| 中文摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 前言 | 第14-18页 |
| 参考文献 | 第15-18页 |
| 第一部分 B7-H4在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义 | 第18-35页 |
| 材料 | 第18-20页 |
| 一、细胞株 | 第18页 |
| 二、临床资料及标本来源 | 第18-19页 |
| 三、主要试剂 | 第19页 |
| 四、主要仪器 | 第19-20页 |
| 方法 | 第20-27页 |
| 一、细胞的培养 | 第20-21页 |
| 二、B7-H4的PCR检测 | 第21-23页 |
| 三、B7-H4的Western-blot检测 | 第23-26页 |
| 四、免疫组化（SP法） | 第26-27页 |
| 五、统计学处理 | 第27页 |
| 结果 | 第27-30页 |
| 一、NSCLC细胞系中B7-H4的表达 | 第27-28页 |
| 二、B7-H4蛋白在NSCLC组织中的表达 | 第28-29页 |
| 三、B7-H4蛋白的表达与NSCLC临床病理特征的关系（表 1-9） | 第29-30页 |
| 讨论 | 第30-32页 |
| 结论 | 第32页 |
| 参考文献 | 第32-35页 |
| 第二部分 靶向B7-H4的小干扰RNA慢病毒载体的构建与包装、稳转细胞株的构建 | 第35-75页 |
| 材料 | 第35-38页 |
| 一、主要试剂 | 第35-37页 |
| 二、主要仪器 | 第37-38页 |
| 方法 | 第38-60页 |
| 一、总的实验流程（图 2-1） | 第38-39页 |
| 二、目的基因B7-H4 RNAi靶点设计及其shRNA的合成： | 第39-42页 |
| 三、双链DNA片段的制备 | 第42页 |
| 四、Gv115/B7-H4-shRNA重组慢病毒载体的构建 | 第42-46页 |
| 五、阳性克隆质粒的扩增与提取 | 第46-47页 |
| 六、慢病毒包装 | 第47-53页 |
| 七、慢病毒感染目的细胞A549 | 第53-54页 |
| 八、RNAi干扰有效靶点的验证 | 第54-60页 |
| 结果 | 第60-70页 |
| 一、Age I和EcoR I酶切线性化GV115载体 | 第60页 |
| 二、重组质粒载体PCR鉴定 | 第60-63页 |
| 三、测序结果 | 第63-64页 |
| 四、慢病毒载体滴度测定结果 | 第64-67页 |
| 五、慢病毒感染A549细胞检测感染效率 | 第67页 |
| 六、FCM检测转染效率（见图 2-18） | 第67-68页 |
| 七、Real-time PCR內源验证干扰效果 | 第68-69页 |
| 八、Western-blot內源验证干扰效果 | 第69-70页 |
| 讨论 | 第70-72页 |
| 结论 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-75页 |
| 第三部分 RNA干扰抑制B7-H4表达对非小细胞肺癌 生物学行为影响的体内外研究 | 第75-106页 |
| 材料 | 第75-79页 |
| 一、主要试剂 | 第75-77页 |
| 二、主要仪器 | 第77-79页 |
| 方法 | 第79-89页 |
| 一、主要路线图 | 第79页 |
| 二、CCK-8 比色法检测A549细胞的增殖 | 第79-80页 |
| 三、肿瘤细胞迁徙实验（transwell小室） | 第80-81页 |
| 四、侵袭实验（Transwell Matrigel） | 第81-82页 |
| 五、流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第82-83页 |
| 六、流式细胞仪检测细胞周期 | 第83-84页 |
| 七、Real-time PCR检测凋亡和周期相关分子的表达 | 第84-85页 |
| 八、Western-blot检测凋亡和周期相关分子的表达 | 第85-87页 |
| 九、裸鼠体内实验 | 第87-89页 |
| 十、统计学处理 | 第89页 |
| 结果 | 第89-98页 |
| 一、体外实验 | 第89-94页 |
| 二、体内实验 | 第94-98页 |
| 讨论 | 第98-103页 |
| 结论 | 第103页 |
| 参考文献 | 第103-106页 |
| 全文总结 | 第106-107页 |
| 展望 | 第107-108页 |
| 综述 | 第108-125页 |
| 前言 | 第108页 |
| 一、B7-H4的结构、分布及生物学作用 | 第108-111页 |
| 二、B7-H4与人类恶性肿瘤 | 第111-115页 |
| 三、B7-H4和肿瘤免疫 | 第115-118页 |
| 总结 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-125页 |
| 全文缩略词 | 第125-127页 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 | 第127-128页 |
| 本课题获得基金资助 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129-131页 |
