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拟南芥转录因子DYT1的功能分析

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
1. 引言第9-22页
   ·拟南芥的生物学特征第9-11页
   ·拟南芥花药发育的过程第11-12页
   ·各类转录因子在花药发育过程中的作用第12-15页
   ·植物启动子研究分析第15-16页
   ·绒毡层早期分化的相关基因的研究第16-19页
   ·原核表达技术概论第19-20页
   ·多克隆抗体制备技术第20页
   ·本研究的研究价值和主要内容第20-22页
2. 材料与方法第22-32页
   ·材料第22-24页
     ·所用植物第22页
     ·菌株及质粒第22页
     ·酶类与试剂第22-23页
     ·使用仪器第23-24页
   ·方法第24-32页
     ·拟南芥的培育第24页
     ·DYT1 启动子缺失片段与GUS 基因融合表达载体的构建第24-25页
     ·E.coli(DH5α)感受态的制备第25-26页
     ·大肠杆菌的热激转化法第26页
     ·碱裂解小量制备质粒DNA第26-27页
     ·转基因拟南芥株系的获取第27页
     ·GUS 组织化学的鉴定第27-28页
     ·DYT1 CDS 片段的克隆第28页
     ·原核表达载体DYT1-pET32a 的构建第28-29页
     ·DYT1 在E.coli BL21(DE3)中的蛋白诱导表达与溶解性分析第29页
     ·抗原的制备第29-30页
     ·免疫抗体的制备第30页
     ·兔抗血清纯化第30页
     ·制备抗体的体外验证分析第30-31页
     ·ELISA 测定制备抗体的效价第31-32页
3. 结果第32-42页
   ·DYT1 启动子顺式元件的分析第32-33页
   ·DYT1 启动子-550 至-463 区域内具一些在绒毡层早期发育起调控作用的顺式元件第33-34页
   ·550bpDYT1 启动子驱动GUS 表达与DYT1 的时空表达一致第34-35页
   ·具有ACGT 和 GTGA 基序的启动子核心区域顺势元件决定了DYT1 的表达第35-37页
   ·DYT1 原核表达载体的构建第37-38页
   ·重组蛋白的诱导表达第38-39页
   ·诱导可溶蛋白分析第39-40页
   ·多克隆抗体的体外验证第40页
   ·多克隆抗体效价的分析第40-42页
4. 讨论第42-46页
   ·DYT1 启动子的剖析第42-43页
   ·DYT1 在花药发育基因调控网中的作用第43-44页
   ·DYT1 时空表达调控的研究第44页
   ·原核表达系统的研究第44-46页
参考文献第46-53页
致谢第53-54页
发表文章第54页

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