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紫花苜蓿耐逆性及AtNDPK2、codA基因的遗传转化研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
第一章 文献综述第14-39页
   ·紫花苜蓿的营养价值及生态功能第15-16页
     ·紫花苜蓿的营养价值及所含的生物活性物质第15页
     ·紫花苜蓿的生态功能第15-16页
   ·逆境条件下植物的适应机制第16-22页
     ·植物体内抗氧化系统对逆境的响应第16-20页
     ·逆境条件下的渗透调节第20-21页
     ·作物不同发育阶段对逆境的抗性第21-22页
   ·紫花苜蓿再生体系建立的研究进展第22-24页
     ·基因型对苜蓿再生的影响第22-23页
     ·外植体对苜蓿再生的影响第23页
     ·培养基类型对苜蓿再生的影响第23页
     ·激素配比对苜蓿再生的影响第23-24页
   ·紫花苜蓿转化体系建立的研究进展第24-25页
     ·苜蓿的遗传转化方法第24-25页
     ·影响苜蓿遗传转化的因素第25页
   ·抗逆性转基因苜蓿研究进展第25-27页
   ·植物抗逆基因工程相关的启动子和基因第27-36页
     ·组成型与胁迫诱导型启动子研究第27-29页
     ·核苷二磷酸激酶及其基因NDPK第29-34页
     ·胆碱氧化酶及其基因codA第34-36页
   ·目前研究存在的问题第36-37页
   ·本论文的研究目的、意义和技术路线第37-39页
第二章 不同苜蓿萌发期和苗期对盐渍、干旱及低温的生理响应第39-53页
   ·材料与方法第39-42页
     ·实验材料培养及处理第39-41页
     ·测定指标及方法第41-42页
   ·结果与分析第42-49页
     ·萌发期盐渍、干旱及低温胁迫条件的选择第42-45页
     ·NaCl 胁迫对紫花苜蓿萌发特性的影响第45页
     ·PEG 胁迫对紫花苜蓿萌发特性的影响第45页
     ·10℃低温处理对紫花苜蓿萌发特性的影响第45-47页
     ·NaCl 胁迫条件下紫花苜蓿叶片Fv/Fm 及总叶绿素含量的变化第47页
     ·PEG 胁迫条件下紫花苜蓿Fv/Fm 及总叶绿素含量的变化第47-48页
     ·MV 介导的氧化胁迫条件下紫花苜蓿叶片相对质膜透性的变化第48-49页
   ·讨论第49-51页
     ·萌发期苜蓿对各种逆境的忍耐性第49-50页
     ·苗期苜蓿对各种逆境的忍耐性第50-51页
     ·苜蓿不同发育阶段耐逆性的关系第51页
   ·本章小结第51-53页
第三章 苜蓿抗氧化酶防御系统对盐渍、干旱及低温的响应机制第53-71页
   ·材料与方法第54-56页
     ·实验材料培养及处理第54页
     ·测定指标及方法第54-56页
     ·数据处理及作图第56页
   ·结果与分析第56-68页
     ·NaCl 胁迫对苜蓿幼苗芽、根伸长及鲜重增加的影响第56-57页
     ·NaCl 胁迫对苜蓿幼苗芽、根H202、MDA 含量及相对质膜透性的影响..第57-58页
     ·NaCl 胁迫对苜蓿幼苗芽、根抗氧化保护酶活性的影响第58-59页
     ·NaCl 胁迫对苜蓿幼苗芽、根抗氧化保护酶同功酶的影响第59-60页
     ·PEG 胁迫对苜蓿幼苗芽、根伸长及鲜重增加的影响第60-61页
     ·PEG 胁迫对苜蓿幼苗芽、根H_2O_2、MDA 含量及相对质膜透性的影响第61-62页
     ·PEG 胁迫对苜蓿幼苗芽、根抗氧化保护酶活性的影响第62-63页
     ·PEG 胁迫对苜蓿幼苗芽、根抗氧化保护酶同功酶的影响第63-64页
