| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-24页 |
| 第二章 壳聚糖酶产生菌株的筛选和复合式诱变 | 第24-31页 |
| 1 实验材料与设备 | 第24-25页 |
| 1．1 菌种来源 | 第24页 |
| 1．2 仪器与试剂 | 第24-25页 |
| 1．2．1 仪器 | 第24-25页 |
| 1．2．2 试剂 | 第25页 |
| 1．2．3 培养基 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2．1 筛菌 | 第25页 |
| 2．2 壳聚糖酶活力的测定 | 第25-26页 |
| 2．2．1 DNS标准曲线的制作 | 第25-26页 |
| 2．2．2 测定壳聚糖酶活力 | 第26页 |
| 2．3 诱变方法 | 第26-27页 |
| 2．3．1 孢子悬浮液的制备 | 第26-27页 |
| 2．3．2 紫外诱变处理 | 第27页 |
| 2．3．3 NTG诱变处理 | 第27页 |
| 2．3．4 紫外线、NTG复合处理 | 第27页 |
| 3 实验结果 | 第27-29页 |
| 3．1 筛菌结果 | 第27页 |
| 3．2 诱变结果 | 第27-29页 |
| 3．2．1 紫外存活曲线的绘制 | 第27-28页 |
| 3．2．2 紫外诱变后产酶菌株的筛选 | 第28页 |
| 3．2．3 NTG诱变后产酶菌株的筛选 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 4．1 关于筛菌的讨论 | 第29页 |
| 4．2 壳聚糖酶活力测定的讨论 | 第29-30页 |
| 4．3 复合诱变的讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 菌株H1产壳聚糖酶发酵条件的研究 | 第31-41页 |
| 1 实验材料与设备 | 第31-32页 |
| 1．1 菌种来源 | 第31页 |
| 1．2 仪器与试剂 | 第31-32页 |
| 1．2．1 仪器 | 第31页 |
| 1．2．2 试剂 | 第31页 |
| 1．2．3 培养基 | 第31-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-33页 |
| 2．1 测定壳聚糖酶活力 | 第32页 |
| 2．2 产酶条件研究 | 第32-33页 |
| 2．2．1 最适氮源实验 | 第32页 |
| 2．2．2 最适碳源实验 | 第32页 |
| 2．2．3 最适起始pH值实验 | 第32页 |
| 2．2．4 最适培养温度实验 | 第32-33页 |
| 2．2．5 最适发酵时间实验 | 第33页 |
| 2．2．6 最适接种量实验 | 第33页 |
| 2．2．7 最适通气量实验 | 第33页 |
| 2．2．8 壳聚糖分子量对产酶的影响 | 第33页 |
| 2．2．9 胞内酶活力的测定 | 第33页 |
| 3 实验结果 | 第33-39页 |
| 3．1 氮源实验 | 第33-34页 |
| 3．2 碳源实验 | 第34-35页 |
| 3．3 培养基最适起始pH值实验 | 第35页 |
| 3．4 最适培养温度实验 | 第35-36页 |
| 3．5 最适发酵时间实验 | 第36-37页 |
| 3．6 最适接种量实验 | 第37页 |
| 3．7 最适通气量实验 | 第37-38页 |
| 3．8 壳聚糖分子量对产酶的影响 | 第38-39页 |
| 3．9 胞内酶活力的测定 | 第39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 壳聚糖酶的分离纯化与性质初步研究 | 第41-58页 |
| 1 实验材料与设备 | 第41-43页 |
| 1．1 菌种来源 | 第41页 |
| 1．2 仪器与试剂 | 第41-43页 |
| 1．2．1 仪器 | 第41-42页 |
| 1．2．2 试剂 | 第42页 |
| 1．2．3 发酵培养基 | 第42-43页 |
| 2 实验方法 | 第43-47页 |
| 2．1 H1菌株的发酵培养 | 第43页 |
| 2．2 壳聚糖粗酶的制取 | 第43页 |
| 2．2．1 (NH_4)_2SO_4分级盐析 | 第43页 |
| 2．2．1．1 (NH_4)_2SO_4分级盐析曲线的绘制 | 第43页 |
| 2．2．1．2 (NH_4)_2SO_4分级盐析 | 第43页 |
| 2．2．2 粗酶的超滤及冷冻干燥 | 第43页 |
| 2．3 壳聚糖粗酶的纯化 | 第43-44页 |
| 2．3．1 Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析 | 第43-44页 |
| 2．3．2 Sephadex G-75凝胶过滤层析 | 第44页 |
| 2．4 壳聚糖酶纯度分析及电泳技术测定分子量 | 第44-45页 |
| 2．4．1 Bradford法测定蛋白质的浓度 | 第44-45页 |
| 2．4．1．1 考马斯亮蓝试剂 | 第44页 |
| 2．4．1．2 标准蛋白质溶液 | 第44页 |
| 2．4．1．3 标准曲线的制作 | 第44-45页 |
| 2．4．1．4 样品蛋白质浓度测定 | 第45页 |
| 2．4．2 电泳测定分子量 | 第45页 |
| 2．5 壳聚糖理化性质的研究 | 第45-47页 |
| 2．5．1 温度对酶反应活性的影响 | 第46页 |
| 2．5．2 pH值对酶反应活性的影响 | 第46页 |
| 2．5．3 不同底物对酶反应活性的影响 | 第46页 |
| 2．5．4 不同分子量的壳聚糖作为底物对酶反应活性的影响 | 第46页 |
| 2．5．5 不同底物浓度对酶反应活性的影响 | 第46-47页 |
| 2．5．6 其他离子对酶反应活性的影响 | 第47页 |
| 3 实验结果 | 第47-55页 |
| 3．1 壳聚糖粗酶的制取 | 第47-48页 |
| 3．1．1 (NH_4)_2SO_4分级盐析 | 第47-48页 |
| 3．1．1．1 (NH_4)_2SO_4分级盐析曲线的绘制 | 第47-48页 |
| 3．1．1．2 (NH_4)_2SO_4分级盐析 | 第48页 |
| 3．1．2 超滤脱盐并冷冻干燥 | 第48页 |
| 3．2 壳聚糖粗酶的纯化 | 第48-50页 |
| 3．2．1 Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析 | 第48-49页 |
| 3．2．2 Sephadex G-75凝胶过滤层析 | 第49页 |
| 3．2．3 壳聚糖粗酶的纯化结果 | 第49-50页 |
| 3．3 蛋白质纯度鉴定及分子量测定 | 第50-51页 |
| 3．4 壳聚糖酶理化性质的研究 | 第51-55页 |
| 3．4．1 温度对酶反应活性的影响 | 第51-52页 |
| 3．4．2 pH值对酶反应活性的影响 | 第52-53页 |
| 3．4．3 不同底物对酶反应活性的影响 | 第53页 |
| 3．4．4 不同分子量的壳聚糖作为底物对酶反应活性的影响 | 第53-54页 |
| 3．4．5 不同底物浓度对酶反应活性的影响 | 第54-55页 |
| 3．4．6 其他离子对酶反应活性的影响 | 第55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 4．1 壳聚糖粗酶的制备 | 第55-56页 |
| 4．2 壳聚糖粗酶的纯化 | 第56页 |
| 4．3 壳聚糖酶的理化性质 | 第56-58页 |
| 结语 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
