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黄瓜热激因子结合蛋白1(CsHSBP1)基因的克隆与功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
第一章 文献综述第11-20页
   ·黄瓜生物学研究进展第11-12页
     ·黄瓜的起源与分布第11-12页
     ·黄瓜的生物学特性第12页
     ·高温胁迫对黄瓜体内蛋白的影响第12页
   ·热激蛋白相关因子研究进展第12-17页
     ·Hsp70第13-14页
     ·热激元件(HSE)第14页
     ·热激因子(HSF)第14-16页
     ·热激因子结合蛋白(HSBP)第16-17页
   ·相关PCR技术第17-20页
     ·巢式PCR第17页
     ·Cassette PCR第17-18页
     ·RT-PCR第18-20页
第二章 引言第20-22页
第三章 材料与方法第22-39页
   ·材料第22-24页
     ·cDNA文库材料第22页
     ·植物材料第22页
     ·载体与菌株第22页
     ·分子生物学试剂第22页
     ·pMD18-T质粒载体图谱第22-23页
     ·部分试剂配置第23-24页
   ·主要仪器第24-25页
   ·实验方法第25-39页
     ·cDNA文库质量检测、插入片段分析、原始文库的扩增与保存第25-26页
     ·CsHSBP1基因克隆第26-28页
     ·CsHSBP1基因编码区片段巢式PCR扩增第28页
     ·PCR产物纯化第28-29页
     ·平端加"A"第29页
     ·目标片段回收第29页
     ·连接第29-30页
     ·大肠杆菌DH5a菌株感受态的制备(冷CaCl_2法)第30页
     ·转化第30页
     ·Clony PCR检测第30页
     ·质粒提取、质粒PCR检测第30-31页
     ·探针制备第31-33页
     ·Southern杂交第33-36页
     ·CsHSBP1基因表达特性分析第36-39页
第四章 结果与分析第39-50页
   ·CsHSBP1基因全长cDNA克隆及其编码区亚克隆第39-40页
     ·CsHSBP1基因克隆PCR检测第39页
     ·CsHSBP1基因编码区片段PCR扩增第39-40页
     ·CsHSBP1基因编码区Clony PCR检测第40页
     ·质粒提取及质粒PCR鉴定第40页
   ·CsHSBP1基因及其推导氨基酸序列的同源性分析第40-43页
   ·CsHSBP1基因及其编码蛋白的结构分析第43-47页
     ·CsHSBP1基因结构及酶切位点分析第43-44页
     ·CsHSBP1蛋白二级结构预测第44-46页
     ·CsHSBP1蛋白理化性质预测第46页
     ·CsHSBP1蛋白高级结构预测第46-47页
   ·Southern杂交第47-49页
     ·探针浓度检测第47页
     ·基因组DNA提取第47-48页
     ·酶切效果检测第48页
     ·Southern杂交检测第48-49页
   ·RT-PCR分析第49-50页
     ·黄瓜总RNA提取第49页
     ·RT-PCR表达特性分析第49-50页
第五章 讨论第50-52页
第六章 结论第52-54页
   ·CsHSBP1基因克隆第52页
   ·CsHSBP1基因及其推导氨基酸序列的同源性分析第52页
   ·CsHSBP1基因及其编码蛋白质的结构分析第52页
   ·CsHSBP1基因基因组拷贝数分析第52-53页
   ·CsHSBP1基因表达特性分析第53-54页
参考文献第54-60页
缩写词第60-61页
致谢第61-62页
发表论文第62页

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