| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-25页 |
| ·鸭病毒性肠炎概述 | 第13-19页 |
| ·流行病学 | 第13-14页 |
| ·临床症状 | 第14页 |
| ·病理剖检变化 | 第14页 |
| ·诊断 | 第14-18页 |
| ·鸭病毒性肠炎的防制 | 第18-19页 |
| ·鸭肠炎病毒研究概述 | 第19-22页 |
| ·鸭肠炎病毒的生物学特性 | 第19-21页 |
| ·鸭肠炎病毒的分子生物学特性 | 第21-22页 |
| ·疱疹病毒糖蛋白E（gE）的研究进展 | 第22-23页 |
| ·疱疹病毒糖蛋白E 的特点 | 第23页 |
| ·疱疹病毒糖蛋白E 的生物学功能 | 第23页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·实验动物 | 第25页 |
| ·毒株、菌株、细胞和载体 | 第25页 |
| ·引物 | 第25-26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·主要试验器材及仪器设备 | 第26-27页 |
| ·鸭肠炎病毒的增殖与浓缩粗纯 | 第27-28页 |
| ·病毒的增殖 | 第27页 |
| ·浓缩粗纯 | 第27页 |
| ·电镜观察 | 第27-28页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 基因的克隆 | 第28-30页 |
| ·DEV 基因组DNA 的提取 | 第28页 |
| ·gE 基因的扩增 | 第28页 |
| ·PCR 产物的克隆和转化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒阳性克隆的筛选与鉴定 | 第29页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 基因及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第29-30页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白及其主要抗原区域的原核表达与鉴定 | 第30-33页 |
| ·目的基因的扩增与克隆 | 第30-31页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第31-32页 |
| ·目的基因的诱导表达及纯化 | 第32页 |
| ·表达产物的Western blot 分析 | 第32-33页 |
| ·兔抗gE 蛋白高免血清的制备及鉴定 | 第33-34页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第33页 |
| ·多克隆抗体效价测定 | 第33-34页 |
| ·兔抗gE 血清反应原性的鉴定 | 第34页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白部分功能的研究 | 第34-35页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白的定位研究 | 第34页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白的中和活性鉴定 | 第34-35页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白对病毒吸附的影响 | 第35页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白对病毒侵入的影响 | 第35页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白对病毒细胞间传播的影响 | 第35页 |
| ·表达绿色荧光蛋白的鸭肠炎病毒gE 基因转移载体的构建 | 第35-39页 |
| ·gE 同源臂基因的克隆 | 第35-36页 |
| ·同源臂基因连接入pUC19 载体 | 第36-37页 |
| ·pUC19-gE-EGFP 转移载体构建 | 第37-38页 |
| ·转移载体质粒pUC19-gE-EGFP 转染DEF | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-61页 |
| ·超离粗纯鸭肠炎病毒的电镜结果 | 第39页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 基因的克隆 | 第39-40页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 基因的扩增 | 第39-40页 |
| ·重组克隆载体的鉴定 | 第40页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 基因及其编码产物的生物信息学分析 | 第40-49页 |
| ·gE 基因及其编码产物的同源性分析 | 第40-42页 |
| ·gE 基因编码产物的结构预测与功能性基序分析 | 第42-47页 |
| ·gE 基因编码产物的抗原性分析 | 第47-49页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白及其主要抗原区域的原核表达与鉴定 | 第49-53页 |
| ·目的基因的扩增与克隆 | 第49-51页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第51-52页 |
| ·目的基因的诱导表达及纯化 | 第52页 |
| ·表达产物的Western blot 分析 | 第52-53页 |
| ·兔抗gE 蛋白高免血清的制备及鉴定 | 第53-55页 |
| ·多克隆抗体效价测定 | 第53-54页 |
| ·兔抗gE 血清反应原性的鉴定 | 第54-55页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白部分功能的研究 | 第55-58页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白的定位研究 | 第55页 |
| ·噬斑减数中和试验 | 第55-56页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白对病毒吸附的影响 | 第56-57页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白对病毒侵入的影响 | 第57页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白对病毒细胞间传播的影响 | 第57-58页 |
| ·表达绿色荧光蛋白的鸭肠炎病毒gE 基因转移载体的构建 | 第58-61页 |
| ·同源臂基因gE 的克隆 | 第58-59页 |
| ·阳性质粒pUC19-gE 鉴定结果 | 第59-60页 |
| ·阳性质粒pUC19-gE-EGFP 鉴定结果 | 第60页 |
| ·转移载体质粒pUC19-gE-EGFP 转染DEF 结果 | 第60-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-66页 |
| ·鸭肠炎病毒的纯化 | 第61页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 基因及其编码产物的生物信息学分析 | 第61-62页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 基因表达、纯化、鉴定及抗体的制备 | 第62-63页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 部分功能的研究 | 第63-64页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白定位的研究 | 第63页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 蛋白中和活性的鉴定 | 第63-64页 |
| ·鸭肠炎病毒gE 对病毒的吸附、侵入及细胞间传播的影响 | 第64页 |
| ·表达绿色荧光蛋白的鸭肠炎病毒gE 基因转移载体构建 | 第64-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第74页 |
