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多重PCR检测猪伪狂犬、细小病毒和猪圆环病毒2型方法的建立和应用

摘要第1-6页
SUMMARY第6-7页
英文缩略表第7-11页
第一部分 文献综述第11-26页
 第一章 猪伪狂犬病毒研究进展第11-17页
  1. 猪伪狂犬病概述第11-12页
  2. PR 国内外流行动态第12页
  3. PRV 病原学及分子生物学第12-14页
   ·形态结构、培养特性第12页
   ·PRV 的基因组结构第12-13页
   ·病毒糖蛋白的结构和功能第13-14页
  4. PRV 病毒检测第14-15页
   ·病毒分离(VI)第14页
   ·动物接种试验第14页
   ·血清学检测方法第14-15页
     ·反向间接血凝试验(RPHA)第14页
     ·免疫荧光技术(FA)第14页
     ·ELISA 试验第14-15页
   ·分子生物学检测第15页
     ·核酸探针技术第15页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第15页
  5. 伪狂犬病毒疫苗第15-17页
 第二章 猪细小病毒研究进展第17-21页
  1. 猪细小病毒病的概述第17页
  2. PPV 国内外流行动态第17页
  3. 病原学及分子生物学第17-19页
   ·病毒形态及理化性质第17-18页
   ·毒株分型第18页
   ·PPV 的培养特性第18页
   ·PPV 复制特点第18页
   ·PPV 非结构蛋白和结构蛋白第18-19页
  4. PPV 诊断方法第19-21页
   ·病毒的分离鉴定第19页
   ·血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验第19页
   ·血清中和试验(SN)第19-20页
   ·酶联免疫吸附试验(ELISIA)第20页
   ·乳胶凝集试验(LAT)第20页
   ·免疫荧光抗体技术第20页
   ·PCR 检测技术第20-21页
 第三章 猪圆环病毒研究进展第21-26页
  1. 猪圆环病毒感染的概述第21页
  2. PCV 国内外流行动态第21页
  3. 病原学及分子生物学第21-23页
   ·PCV 形态、理化性质及培养特性第21-22页
   ·基因组结构第22页
   ·PCV 编码蛋白及其功能第22-23页
  4. 猪圆环病毒的诊断第23-24页
   ·病毒的分离鉴定第23页
   ·间接免疫荧光试验(IIF)第23页
   ·免疫过氧化物酶单层细胞试验(IMPA)第23页
   ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第23页
   ·分子生物学诊断方法第23-24页
     ·核酸探针及原位杂交第23-24页
     ·聚合酶链式反应法(PCR)第24页
  5. 多重PCR 技术第24-26页
   ·多重PCR 的技术要素第24-25页
   ·多重PCR 技术的应用第25-26页
第二部分 研究报告第26-42页
 第一章 建立三重PCR 方法快速鉴别猪伪狂犬疫苗毒和野毒第26-30页
  1 材料与方法第26-27页
   ·毒株第26页
   ·试剂第26页
   ·方法第26-27页
     ·DNA 模板制备第26页
     ·引物设计第26页
     ·PCR 扩增条件的优化第26-27页
     ·测序分析第27页
     ·特异性实验第27页
     ·敏感性试验第27页
     ·商品化疫苗的检测第27页
  2 结果第27-29页
   ·PCR 方法的建立和产物序列分析第27-28页
   ·PCR 检测的特异性第28页
   ·PCR 检测的敏感性第28页
   ·PCR 对商品化疫苗检测结果第28-29页
  3 讨论第29-30页
 第二章 检测猪细小病毒(PPV)、圆环病毒2 型(PCV2)及猪伪狂犬病毒(PRV)疫苗毒和野毒的复合式PCR 方法的建立第30-38页
  1 材料与方法第30-32页
   ·毒株第30页
   ·试剂第30页
   ·方法第30-32页
     ·DNA 模板制备第30-31页
     ·引物设计第31页
     ·PCR 扩增条件的初步建立第31页
     ·单项PCR 反应最适条件的确定第31-32页
     ·测序分析第32页
     ·四重PCR 方法的建立第32页
     ·四重PCR 特异性实验第32页
     ·四重PCR 敏感性试验第32页
     ·样品的检测第32页
  2 结果第32-37页
   ·单项 PCR 方法反应条件优化及测序结果第32-34页
   ·四重PCR 反应体系及扩增条件的优化和建立第34-35页
   ·四重PCR 特异性实验第35页
   ·四重PCR 敏感性试验第35-36页
   ·样品的检测第36-37页
  3 讨论第37-38页
 第三章 DMSO对高GC含量PRV gB基因PCR扩增影响第38-41页
  1 材料与方法第38页
   ·试剂和引物第38页
   ·模板 DNA第38页
   ·PCR 反应体系第38页
  2. 结果第38-39页
  3 讨论第39-41页
 第四章 结论第41-42页
参考文献第42-49页
致谢第49-50页
作者简介第50-51页
导师简介第51页

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