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芽孢杆菌amyF基因的克隆、表达、产物纯化及其生物学活性研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-7页
1.前言第7-16页
   ·抗性淀粉的分类第7页
   ·抗性淀粉的化学特性和颗粒结构第7-8页
   ·抗性淀粉的生理学特性及生理功能第8-12页
     ·抗性淀粉的生理学特性第8-9页
     ·抗性淀粉的生理功能第9-12页
   ·抗性淀粉的应用第12-13页
   ·其它的不消化性碳水化合物第13页
   ·淀粉酶等酶制剂及其在饲料中的应用第13-16页
2.材料和方法第16-38页
   ·材料第16-22页
     ·菌株、质粒第16页
     ·试验动物第16页
     ·主要分子生物学试剂和化学试剂第16-17页
     ·分离纯化材料第17页
     ·试验大鼠饲料配制第17页
     ·常用液体及培养基的配制第17-21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·方法第22-38页
     ·芽孢杆菌amyF基因的克隆和在大肠杆菌中的表达第22-30页
     ·芽孢杆菌amyF基因表达产物分离纯化及其酶活性鉴定第30-31页
     ·淀粉酶AmyF的酶学性质第31-33页
     ·抗性淀粉对大鼠肠道中利用淀粉菌群的影响第33-38页
3.结果第38-60页
   ·芽孢杆菌amyF基因的克隆和在大肠杆菌中的表达第38-42页
     ·amyF基因表达载体的构建第38-41页
     ·amyF基因的诱导表达第41-42页
   ·芽孢杆菌amyF基因表达产物分离纯化及其酶活性鉴定第42-43页
     ·淀粉酶酶活性鉴定第42页
     ·淀粉酶AmyF的纯化第42-43页
   ·淀粉酶AmyF的酶学性质第43-50页
     ·牛血清白蛋白(BSA)的标准曲线第43页
     ·温度对AmyF的活性的影响第43-44页
     ·pH对酶活性的影响第44-45页
     ·化学试剂对酶活的影响第45-46页
     ·酶的水解性质第46-49页
     ·酶对不同淀粉底物的Km值第49-50页
   ·抗性淀粉对大鼠肠道中利用淀粉菌群的影响第50-60页
     ·不同RS_2摄入水平对大鼠肠粘膜屏障结构的影响第51-52页
     ·不同RS_2摄入水平对大鼠盲肠内容物pH的影响第52-53页
     ·不同RS_2摄入水平对大鼠盲肠内容物氨含量的影响第53-54页
     ·体外发酵培养试验淀粉酶、还原糖含量和利用淀粉的菌总数比较第54-60页
4 讨论第60-67页
   ·芽孢杆菌amyF基因的克隆和在大肠杆菌中的表达第60-62页
   ·芽孢杆菌amyF基因表达产物分离纯化及其酶活性鉴定第62-65页
   ·淀粉酶AmyF的酶学性质第65页
   ·抗性淀粉对大鼠肠道中利用淀粉菌群的影响第65-67页
5 结论第67-68页
6 参考文献第68-74页
致谢第74-75页
附录1 amyF基因序列第75-77页
附录2 质粒构建图第77-78页
攻读学位期间发表的学术论文目录第78页

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