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湖羊ESR基因的检测及基因型与多胎性能的关系

致谢第1-9页
中文摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
第一章 文献综述第13-32页
 1 绵羊高繁殖力机制的研究现状第13-19页
   ·影响绵羊高繁殖力的生殖生理因素第13-15页
     ·内分泌机制第13-14页
     ·排卵数第14-15页
     ·子宫保胎能力第15页
     ·胚胎存活率第15页
   ·绵羊高繁殖力主效基因的研究现状第15-19页
     ·ESR基因第15-17页
     ·FECB基因第17页
     ·FECX基因第17-18页
     ·GDF9基因第18页
     ·WOODLAND基因第18-19页
 2 湖羊高繁殖力的研究现状第19-21页
   ·湖羊多胎的生殖生理第19-20页
   ·湖羊高繁殖力候选基因的研究进展第20-21页
 3 雌激素受体基因与繁殖性能关系的研究概况第21-25页
   ·雌激素受体的生物学作用及分布第21-22页
   ·雌激素受体基因与生殖器官发育特性的关系第22-23页
   ·雌激素受体基因在胚胎发育中的表达第23-24页
   ·雌激素受体基因对猪初生重和乳头数的影响第24页
   ·雌激素受体基因对绵羊繁殖性能影响的研究第24-25页
   ·雌激素受体基因多态性的研究现状第25页
 4 基因多态性分析的分子遗传标记方法第25-31页
   ·单链构象多态性分析第25-27页
     ·PCR-SSCP方法的原理第26页
     ·PCR-SSCP的特点第26-27页
     ·PCR-SSCP方法的应用现状第27页
   ·实时荧光PCR方法第27-31页
     ·实时荧光PCR方法的原理第28页
     ·实时荧光PCR方法的特点第28-29页
     ·实时荧光PCR方法分类第29页
     ·实时荧光PCR方法突变检测的应用第29-31页
 5 本研究的目的与意义第31-32页
第二章 材料与方法第32-48页
 1 实验材料第32-35页
   ·实验湖羊来源及采样方法第32页
   ·药品和酶第32-33页
   ·主要仪器设备第33页
   ·有关试剂和溶液的配制第33-35页
 2 实验方法第35-48页
   ·湖羊血液DNA的提取第35页
   ·DNA浓度和纯度的检测第35-36页
     ·DNA浓度和纯度的测定第35-36页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第36页
   ·PCR-SSCP和实时荧光PCR分析ESR基因的程序第36-41页
     ·引物的设计第36页
     ·引物溶液的配制第36页
     ·PCR反应体系及反应条件第36-37页
     ·SSCP检测步骤第37-40页
       ·PCR扩增产物的电泳第37-39页
       ·SYBR GREEN染色第39页
       ·SSCP结果的分型第39-40页
     ·实时荧光PCR检测步骤第40-41页
       ·实时荧光PCR反应体系及反应条件第40-41页
       ·实时荧光PCR产物分析第41页
   ·ESR基因第一外显子突变区的纯合子个体的克隆测序第41-45页
     ·目的片段的回收第41-42页
     ·连接反应第42-43页
     ·感受态细胞的制备—氯化钙法第43-44页
     ·转化第44页
     ·质粒DNA的小规模提取—碱裂解法第44-45页
     ·重组质粒的鉴定第45页
   ·统计分析方法第45-48页
     ·群体基因频率和基因型频率的计算第45-46页
     ·湖羊ESR基因位点HARDY-WEINBERG平衡状态的检验第46页
     ·检验公式第46页
     ·湖羊ESR基因型的独立性检验第46页
     ·湖羊ESR基因位点与湖羊繁殖力关系的分析第46-48页
第三章 湖羊ESR基因多态性检测的结果与分析第48-55页
 1 基因组的提取第48页
 2 ESR基因的SSCP电泳结果分析第48-49页
 3 ESR基因的PCR扩增产物电泳第49页
 4 ESR基因的实时荧光PCR检测第49-52页
 5 湖羊ESR基因测序分析结果第52页
 6 ESR基因的遗传效应分析第52-55页
   ·湖羊ESR基因频率和基因型频率第52-53页
   ·不同ESR基因基因型的湖羊产羔数的最小二乘平均值及标准误(表3-2)第53-54页
   ·湖羊群体ESR基因HARDY-WEINBERG平衡状态的检验(表3-3)第54-55页
第四章 讨论第55-59页
 1 ESR基因在湖羊中的多态性及基因型分布第55页
 2 ESR基因与湖羊产羔数的关系第55-56页
 3 检测湖羊ESR基因多态性的实时荧光PCR方法的初步建立第56-59页
第五章 结论第59-60页
创新点第60-61页
参考文献第61-71页
缩略词表第71页

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