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不同ω-3PUFA含量对绍兴鸭肝脏和脾脏中INF-γ和IL-2基因表达影响的研究

中文摘要第1-13页
第一部分 文献综述第13-31页
 1 ω-3 PUFA、VE及二氢吡啶的研究进展第13-24页
   ·ω-3 PUFA研究现状第13-23页
     ·多不饱和脂肪酸结构组成第13-14页
     ·ω-3PUFA的功能及其来源第14-17页
     ·ω-3PUFA的生物学功能第17-21页
       ·ω-3PUFA对生物膜的作用第17-18页
       ·ω-3PUFA对机体免疫功能的影响第18-20页
       ·ω-3PUFA对细胞因子的影响第20-21页
     ·ω-3PUFA的研究现状第21-23页
   ·抗氧化剂VE和二氢吡啶的免疫作用第23-24页
     ·VE对机体的免疫作用第23-24页
     ·二氢吡啶对机体的免疫作用第24页
 2 禽类INF-γ与IL-2的研究进展第24-31页
   ·细胞因子的种类及作用第24-25页
   ·INF-γ和IL-2的结构和性质第25-27页
   ·INF-γ和IL-2的基因工程第27-28页
   ·INF-γ和IL-2的生物学特性以及研究进展第28-29页
   ·INF-γ和IL-2在禽类的应用展望第29-31页
第二部分 本论文研究的目的和意义第31-34页
 1 研究主题的提出第31-32页
 2 本研究拟探讨的问题第32-33页
 3 本研究目的意义第33-34页
第三部分 实验研究第34-65页
 试验一 在饲料中添加不同比例的ω-3PUFA对绍鸭肝脏和脾脏中INF-γ及IL-2的mRNA表达影响第34-57页
  1 材料和方法第34-38页
   ·试验材料与动物第34页
   ·试验设计及日粮组成第34-37页
     ·试验设计第34-35页
       ·饲养试验第34页
       ·屠宰试验第34-35页
       ·样品收集与保存第35页
     ·日粮组成第35页
     ·试验设计技术路线第35-37页
   ·试验试剂第37页
     ·脾脏和肝脏中总RNA提取试剂第37页
     ·RT-PCR试剂第37页
     ·普通PCR反应试剂第37页
     ·荧光定量PCR反应试剂第37页
   ·溶液的配制第37-38页
   ·琼脂糖凝胶的制备第38页
   ·仪器设备第38页
  2 试验方法第38-42页
   ·总RNA的提取与检测第38-40页
     ·总RNA的提取第38-39页
     ·RNA的定量第39-40页
     ·琼脂糖凝胶电泳第40页
   ·cDNA的合成第40页
   ·普通PCR扩增第40-41页
     ·PCR引物的设计与合成第40-41页
     ·PCR扩增、产物回收、克隆测序第41页
   ·实时荧光定量PCR反应第41-42页
     ·Real-time RT-PCR条件的优化及标准曲线的建立第41页
     ·熔解曲线分析第41-42页
     ·重复性和再现性试验第42页
     ·进行实时荧光定量PCR反应第42页
   ·数据分析第42页
  3 结果与分析第42-54页
   ·肝脏和脾脏总RNA电泳结果第42页
   ·绍鸭INF-γ和IL-2基因RT-PCR扩增及克隆测序第42-43页
   ·SYBR Green I real-time RT-PCR条件的优化第43页
   ·标准曲线第43-45页
   ·标准品熔解曲线分析结果第45-47页
   ·重复性和再现性第47-48页
   ·RRT-PCR扩增曲线及熔解曲线结果第48-51页
     ·INF-γ、IL-2及β-actin在不同组织中的扩增曲线第48-49页
     ·INF-γ、IL-2样品熔解曲线第49-51页
   ·不同饲养组中脾脏重量的变化情况第51页
   ·INF-γ、IL-2在不同饲养组中mRNA表达情况第51-54页
     ·INF-γ、IL-2在脾脏中的表达第51-52页
     ·INF-γ、IL-2在肝脏中表达第52-54页
  4 讨论第54-56页
   ·ω-3PUFA对脾脏重量的影响第54页
   ·ω-3PUFA对脾脏中INF-γ、IL-2的mRNA表达影响第54-55页
   ·ω-3PUFA对肝脏中INF-γ、IL-2的mRNA表达影响第55-56页
  5 小结第56-57页
 试验二 在2%亚麻油的饲料中添加不同抗氧化剂对绍鸭肝脏和脾脏中INF-γ及IL-2的mRNA表达影响第57-65页
  1 材料和方法第57-59页
   ·试验材料与动物第57页
   ·试验设计及日粮组成第57-58页
     ·试验设计第57-58页
     ·日粮组成第58页
   ·试验试剂第58页
   ·溶液的配制第58页
   ·琼脂糖凝胶的制备第58-59页
   ·仪器设备第59页
  2 试验方法第59页
  3 结果与分析第59-62页
   ·肝脏和脾脏总RNA电泳结果第59页
   ·绍鸭INF-γ和IL-2基因RT-PCR扩增及克隆测序第59页
   ·SYBR Green I real-time RT-PCR条件的优化第59页
   ·标准曲线第59页
   ·熔解曲线分析结果第59页
   ·INF-γ、IL-2及β-actin在不同组织中的扩增曲线第59页
   ·INF-γ、IL-2在不同饲养组中mRNA表达情况第59-62页
     ·INF-γ、IL-2在脾脏中的表达第59-61页
     ·INF-γ、IL-2在肝脏中的表达第61-62页
  4 讨论第62-63页
   ·不同抗氧化剂VE、二氢吡啶对INF-γ、IL-2分子在脾脏中表达的影响第62-63页
   ·不同抗氧化剂VE、二氢吡啶对INF-γ、IL-2分子在肝脏中表达的影响第63页
  5 小结第63-65页
第四部分 结论与创新第65-67页
 1 研究结论第65页
 2 研究创新第65-67页
参考文献第67-75页
英文摘要第75-77页
致谢第77页

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