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中国野生葡萄APX基因遗传转化拟南芥的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 文献综述第10-24页
   ·植物基因功能研究方法第10-17页
     ·转移DNA 标签法第10-11页
     ·转座子标签法第11-12页
     ·反义RNA 技术的基因敲除第12页
     ·基因陷阱第12-13页
     ·化学诱变的新发展———TILLING 技术第13-14页
     ·RNA 干扰技术第14-17页
   ·抗坏血酸过氧化物酶第17-21页
     ·植物体中活性氧的产生及其清除第17页
     ·叶绿体中H_2O_2 的产生和清除以及抗坏血酸过氧化物酶的作用机制第17-19页
     ·抗坏血酸过氧化物酶的反应机制第19页
     ·抗坏血酸过氧化物酶的系统分布第19-20页
     ·抗坏血酸过氧化物酶的分子生物学研究第20-21页
   ·水杨酸与植物诱导抗病性第21-23页
     ·水杨酸生物合成途径第21页
     ·植物诱导抗病性第21-22页
     ·水杨酸介导的抗病信号转导途径第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
第二章 材料与方法第24-36页
   ·材料第24-26页
     ·模板与引物第24页
     ·植物材料第24页
     ·质粒和菌第24页
     ·酶与化学试剂第24-25页
     ·常用抗生素贮存液第25页
     ·培养基及缓冲液第25-26页
   ·方法第26-36页
     ·抗坏血酸过氧化物酶基因过量表达载体的构建第26-28页
     ·RNA 干扰载体的构建第28-31页
     ·重组质粒导入根癌农杆菌第31-32页
     ·花絮浸润法转化拟南芥第32页
     ·抗生素筛选第32页
     ·抗生素筛选的阳性植株PCR 检测第32-33页
     ·转化植株T_3 代筛选第33页
     ·转基因苗水杨酸处理前后转录水平表达量检测第33-36页
第三章 结果第36-44页
   ·中国野生葡萄抗坏血酸过氧化物酶基因过量表达载体的构建第36-38页
   ·中国野生葡萄APX 基因RNAI 载体构建第38-39页
     ·目的基因连接方向检测第38页
     ·PHellsgate8-APX 酶切检测第38页
     ·根癌农杆菌的转化及鉴定第38-39页
   ·花絮浸润法转化拟南芥第39-41页
     ·T_1 种子的抗性筛选第39-41页
     ·抗生素筛选阳性苗的PCR 检测第41页
   ·荧光定量PCR 检测转基因苗水杨酸处理前后转录水平相对表达量第41-43页
   ·盐胁迫对拟南芥生长的影响第43-44页
第四章 讨论第44-46页
   ·花絮浸润法转化拟南芥第44页
   ·水杨酸诱导抗坏血酸过氧化物酶基因表达第44-45页
   ·抗坏血酸过氧化物酶基因可以提高拟南芥抗盐胁迫能力第45-46页
第五章 结论第46-48页
   ·构建了中国野生葡萄抗坏血酸过氧化物酶基因的过量表达载体第46页
   ·构建了中国野生葡萄抗坏血酸过氧化物酶基因RNA 干扰载体第46页
   ·获得中国野生葡萄抗坏血酸过氧化物酶基因过量表达的拟南芥突变体第46页
   ·获得中国野生葡萄抗坏血酸过氧化物酶基因沉默的拟南芥突变体第46页
   ·水杨酸对中国野生葡萄抗坏血酸过氧化物酶基因具有诱导作用第46-47页
   ·中国野生葡萄抗坏血酸过氧化物酶基因可以提高拟南芥盐胁迫耐受力第47-48页
参考文献第48-54页
致谢第54-55页
作者简介第55页

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