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密码子优化和分子佐剂增强新城疫病毒F基因DNA疫苗免疫效果

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 引言第12-31页
   ·新城疫及新城疫病毒第12-19页
     ·新城疫概述第12-13页
     ·NDV 基本特征第13页
     ·NDV 的生物学活性第13-14页
     ·NDV 的基因组结构第14-15页
     ·NDV 的致病力的分子基础第15页
     ·新城疫疫苗研究进展第15-19页
   ·提高 DNA 疫苗免疫效果的策略第19-25页
     ·载体优化第20-21页
     ·抗原优化第21-22页
     ·合适的分子佐剂第22-24页
     ·优化接种方法和接种途径第24-25页
   ·分子佐剂 C3d 在免疫应答中的作用及作用机制第25-27页
   ·IL-2 作为免疫佐剂的应用第27-29页
   ·本研究的目的和意义第29-31页
第二章 密码子优化增强 NDV F 基因 DNA 疫苗的免疫效果第31-45页
   ·材料第31-32页
     ·质粒载体、细菌、病毒与细胞第31页
     ·主要试剂和仪器第31-32页
     ·SPF 鸡胚和 SPF 鸡第32页
   ·方法第32-35页
     ·F 基因密码子优化第32页
     ·优化后 F 基因真核表达载体的构建第32页
     ·质粒 DNA 的制备第32-33页
     ·重组质粒的体外表达鉴定第33-34页
     ·免疫鸡血清特异性 IgG 抗体测定(ELISA)第34页
     ·免疫鸡外周血 T 淋巴细胞亚类的检测第34页
     ·免疫鸡淋巴细胞增殖试验第34-35页
     ·攻毒后 SPF 鸡主要脏器病理学观察第35页
     ·数据处理第35页
   ·结果第35-43页
     ·人工合成密码子优化的 F 基因第35页
     ·载体的构建和鉴定第35-36页
     ·pVAX1-F 和pVAX1-optiF 的体外表达第36-37页
     ·免疫及强毒攻击前后的 IgG 抗体变化第37-38页
     ·免疫鸡脾淋巴细胞增殖反应第38-39页
     ·免疫鸡外周血 CD4+、CD8+和 TCR γδ T 细胞数量的动态变化第39-40页
     ·主要脏器的病理学观察第40-42页
     ·试验鸡对 NDV F_(48)E_9株攻击的保护作用第42-43页
   ·讨论第43-45页
第三章 C3d 和 IL-2 增强密码子优化 NDV F 基因 DNA 疫苗免疫效果第45-63页
   ·材料第45-46页
     ·质粒载体、细菌、病毒与细胞第45页
     ·主要试剂和仪器第45-46页
   ·方法第46-51页
     ·RT-PCR 扩增鸡补体 C3d 基因第46页
     ·融合表达optiF 与 C3d 真核表达载体的构建第46-47页
     ·质粒 DNA 的大量制备与纯化第47-49页
     ·重组质粒的体外表达鉴定第49页
     ·SPF 鸡的免疫第49-50页
     ·免疫鸡血清特异性 IgG 抗体测定(ELISA)第50页
     ·免疫鸡外周血 T 淋巴细胞亚类的检测第50页
     ·免疫鸡淋巴细胞增殖试验第50-51页
     ·数据处理第51页
   ·结果第51-59页
     ·鸡补体 C3d 片段的扩增第51页
     ·载体的构建和鉴定第51-52页
     ·重组质粒的体外表达第52-54页
     ·免疫及强毒攻击前后血清特异性抗体的变化第54-55页
     ·免疫鸡脾 T 淋巴细胞增殖反应第55-56页
     ·免疫鸡外周血 CD4+、CD8+和 TCR γδ T 细胞数量的动态变化第56-58页
     ·试验鸡对 NDV F48E9 株攻击的保护作用第58-59页
   ·讨论第59-63页
第四章 全文结论第63-64页
参考文献第64-77页
附录第77-80页
致谢第80-81页
作者简历第81页

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