摘要 | 第1-6页 |
SUMMARY | 第6-7页 |
英文缩略表 | 第7-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-26页 |
第一章 猪伪狂犬病毒研究进展 | 第11-17页 |
1. 猪伪狂犬病概述 | 第11-12页 |
2. PR 国内外流行动态 | 第12页 |
3. PRV 病原学及分子生物学 | 第12-14页 |
·形态结构、培养特性 | 第12页 |
·PRV 的基因组结构 | 第12-13页 |
·病毒糖蛋白的结构和功能 | 第13-14页 |
4. PRV 病毒检测 | 第14-15页 |
·病毒分离(VI) | 第14页 |
·动物接种试验 | 第14页 |
·血清学检测方法 | 第14-15页 |
·反向间接血凝试验(RPHA) | 第14页 |
·免疫荧光技术(FA) | 第14页 |
·ELISA 试验 | 第14-15页 |
·分子生物学检测 | 第15页 |
·核酸探针技术 | 第15页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第15页 |
5. 伪狂犬病毒疫苗 | 第15-17页 |
第二章 猪细小病毒研究进展 | 第17-21页 |
1. 猪细小病毒病的概述 | 第17页 |
2. PPV 国内外流行动态 | 第17页 |
3. 病原学及分子生物学 | 第17-19页 |
·病毒形态及理化性质 | 第17-18页 |
·毒株分型 | 第18页 |
·PPV 的培养特性 | 第18页 |
·PPV 复制特点 | 第18页 |
·PPV 非结构蛋白和结构蛋白 | 第18-19页 |
4. PPV 诊断方法 | 第19-21页 |
·病毒的分离鉴定 | 第19页 |
·血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验 | 第19页 |
·血清中和试验(SN) | 第19-20页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISIA) | 第20页 |
·乳胶凝集试验(LAT) | 第20页 |
·免疫荧光抗体技术 | 第20页 |
·PCR 检测技术 | 第20-21页 |
第三章 猪圆环病毒研究进展 | 第21-26页 |
1. 猪圆环病毒感染的概述 | 第21页 |
2. PCV 国内外流行动态 | 第21页 |
3. 病原学及分子生物学 | 第21-23页 |
·PCV 形态、理化性质及培养特性 | 第21-22页 |
·基因组结构 | 第22页 |
·PCV 编码蛋白及其功能 | 第22-23页 |
4. 猪圆环病毒的诊断 | 第23-24页 |
·病毒的分离鉴定 | 第23页 |
·间接免疫荧光试验(IIF) | 第23页 |
·免疫过氧化物酶单层细胞试验(IMPA) | 第23页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第23页 |
·分子生物学诊断方法 | 第23-24页 |
·核酸探针及原位杂交 | 第23-24页 |
·聚合酶链式反应法(PCR) | 第24页 |
5. 多重PCR 技术 | 第24-26页 |
·多重PCR 的技术要素 | 第24-25页 |
·多重PCR 技术的应用 | 第25-26页 |
第二部分 研究报告 | 第26-42页 |
第一章 建立三重PCR 方法快速鉴别猪伪狂犬疫苗毒和野毒 | 第26-30页 |
1 材料与方法 | 第26-27页 |
·毒株 | 第26页 |
·试剂 | 第26页 |
·方法 | 第26-27页 |
·DNA 模板制备 | 第26页 |
·引物设计 | 第26页 |
·PCR 扩增条件的优化 | 第26-27页 |
·测序分析 | 第27页 |
·特异性实验 | 第27页 |
·敏感性试验 | 第27页 |
·商品化疫苗的检测 | 第27页 |
2 结果 | 第27-29页 |
·PCR 方法的建立和产物序列分析 | 第27-28页 |
·PCR 检测的特异性 | 第28页 |
·PCR 检测的敏感性 | 第28页 |
·PCR 对商品化疫苗检测结果 | 第28-29页 |
3 讨论 | 第29-30页 |
第二章 检测猪细小病毒(PPV)、圆环病毒2 型(PCV2)及猪伪狂犬病毒(PRV)疫苗毒和野毒的复合式PCR 方法的建立 | 第30-38页 |
1 材料与方法 | 第30-32页 |
·毒株 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·方法 | 第30-32页 |
·DNA 模板制备 | 第30-31页 |
·引物设计 | 第31页 |
·PCR 扩增条件的初步建立 | 第31页 |
·单项PCR 反应最适条件的确定 | 第31-32页 |
·测序分析 | 第32页 |
·四重PCR 方法的建立 | 第32页 |
·四重PCR 特异性实验 | 第32页 |
·四重PCR 敏感性试验 | 第32页 |
·样品的检测 | 第32页 |
2 结果 | 第32-37页 |
·单项 PCR 方法反应条件优化及测序结果 | 第32-34页 |
·四重PCR 反应体系及扩增条件的优化和建立 | 第34-35页 |
·四重PCR 特异性实验 | 第35页 |
·四重PCR 敏感性试验 | 第35-36页 |
·样品的检测 | 第36-37页 |
3 讨论 | 第37-38页 |
第三章 DMSO对高GC含量PRV gB基因PCR扩增影响 | 第38-41页 |
1 材料与方法 | 第38页 |
·试剂和引物 | 第38页 |
·模板 DNA | 第38页 |
·PCR 反应体系 | 第38页 |
2. 结果 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
第四章 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
作者简介 | 第50-51页 |
导师简介 | 第51页 |