拟南芥自体吞噬家族AtATG8转基因苗的筛选及分子鉴定
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-25页 |
| 一 细胞程序性死亡(PCD) | 第12-14页 |
| 二 自体吞噬 | 第14-22页 |
| ·自体吞噬的简介 | 第14-16页 |
| ·自体吞噬体的形成 | 第16页 |
| ·自体吞噬的分子机制 | 第16-18页 |
| ·自体吞噬的相关基因 | 第18页 |
| ·自体吞噬的调控 | 第18-21页 |
| ·调节基因 | 第18-19页 |
| ·基因调控 | 第19页 |
| ·mTOR 途径 | 第19页 |
| ·磷脂酰肌醇三磷酸激酶 | 第19-20页 |
| ·神经酰胺 | 第20-21页 |
| ·某些激素的作用 | 第21页 |
| ·自体吞噬是植物中PCD 的调节子 | 第21-22页 |
| 三 自体吞噬与细胞凋亡的关系 | 第22-25页 |
| 第二部分 实验论文 | 第25-45页 |
| 一 实验材料及实验方法 | 第25-35页 |
| 1 实验材料 | 第25-28页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·质粒载体及菌种 | 第25页 |
| ·酶及化学试 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·质粒提取液 | 第26页 |
| ·用CTAB 制备植物DNA（配方） | 第26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·引物序列 | 第27页 |
| ·分析软件 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-35页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第28-29页 |
| ·质粒的提取 | 第29页 |
| ·花序浸染法转化拟南芥 | 第29-31页 |
| ·拟南芥植物材料的种植 | 第29-30页 |
| ·转化用农杆菌菌液的制备 | 第30页 |
| ·渗透转化 | 第30页 |
| ·转化子的筛选 | 第30-31页 |
| ·植物基因组DNA 的提取 | 第31页 |
| ·Basta 抗性苗的PCR 检测 | 第31-32页 |
| ·转基因纯合系的胁迫处理 | 第32页 |
| ·Trizol 试剂提取植物总RNA | 第32-33页 |
| ·RNA 的定量 | 第33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析总RNA | 第33页 |
| ·半定量PCR 引物的设计 | 第33页 |
| ·RNA 的反转录及cDNA 模板的稀释 | 第33-34页 |
| ·RT-PCR | 第34-35页 |
| 二 实验结果 | 第35-42页 |
| 1 ATG8 基因的克隆及测序、载体的构建与验证 | 第35页 |
| 2 转基因拟南芥的筛选及分子鉴定 | 第35-42页 |
| ·转基因拟南芥的筛选 | 第35-36页 |
| ·分子鉴定 | 第36-40页 |
| ·普通PCR 鉴定 | 第36-37页 |
| ·半定量PCR 的鉴定 | 第37-40页 |
| ·表型差异 | 第40-42页 |
| ·不同启动子之间的表达差异 | 第40页 |
| ·不同处理条件下的表型差异 | 第40-42页 |
| 三 分析与讨论 | 第42-45页 |
| ·普通PCR 鉴定 | 第43页 |
| ·半定量PCR 鉴定 | 第43页 |
| ·不同处理条件下的表型差异 | 第43页 |
| ·CaMV35S 启动子的表达 | 第43-44页 |
| ·今后的工作 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 英文缩略表 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论著 | 第52页 |
