人细胞外超氧化物歧化酶的分子改造
| 提要 | 第1-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-15页 |
| ·自由基 | 第7-8页 |
| ·SOD概述 | 第8-11页 |
| ·SOD的种类及其分布 | 第8-9页 |
| ·SOD的物理化学性质 | 第9页 |
| ·超氧阴离子与SOD的催化机理 | 第9-10页 |
| ·SOD的应用 | 第10-11页 |
| ·EC-SOD的结构和生物功能 | 第11-14页 |
| ·EC-SOD的结构及其二硫键 | 第11-13页 |
| ·EC-SOD的生物功能 | 第13-14页 |
| ·本研究的意义和依据 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料 | 第15-19页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·菌株和质粒 | 第16页 |
| ·溶液配制 | 第16-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·其它 | 第18-19页 |
| 第三章 实验原理及方法 | 第19-32页 |
| ·实验原理与实验流程 | 第19-21页 |
| ·实验设计原理 | 第19-20页 |
| ·实验流程 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-32页 |
| ·目的基因的获得 | 第21-24页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第24-26页 |
| ·感受态的制备与转化 | 第26-27页 |
| ·重组子的验证 | 第27页 |
| ·诱导表达与分离提取 | 第27-29页 |
| ·试剂盒操作方法 | 第29-30页 |
| ·酶学性质分析 | 第30-32页 |
| 第四章 实验结果 | 第32-44页 |
| ·目的基因的构建 | 第32-34页 |
| ·模板质粒的提取 | 第32页 |
| ·PCR获得大片段A基因和小片段B基因 | 第32-33页 |
| ·目的基因的获得 | 第33-34页 |
| ·目的基因连接入载体中 | 第34-35页 |
| ·目的基因的双酶切 | 第34页 |
| ·载体的双酶切 | 第34-35页 |
| ·重组子的筛选和鉴定 | 第35-38页 |
| ·重组子大小的验证 | 第35页 |
| ·重组子双酶切的验证 | 第35-36页 |
| ·PCR验证 | 第36页 |
| ·序列分析 | 第36-38页 |
| ·表达与纯化 | 第38-41页 |
| ·表达 | 第38-39页 |
| ·纯化 | 第39-41页 |
| ·酶学性质分析 | 第41-44页 |
| ·酶活性 | 第41页 |
| ·酶的NBT活性染色 | 第41-42页 |
| ·酶的热稳定性 | 第42页 |
| ·酶的酸碱稳定性 | 第42-43页 |
| ·变性剂对酶的稳定性影响 | 第43-44页 |
| 第五章 讨论 | 第44-47页 |
| ·酶的分子改造 | 第44页 |
| ·原核表达系统的选择 | 第44-45页 |
| ·SOD的酶活测定方法 | 第45-47页 |
| 第六章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 摘要 | 第54-56页 |
| ABSTRACT | 第56-58页 |
