| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 1. 序言 | 第12-18页 |
| ·植原体病害研究 | 第12-15页 |
| ·植原体病害的发现及命名 | 第12页 |
| ·植原体的主要特征 | 第12-13页 |
| ·植原体病害的传播途径 | 第13页 |
| ·植原体病害的症状及危害 | 第13页 |
| ·植原体的分类鉴定依据 | 第13-14页 |
| ·根据生物学特性的分类 | 第13页 |
| ·根据16S rRNA和rp分组 | 第13-14页 |
| ·基于延伸因子tuf基因的分类 | 第14页 |
| ·基于Sec基因的分类 | 第14页 |
| ·植原体病害的检测方法 | 第14-15页 |
| ·植原体质粒研究 | 第15页 |
| ·植原体病害的防治 | 第15页 |
| ·长春花相关植原体病害研究进展 | 第15-16页 |
| ·长春花小叶病研究现状 | 第16页 |
| ·长春花黄化病研究现状 | 第16页 |
| ·长春花变叶病研究现状 | 第16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 2. 海南四种植原体病害病原的分子鉴定 | 第18-35页 |
| ·材料与方法 | 第18-24页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·样品的采集 | 第18页 |
| ·菌株和质粒 | 第18页 |
| ·生化及分子生物学试剂 | 第18页 |
| ·缓冲液及培养基配方 | 第18-19页 |
| ·主要实验仪器 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-24页 |
| ·植物总DNA提取 | 第20-21页 |
| ·植原体16S rDNA基因的PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·PCR产物的克隆及测序 | 第22-24页 |
| ·序列分析软件 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-34页 |
| ·辣椒小叶病病原分子鉴定 | 第24-25页 |
| ·辣椒小叶病的田间症状表现 | 第24-25页 |
| ·辣椒小叶病的PCR | 第25页 |
| ·胡椒黄化病病原分子鉴定 | 第25-27页 |
| ·胡椒黄化病的田间症状表现 | 第25-26页 |
| ·胡椒黄化病的PCR | 第26-27页 |
| ·假花生黄化病病原分子鉴定 | 第27-28页 |
| ·假花生黄化病的田间症状表现 | 第27页 |
| ·假花生黄化病的PCR | 第27-28页 |
| ·木薯丛枝病病原分子鉴定 | 第28-29页 |
| ·木薯丛枝病的田间表现 | 第28-29页 |
| ·木薯丛枝病PCR | 第29页 |
| ·序列分析 | 第29-30页 |
| ·构建系统进化树 | 第30页 |
| ·RFLP电子酶切图谱分析 | 第30-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| 3. 植原体质粒DNA克隆及其分子特征 | 第35-54页 |
| ·材料与方法 | 第35-39页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·样品的采集 | 第35页 |
| ·菌株和质粒 | 第35页 |
| ·生化及分子生物学试剂 | 第35页 |
| ·缓冲液及培养基配方 | 第35页 |
| ·主要实验仪器 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·植物总DNA提取 | 第35页 |
| ·植原体质粒的第一次PCR扩增 | 第35-36页 |
| ·植原体质粒的第二次PCR扩增 | 第36页 |
| ·PCR产物的克隆及测序 | 第36页 |
| ·序列分析 | 第36-37页 |
| ·pPLLHn-1ORF3基因的克隆 | 第37-38页 |
| ·pPLLHn-1ORF4基因的克隆 | 第38页 |
| ·pPLLHn-1ORF3表达载体的构建及验证 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-52页 |
| ·pPLLHn-1的克隆 | 第39页 |
| ·pPLLHn-1的序列特征 | 第39-40页 |
| ·pPLLHn-1编码的蛋白同源性比较 | 第40-41页 |
| ·pPLLHn-1编码的蛋白特征预测 | 第41-45页 |
| ·质粒编码蛋白跨膜结构预测 | 第41-42页 |
| ·质粒蛋白亚细胞定位预测 | 第42-45页 |
| ·质粒DNA全序列的系统进化分析 | 第45页 |
| ·植原体质粒的变异分析 | 第45-49页 |
| ·质粒数目的变异 | 第45-48页 |
| ·质粒编码的RepA基因的变异分析 | 第48页 |
| ·质粒编码的SSB基因的变异分析 | 第48-49页 |
| ·pPLLHn-1ORF3基因的克隆 | 第49-50页 |
| ·pPLLHn-1ORF4基因的克隆 | 第50页 |
| ·PBI121-pPLLHn1ORF3表达载体的构建及验证 | 第50-52页 |
| ·PBI121-pPLLHn1ORF3表达载体的酶切验证 | 第50-52页 |
| ·PBI121-pPLLHn1ORF3表达载体的PCR验证 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 4. 植原体secA与secY基因的克隆与分析 | 第54-64页 |
| ·材料与方法 | 第54-57页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·样品的采集 | 第54页 |
| ·菌株和质粒 | 第54页 |
| ·生化及分子生物学试剂 | 第54页 |
| ·缓冲液及培养基配方 | 第54页 |
| ·主要实验仪器 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-57页 |
| ·植物总DNA提取 | 第54页 |
| ·长春花小叶病植原体secY基因的PCR扩增 | 第54-55页 |
| ·长春花小叶病植原体secA基因的PCR扩增 | 第55页 |
| ·长春花黄化病植原体secY基因的PCR扩增 | 第55-56页 |
| ·长春花黄化病植原体secA基因的PCR扩增 | 第56页 |
| ·PCR产物的克隆及测序 | 第56-57页 |
| ·序列分析 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-63页 |
| ·长春花小叶病植原体secY基因和secA基因的克隆与序列分析 | 第57-60页 |
| ·长春花小叶病植原体secY基因的克隆与序列分析 | 第57-58页 |
| ·长春花小叶病植原体secA基因的克隆与序列分析 | 第58-59页 |
| ·长春花小叶病植原体secY基因的生物信息学分析 | 第59-60页 |
| ·长春花小叶病植原体secA基因的生物信息学分析 | 第60页 |
| ·长春花黄化病植原体secY基因和secA基因的克隆与序列分析 | 第60-63页 |
| ·长春花黄化病植原体secY基因的克隆与序列分析 | 第60-61页 |
| ·长春花黄化病植原体secA基因的克隆与序列分析 | 第61-62页 |
| ·长春花黄化病植原体secY基因的生物信息学分析 | 第62页 |
| ·长春花黄化病植原体secA基因的生物信息学分析 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| 5. 结论 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第66-67页 |
| 附录一 英文缩略表 | 第67-70页 |
| 附录二 23个疑似植原体病害样品的症状表现及采集地 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
