英文缩写词 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
前言 | 第13-17页 |
第一部分 三株不同转移潜能肝癌细胞株差异蛋白质的二维液相色谱分离及质谱鉴定 | 第17-55页 |
研究背景 | 第17-21页 |
实验材料 | 第21-24页 |
1 、 仪器 | 第21-22页 |
2 、 试剂 | 第22-23页 |
3 、 试剂配制 | 第23页 |
4 、 细胞系 | 第23-24页 |
实验方法 | 第24-28页 |
1 、 细胞培养 | 第24页 |
2 、 样品制备 | 第24-25页 |
3 、 一维色谱聚焦分析 | 第25-26页 |
4 、 二维反相HPLC色谱分析 | 第26-27页 |
5 、 三株肝癌细胞株蛋白质组差异的比较 | 第27页 |
6 、 样品的酶解和MALDI-TOF质谱条件 | 第27-28页 |
7 、 数据库检索 | 第28页 |
8 、 间接免疫荧光法鉴定部分差异蛋白 | 第28页 |
结果与讨论 | 第28-53页 |
1 、 样品制备 | 第29-31页 |
2 、 一维色谱聚焦结果 | 第31-34页 |
3 、 二维反相HPLC色谱分析结果 | 第34页 |
4 、 重复性问题 | 第34-37页 |
5 、 不同转移潜能的肝癌细胞株蛋白质组的差异分析和样品的收集 | 第37-42页 |
6 、 质谱结果和差异蛋白的功能讨论 | 第42-50页 |
7 、 数据库检索的策略 | 第50页 |
8 、 部分差异蛋白的免疫荧光鉴定结果 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-55页 |
第二部分 肝癌相关蛋白的兔单克隆抗体的筛选和鉴定 | 第55-67页 |
研究背景 | 第55-56页 |
实验材料 | 第56-57页 |
1 、 仪器 | 第56页 |
2 、 试剂 | 第56-57页 |
实验方法 | 第57-61页 |
1 、 肝癌组织混合抗原的制备 | 第57页 |
2 、 肝癌组织抗原免疫兔的步骤 | 第57页 |
3 、 融合细胞的观察和筛选 | 第57页 |
4 、 间接ELISA法筛选分泌抗体阳性的杂交瘤细胞 | 第57-58页 |
5 、 杂交瘤细胞的克隆化和冻存 | 第58页 |
6 、 混合杂交瘤上清的免疫荧光分析 | 第58页 |
7 、 Western-blot法筛选与L-02和MHCC97-H反应不同的克隆 | 第58-59页 |
8 、 HPCF一维分离组分的SDS-PAGE和Western blot筛选阳性克隆 | 第59-60页 |
9 、 将阳性条带对应的组分进行HPLC二维分离和Western blot | 第60页 |
10 、 阳性条带的质谱鉴定 | 第60-61页 |
结果和讨论 | 第61-67页 |
1 、 混合杂交瘤上清的免疫荧光分析结果 | 第62页 |
2 、 抗体阳性克隆的靶抗原的筛选 | 第62-65页 |
3 、 阳性条带的质谱结果 | 第65页 |
4、讨论 | 第65-67页 |
小结 | 第67-68页 |
综述 | 第68-81页 |
论文发表情况 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |