| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 IGF-1综述 | 第11-18页 |
| ·IGF-1的结构特征 | 第11-13页 |
| ·IGF-1来源和作用方式 | 第13页 |
| ·IGF-1受体和其结合蛋白 | 第13-14页 |
| ·IGF-1的生物学功能及临床意义 | 第14页 |
| ·IGF-1表达形式 | 第14-16页 |
| ·重组hIGF-1国内外研制现状 | 第16-18页 |
| 参考文献 | 第18-21页 |
| 第二章 重组大肠杆菌在10L发酵罐高密度发酵工艺的研究 | 第21-29页 |
| 1.实验材料 | 第21-24页 |
| ·菌株 | 第21页 |
| ·主要生化试剂 | 第21-22页 |
| ·主要溶液的配制 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.实验方法 | 第24页 |
| ·基因工程菌的发酵罐培养 | 第24页 |
| 3.实验结果 | 第24-27页 |
| ·接种量的选择 | 第24页 |
| ·IPTG浓度对蛋白表达的影响 | 第24-25页 |
| ·诱导时间的确定 | 第25-26页 |
| ·诱导方式的选择 | 第26页 |
| ·溶氧的控制 | 第26-27页 |
| ·pH的控制 | 第27页 |
| ·补料的流加 | 第27页 |
| 4.小结与讨论 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-29页 |
| 第三章 rhIGF-1变复性及分离纯化研究 | 第29-40页 |
| 1.材料和方法 | 第29-30页 |
| ·仪器和设备 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29-30页 |
| ·主要溶液的配制 | 第30页 |
| 2.实验方法 | 第30-32页 |
| ·包涵体洗涤 | 第30-31页 |
| ·包涵体溶解 | 第31页 |
| ·蛋白质的复性 | 第31页 |
| ·凝胶过滤层析纯化 | 第31页 |
| ·阳离子交换层析 | 第31页 |
| ·目的蛋白的检测分析 | 第31-32页 |
| 3.实验结果 | 第32-37页 |
| ·包涵体洗涤 | 第32页 |
| ·不同变性剂对rhIGF-1包涵体溶解的影响 | 第32-33页 |
| ·不同还原剂对rhIGF-1包涵体溶解的影响 | 第33页 |
| ·不同pH复性液对rhIGF-1复性效果的影响 | 第33-34页 |
| ·不同稀释浓度对rhIGF-1复性效果的影响 | 第34页 |
| ·复性液中谷胱甘肽浓度的选择 | 第34-35页 |
| ·凝胶层析纯化目的蛋白 | 第35页 |
| ·阳离子交换层析纯化蛋白 | 第35页 |
| ·蛋白质的检测分析 | 第35-37页 |
| 4.小结与讨论 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-40页 |
| 第四章 LR~3-IGF-1纯化工艺的研究 | 第40-53页 |
| 1.材料 | 第40-41页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第40页 |
| ·仪器和设备 | 第40-41页 |
| 2.方法 | 第41-46页 |
| ·工程菌的发酵培养 | 第41页 |
| ·发酵 | 第41页 |
| ·包涵体的制备和变性 | 第41-42页 |
| ·包涵体的复性 | 第42页 |
| ·复性后蛋白的纯化 | 第42-44页 |
| ·蛋白质的检测分析 | 第44-46页 |
| 3.实验结果 | 第46-50页 |
| ·重组LR3-IGF-1发酵结果 | 第46-47页 |
| ·包涵体洗涤 | 第47页 |
| ·包涵体的变复性 | 第47页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| ·目的蛋白的检测 | 第48-50页 |
| 4.小结与讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |