中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
前言 | 第14-15页 |
第一部分 文献综述植物雄性不育机理研究进展 | 第15-49页 |
1.植物雄性不育的类型及遗传机制研究 | 第15-18页 |
1.1 植物雄性不育的类型 | 第15页 |
1.2 植物雄性不育的遗传机制 | 第15-18页 |
2.植物雄性不育的细胞学研究进展 | 第18-21页 |
2.1 植物雄性不育的花药特征 | 第19页 |
2.2 植物雄性不育的细胞学特征 | 第19-20页 |
2.3 植物雄性不育的超微结构特征 | 第20-21页 |
3.植物雄性不育的生理生化研究进展 | 第21-25页 |
3.1 物质代谢与雄性不育 | 第21页 |
3.2 能量代谢与雄性不育 | 第21-22页 |
3.3 活性氧代谢与雄性不育 | 第22页 |
3.4 植物激素与雄性不育 | 第22-25页 |
4.植物雄性不育基因的分子标记研究进展 | 第25-31页 |
4.1 分子标记的类型及其特点 | 第25-27页 |
4.2 分子标记在作物雄性不育研究上的应用 | 第27-31页 |
4.3 展望 | 第31页 |
5.植物细胞核雄性不育基因的研究进展 | 第31-35页 |
5.1 绒毡层特异表达的细胞核雄性不育基因 | 第32-34页 |
5.2 在小孢子母细胞减数分裂过程中表达的核雄性不育基因 | 第34-35页 |
6.mRNA差别显示技术研究进展 | 第35-39页 |
6.1 DDRT-PCR的基本原理及过程 | 第35-37页 |
6.2 DDRT-PCR的优点及存在问题 | 第37页 |
6.3 DDRT-PCR方法的改进 | 第37-38页 |
6.4 DDRT-PCR技术应用 | 第38-39页 |
6.5 DDRT-PCR应用现状及展望 | 第39页 |
参考文献 | 第39-49页 |
第二部分 研究报告 | 第49-111页 |
第一章 西瓜雄性不育系的农艺性状及遗传分析 | 第49-55页 |
1.材料与方法 | 第49-50页 |
1.1 材料 | 第49-50页 |
1.2 方法 | 第50页 |
1.2.1 农艺性状观测 | 第50页 |
1.2.2 花药的扫描电镜观测 | 第50页 |
1.2.3 不育性状的遗传检验 | 第50页 |
2.结果与分析 | 第50-51页 |
2.1 不育株与可育株农艺性状比较 | 第50页 |
2.2 不育与可育花药的扫描电镜比较观测 | 第50页 |
2.3 不育性状的遗传分析 | 第50-51页 |
3.讨论 | 第51-52页 |
3.1 西瓜G17AB雄性不育的遗传特性及产生原因 | 第51-52页 |
3.2 不同西瓜雄性不育材料育性基因之间的关系 | 第52页 |
3.3 西瓜G17AB雄性不育系的研究和应用价值 | 第52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
第二章 西瓜G17AB雄性不育花药的细胞学及超微结构研究 | 第55-67页 |
第一节 西瓜G17AB雄性不育花药的细胞学及组织化学研究 | 第55-61页 |
1.材料与方法 | 第55-56页 |
1.1 材料 | 第55页 |
1.2 方法 | 第55-56页 |
2 结果与分析 | 第56-57页 |
2.1 细胞形态学对比观察 | 第56-57页 |
2.1.1 造孢细胞时期 | 第56页 |
2.1.2 花粉母细胞时期 | 第56页 |
2.1.3 花粉母细胞减数分裂期 | 第56页 |
2.1.4 小孢子发育期 | 第56-57页 |
2.2 组织化学对比分析 | 第57页 |
2.2.1 不溶性多糖的变化 | 第57页 |
2.2.2 蛋白质的变化 | 第57页 |
3.讨论 | 第57-58页 |
3.1 西瓜G17AB雄性不育的败育时期和方式 | 第57-58页 |
3.2 西瓜花药绒毡层细胞异常与雄性不育的关系 | 第58页 |
3.3 花药组织中不溶性多糖和蛋白质含量的变化与雄性不育的关系 | 第58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
第二节 西瓜G17AB雄性不育系花药发育超微结构研究 | 第61-67页 |
1.材料和方法 | 第61-62页 |
1.1 材料 | 第61页 |
1.2 方法 | 第61-62页 |
2.结果与分析 | 第62页 |
2.1 不育花药与可育花药药壁组织细胞的超微结构比较 | 第62页 |
2.2 不育小孢子与可育小孢子发育的超微结构比较 | 第62页 |
3.讨论 | 第62-63页 |
3.1 绒毡层分化异常与雄性不育的关系 | 第62-63页 |
3.2 小孢子发育过程中的液泡化与雄性不育的关系 | 第63页 |
3.3 细胞器的差异与不育的关系 | 第63页 |
参考文献 | 第63-67页 |
第三章 西瓜细胞核雄性不育系生理生化特性分析 | 第67-82页 |
1 材料与方法 | 第68-70页 |
1.1 材料 | 第68页 |
1.2 方法 | 第68-70页 |
1.2.1 生理生化指标测定 | 第68页 |
1.2.2 同工酶电泳 | 第68-69页 |
1.2.3 可溶性蛋白SDS-PAGE凝胶电泳分析 | 第69-70页 |
1.2.4 内源激素含量测定 | 第70页 |
1.2.5 自由多胺含量测定 | 第70页 |
2.结果与分析 | 第70-75页 |
2.1 同工酶分析 | 第70-71页 |
2.2 可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析 | 第71-72页 |
2.3 多胺含量的变化 | 第72-73页 |
2.4 激素含量分析 | 第73-74页 |
2.5 其它生理生化指标的分析 | 第74-75页 |
3 讨论 | 第75-78页 |
参考文献 | 第78-82页 |
第四章 西瓜细胞核雄性不育育性基因的分子标记 | 第82-101页 |
第一节 西瓜RAPD-PCR体系的优化及核雄性不育育性基因的标记 | 第82-84页 |
1.1 材料及来源 | 第82页 |
1.2 试剂和仪器 | 第82-83页 |
1.3 基因组DNA的提取 | 第83页 |
1.4 PCR反应体系的优化试验设计 | 第83-84页 |
1.4.1 RAPD-PCR体系正交优化方案 | 第83页 |
1.4.2 模板DNA浓度的筛选 | 第83-84页 |
1.4.3 退火温度及反应循环次数的确定 | 第84页 |
1.5 育性基因分子标记 | 第84页 |
1.5.1 不育池和可育池的构建 | 第84页 |
1.5.2 引物筛选 | 第84页 |
1.5.3 遗传分析 | 第84页 |
2 结果与分析 | 第84-87页 |
2.1 RAPD反应体系的正交优化 | 第84-85页 |
2.2 不同模板DNA浓度对扩增效果的影响 | 第85页 |
2.3 不同退火温度及循环次数对PCR扩增影响 | 第85-86页 |
2.4 育性基因分子标记的结果 | 第86页 |
2.5 雄性不育分离群体的分析 | 第86-87页 |
3 讨论 | 第87-89页 |
3.1 采用正交实验设计优化RAPD-PCR体系的可行性 | 第87页 |
3.2 西瓜雄性不育基因的标记研究 | 第87页 |
3.3 RAPD标记的可靠性 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-89页 |
第二节 西瓜核雄性不育AFLP标记及序列分析 | 第89-100页 |
1 材料和方法 | 第89-96页 |
1.1 材料 | 第90页 |
1.2 方法 | 第90-96页 |
1.2.1 DNA的提取 | 第90-91页 |
1.2.2 AFLP反应 | 第91-93页 |
1.2.3 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第93页 |
1.2.4 银染显色 | 第93-94页 |
1.2.5 差异条带的回收 | 第94页 |
1.2.6 差异条带的回收、重扩增及纯化 | 第94页 |
1.2.7 差异条带的分子克隆 | 第94-96页 |
1.2.8 Southern点杂交 | 第96页 |
1.2.9 DNA序列分析 | 第96页 |
2 结果与分析 | 第96-99页 |
2.1 基因组DNA的提取与纯化 | 第96页 |
2.2 酶切连接和预扩增结果分析 | 第96-97页 |
2.3 AFLP引物的筛选 | 第97-98页 |
2.4 F_(1/6)和F_(3/3)特异片断的克隆测序 | 第98页 |
2.5 Southern点杂交验证 | 第98-99页 |
2.6 序列分析 | 第99页 |
3.讨论 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-101页 |
第五章 西瓜细胞核雄性不育系雄花蕾的mRNA差异表达分析 | 第101-111页 |
1 材料和方法 | 第102-105页 |
1.1 材料 | 第102页 |
1.1.1 植物材料 | 第102页 |
1.1.2 菌株及质粒 | 第102页 |
1.1.3 主要试剂及酶类 | 第102页 |
1.2 方法 | 第102-105页 |
1.2.1 西瓜雄花蕾总RNA的提取 | 第102-103页 |
1.2.2 反转录PCR(RT-PCR) | 第103-105页 |
1.2.3 电泳及染色 | 第105页 |
1.2.4 差异cDNA条带的回收、重新扩增和纯化 | 第105页 |
1.2.5 差异cDNA条带的克隆、鉴定和测序 | 第105页 |
1.2.6 差异条带的序列分析 | 第105页 |
2.结果与分析 | 第105-108页 |
2.1 西瓜雄性不育系RNA的检测 | 第105-106页 |
2.2 混合取样的科学性分析 | 第106-107页 |
2.3 可育与不育雄花蕾的差别cDNA条带的筛选 | 第107-108页 |
2.4 差别cDNA片断的克隆及测序 | 第108页 |
2.5 差别cDNA片断序列同源性对比分析 | 第108页 |
3.讨论 | 第108-109页 |
参考文献 | 第109-111页 |
全文讨论 | 第111-114页 |
全文结论 | 第114-116页 |
附录 | 第116-117页 |
致谢 | 第117页 |