     ·10℃低温胁迫对苜蓿幼苗芽、根伸长及鲜重增加的影响第64-65页
     ·10℃低温胁迫对苜蓿幼苗芽、根 H_2O_2、MDA 含量及相对质膜透性影响第65-66页
     ·10℃低温胁迫对苜蓿幼苗芽、根抗氧化保护酶活性的影响第66-67页
     ·10℃低温胁迫对苜蓿幼苗芽、根抗氧化保护酶同功酶的影响第67-68页
   ·讨论第68-70页
   ·本章小结第70-71页
第四章 苜蓿遗传转化受体系统的建立第71-81页
   ·实验材料及试剂第71-72页
     ·实验材料第71页
     ·主要试剂及培养基第71-72页
   ·实验方法第72-73页
     ·种子消毒及无菌苗培养第72页
     ·愈伤组织诱导第72页
     ·愈伤组织分化第72页
     ·根的诱导第72-73页
     ·扩繁及移栽第73页
     ·评价指标第73页
   ·结果与分析第73-78页
     ·不同基本培养基对愈伤诱导的影响第73-74页
     ·不同基因型、外植体和激素配比对愈伤诱导及其生长状况的影响第74-76页
     ·不同愈伤组织来源及培养基对愈伤组织分化的影响第76-77页
     ·生根、扩繁及移栽第77-78页
     ·不同培养基及激素组合下植株再生率的比较第78页
   ·讨论第78-80页
   ·本章小结第80-81页
第五章 AtNDPK2 和codA 基因对苜蓿的转化及转基因植株的氧化胁迫耐性分析第81-99页
   ·实验材料第81-84页
     ·实验植物材料及转化载体第81-82页
     ·主要抗生素溶液及培养基第82-84页
   ·实验方法第84-88页
     ·农杆菌菌种的保存及侵染悬浮液的制备第84页
     ·选择培养基中头孢霉素抑菌浓度的确定第84页
     ·头孢霉素对愈伤组织诱导和分化的影响第84页
     ·选择培养基中卡那霉素筛选浓度的确定第84页
     ·农杆菌侵染方式对转化的影响第84-85页
     ·最佳共培养时间的确定第85页
     ·农杆菌介导AtNDPK2 和codA 基因的转化及植株再生第85页
     ·转基因植株的分子生物学鉴定第85-87页
     ·转基因植株对MV 介导的氧化胁迫的忍耐性第87-88页
   ·结果与分析第88-95页
     ·头孢霉素对农杆菌EHA105 生长的影响第88页
     ·头孢霉素对下胚轴愈伤组织诱导及其分化的影响第88-89页
     ·选择培养基中卡那霉素选择压的确定第89-90页
     ·农杆菌侵染方式对转化的影响第90页
     ·共培养时间对转化的影响第90页
     ·AtNDPK2 和codA 基因转化植株的筛选与再生第90-92页
     ·再生植株的PCR 检测第92-93页
     ·不同转基因植株在MV 介导氧化胁迫条件下的RT-PCR 分析第93-94页
     ·转AtNDPK2 基因苜蓿对MV 介导的氧化胁迫的忍耐性第94-95页
     ·转codA 基因苜蓿对MV 介导的氧化胁迫的忍耐性第95页
   ·讨论第95-98页
     ·抗生素的使用及遗传转化影响因素分析第95-97页
     ·AtNDPK2 基因对苜蓿的遗传转化及其耐逆性第97页
     ·codA 基因对苜蓿的遗传转化及其耐逆性第97-98页
   ·本章小结第98-99页
第六章 主要结果与创新点第99-103页
   ·主要结果第99-101页
   ·本论文的创新点第101页
   ·进一步的研究设想第101-103页
参考文献第103-120页
缩略词第120-122页
致谢第122-123页
作者简介第123页

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