的测定 | 第27页 |
·单克隆抗体的制备 | 第27-32页 |
·单克隆抗体的纯化(辛酸-饱和硫酸铵法) | 第32页 |
·McAb鉴定 | 第32-35页 |
·McAb对应抗原结构蛋白的定位分析 | 第35-36页 |
·两株McAb对应的抗原表位结合位点分析 | 第36-37页 |
第二节 实验结果 | 第37-46页 |
·抗原的纯化 | 第37页 |
·ELISA筛选方法的建立 | 第37页 |
·动物免疫水平效价的检测 | 第37-38页 |
·细胞融合与筛选 | 第38-39页 |
·McAb特异性鉴定 | 第39页 |
·单克隆抗体效价的测定 | 第39-40页 |
·单克隆抗体免疫球蛋白亚类的鉴定 | 第40页 |
·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第40-41页 |
·杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性测试 | 第41页 |
·中和实验 | 第41-43页 |
·疫荧光试验鉴定结果 | 第43-45页 |
·单克隆抗体的纯化及浓度的测定 | 第45页 |
·两株McAb针对的抗原表位初步分析 | 第45-46页 |
·8株单抗的免疫印迹结果 | 第46页 |
第三节 讨论 | 第46-49页 |
·免疫程序及方法的调试 | 第46页 |
·杂交瘤细胞驯化及培养 | 第46-47页 |
·抗原表位初步分析 | 第47页 |
·中和性单抗的应用分析 | 第47-48页 |
·McAb的临床应用分析 | 第48-49页 |
研究报告(二):抗IBDV VP3单克隆抗体的制备及抗原表位初步分析 | 第49-60页 |
第一节 材料和方法 | 第49-54页 |
·试验材料 | 第49-51页 |
·免疫原、病毒株 | 第49页 |
·主要试验动物与细胞系 | 第49页 |
·主要试剂及仪器 | 第49页 |
·主要菌种及质粒 | 第49-50页 |
·VP3蛋白引物的设计及合成 | 第50页 |
·VP3表位预测 | 第50-51页 |
·试验方法 | 第51-54页 |
·免疫原制备及鉴定 | 第51页 |
·分泌抗IBDV VP3单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第51-52页 |
·McAb特性鉴定 | 第52页 |
·杂交瘤细胞稳定性试验 | 第52页 |
·McAb对应抗原表位分析 | 第52-54页 |
第二节 实验结果 | 第54-58页 |
·免疫原的表达及鉴定 | 第54-55页 |
·分泌抗IBDV VP3单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第55页 |
·McAb特异性鉴定结果 | 第55页 |
·McAb的交叉反应性试验结果 | 第55页 |
·单抗介导的免疫荧光试验鉴定结果 | 第55-56页 |
·McAb效价的测定 | 第56页 |
·单克隆抗体亚类的测定 | 第56页 |
·分泌抗体稳定性测定 | 第56-57页 |
·McAb对应抗原表位分析结果 | 第57-58页 |
·竞争抑制性试验 | 第57页 |
·分段表达的VP3蛋白 | 第57-58页 |
·McAb介导的肽扫描分析 | 第58页 |
第三节 讨论 | 第58-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
附录 | 第65-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简介 | 第71页 |