致谢 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-32页 |
1 绵羊高繁殖力机制的研究现状 | 第13-19页 |
·影响绵羊高繁殖力的生殖生理因素 | 第13-15页 |
·内分泌机制 | 第13-14页 |
·排卵数 | 第14-15页 |
·子宫保胎能力 | 第15页 |
·胚胎存活率 | 第15页 |
·绵羊高繁殖力主效基因的研究现状 | 第15-19页 |
·ESR基因 | 第15-17页 |
·FECB基因 | 第17页 |
·FECX基因 | 第17-18页 |
·GDF9基因 | 第18页 |
·WOODLAND基因 | 第18-19页 |
2 湖羊高繁殖力的研究现状 | 第19-21页 |
·湖羊多胎的生殖生理 | 第19-20页 |
·湖羊高繁殖力候选基因的研究进展 | 第20-21页 |
3 雌激素受体基因与繁殖性能关系的研究概况 | 第21-25页 |
·雌激素受体的生物学作用及分布 | 第21-22页 |
·雌激素受体基因与生殖器官发育特性的关系 | 第22-23页 |
·雌激素受体基因在胚胎发育中的表达 | 第23-24页 |
·雌激素受体基因对猪初生重和乳头数的影响 | 第24页 |
·雌激素受体基因对绵羊繁殖性能影响的研究 | 第24-25页 |
·雌激素受体基因多态性的研究现状 | 第25页 |
4 基因多态性分析的分子遗传标记方法 | 第25-31页 |
·单链构象多态性分析 | 第25-27页 |
·PCR-SSCP方法的原理 | 第26页 |
·PCR-SSCP的特点 | 第26-27页 |
·PCR-SSCP方法的应用现状 | 第27页 |
·实时荧光PCR方法 | 第27-31页 |
·实时荧光PCR方法的原理 | 第28页 |
·实时荧光PCR方法的特点 | 第28-29页 |
·实时荧光PCR方法分类 | 第29页 |
·实时荧光PCR方法突变检测的应用 | 第29-31页 |
5 本研究的目的与意义 | 第31-32页 |
第二章 材料与方法 | 第32-48页 |
1 实验材料 | 第32-35页 |
·实验湖羊来源及采样方法 | 第32页 |
·药品和酶 | 第32-33页 |
·主要仪器设备 | 第33页 |
·有关试剂和溶液的配制 | 第33-35页 |
2 实验方法 | 第35-48页 |
·湖羊血液DNA的提取 | 第35页 |
·DNA浓度和纯度的检测 | 第35-36页 |
·DNA浓度和纯度的测定 | 第35-36页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第36页 |
·PCR-SSCP和实时荧光PCR分析ESR基因的程序 | 第36-41页 |
·引物的设计 | 第36页 |
·引物溶液的配制 | 第36页 |
·PCR反应体系及反应条件 | 第36-37页 |
·SSCP检测步骤 | 第37-40页 |
·PCR扩增产物的电泳 | 第37-39页 |
·SYBR GREEN染色 | 第39页 |
·SSCP结果的分型 | 第39-40页 |
·实时荧光PCR检测步骤 | 第40-41页 |
·实时荧光PCR反应体系及反应条件 | 第40-41页 |
·实时荧光PCR产物分析 | 第41页 |
·ESR基因第一外显子突变区的纯合子个体的克隆测序 | 第41-45页 |
·目的片段的回收 | 第41-42页 |
·连接反应 | 第42-43页 |
·感受态细胞的制备—氯化钙法 | 第43-44页 |
·转化 | 第44页 |
·质粒DNA的小规模提取—碱裂解法 | 第44-45页 |
·重组质粒的鉴定 | 第45页 |
·统计分析方法 | 第45-48页 |
·群体基因频率和基因型频率的计算 | 第45-46页 |
·湖羊ESR基因位点HARDY-WEINBERG平衡状态的检验 | 第46页 |
·检验公式 | 第46页 |
·湖羊ESR基因型的独立性检验 | 第46页 |
·湖羊ESR基因位点与湖羊繁殖力关系的分析 | 第46-48页 |
第三章 湖羊ESR基因多态性检测的结果与分析 | 第48-55页 |
1 基因组的提取 | 第48页 |
2 ESR基因的SSCP电泳结果分析 | 第48-49页 |
3 ESR基因的PCR扩增产物电泳 | 第49页 |
4 ESR基因的实时荧光PCR检测 | 第49-52页 |
5 湖羊ESR基因测序分析结果 | 第52页 |
6 ESR基因的遗传效应分析 | 第52-55页 |
·湖羊ESR基因频率和基因型频率 | 第52-53页 |
·不同ESR基因基因型的湖羊产羔数的最小二乘平均值及标准误(表3-2) | 第53-54页 |
·湖羊群体ESR基因HARDY-WEINBERG平衡状态的检验(表3-3) | 第54-55页 |
第四章 讨论 | 第55-59页 |
1 ESR基因在湖羊中的多态性及基因型分布 | 第55页 |
2 ESR基因与湖羊产羔数的关系 | 第55-56页 |
3 检测湖羊ESR基因多态性的实时荧光PCR方法的初步建立 | 第56-59页 |
第五章 结论 | 第59-60页 |
创新点 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-71页 |
缩略词表 | 第71页 |