摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
1. 引言 | 第9-22页 |
·拟南芥的生物学特征 | 第9-11页 |
·拟南芥花药发育的过程 | 第11-12页 |
·各类转录因子在花药发育过程中的作用 | 第12-15页 |
·植物启动子研究分析 | 第15-16页 |
·绒毡层早期分化的相关基因的研究 | 第16-19页 |
·原核表达技术概论 | 第19-20页 |
·多克隆抗体制备技术 | 第20页 |
·本研究的研究价值和主要内容 | 第20-22页 |
2. 材料与方法 | 第22-32页 |
·材料 | 第22-24页 |
·所用植物 | 第22页 |
·菌株及质粒 | 第22页 |
·酶类与试剂 | 第22-23页 |
·使用仪器 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-32页 |
·拟南芥的培育 | 第24页 |
·DYT1 启动子缺失片段与GUS 基因融合表达载体的构建 | 第24-25页 |
·E.coli(DH5α)感受态的制备 | 第25-26页 |
·大肠杆菌的热激转化法 | 第26页 |
·碱裂解小量制备质粒DNA | 第26-27页 |
·转基因拟南芥株系的获取 | 第27页 |
·GUS 组织化学的鉴定 | 第27-28页 |
·DYT1 CDS 片段的克隆 | 第28页 |
·原核表达载体DYT1-pET32a 的构建 | 第28-29页 |
·DYT1 在E.coli BL21(DE3)中的蛋白诱导表达与溶解性分析 | 第29页 |
·抗原的制备 | 第29-30页 |
·免疫抗体的制备 | 第30页 |
·兔抗血清纯化 | 第30页 |
·制备抗体的体外验证分析 | 第30-31页 |
·ELISA 测定制备抗体的效价 | 第31-32页 |
3. 结果 | 第32-42页 |
·DYT1 启动子顺式元件的分析 | 第32-33页 |
·DYT1 启动子-550 至-463 区域内具一些在绒毡层早期发育起调控作用的顺式元件 | 第33-34页 |
·550bpDYT1 启动子驱动GUS 表达与DYT1 的时空表达一致 | 第34-35页 |
·具有ACGT 和 GTGA 基序的启动子核心区域顺势元件决定了DYT1 的表达 | 第35-37页 |
·DYT1 原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第38-39页 |
·诱导可溶蛋白分析 | 第39-40页 |
·多克隆抗体的体外验证 | 第40页 |
·多克隆抗体效价的分析 | 第40-42页 |
4. 讨论 | 第42-46页 |
·DYT1 启动子的剖析 | 第42-43页 |
·DYT1 在花药发育基因调控网中的作用 | 第43-44页 |
·DYT1 时空表达调控的研究 | 第44页 |
·原核表达系统的研究 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
发表文章 | 第54页 |